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公开(公告)号:CN109777745A
公开(公告)日:2019-05-21
申请号:CN201711130703.6
申请日:2017-11-15
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
Abstract: 一种合成桧烯的基因工程菌及其构建方法与应用,属于基因工程技术领域。本发明解决了游离基因在微生物发酵中不稳定、易丢失、不利于大规模的发酵生产,生产桧烯的原料成本高问题,本发明通过CRISPR-Cas9系统对酿酒酵母基因组进行编辑,将含有Cas9基因的pML104质粒转入酵母,在酵母中表达Cas9蛋白,同时转入含有同源臂的供体DNA,将桧烯合成酶基因SabS1整合到GAL80位点,同时将GAL80基因敲除,而不引入其它标记基因,利用5-FOA筛选质粒丢失的转化子酵母菌株,最终获得合成桧烯的基因工程菌;并用该菌株在含有合适碳源、氮源及其他生长因子的条件下,发酵生产桧烯。本发明可用于大规模发酵生产桧烯。
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公开(公告)号:CN107098928B
公开(公告)日:2019-02-26
申请号:CN201710469639.8
申请日:2017-06-20
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
IPC: C07F9/117
Abstract: 植酸提取的方法,它涉及一种植酸提取精制的方法。本发明是为了解决现有提取植酸的方法大量使用酸碱的技术问题,植酸提取的方法按照以下步骤进行:一、原料预处理;二、将预处理原料与水混合,调节pH值,然后预处理,固液分离,合并滤液和清洗液;过0.01微米超滤膜,收集透过液;将透过液进入电渗析器的淡水室,浓水室添加纯水,直到淡水室中植酸与氯离子的浓度比小于0.000286,将所得的溶液减压浓缩,得到浓度为50%‑70%的植酸。该工艺路线短,不需要大量酸碱,是一种绿色环保的新型植酸提取精制工艺。本发明生产液体植酸提高了产品纯度。回收率可达87.2,纯度可达87.8。本发明属于植酸提取的领域。
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公开(公告)号:CN109206476A
公开(公告)日:2019-01-15
申请号:CN201811383933.8
申请日:2018-11-20
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
Abstract: 一种蛋白分离纯化的方法,属于蛋白纯化技术领域。本发明为了能够大剂量纯化出纯度较高的蛋白,本发明提供了一种蛋白分离纯化的方法,包括如下步骤:制备正电荷分子筛:将不带电荷的分子筛树脂与有机溶剂混合,在变性剂和保护剂的作用下,在140-160℃下反应的时间为24-48h,制备获得复合分子筛树脂,再加入酸性溶液抽滤洗涤至中性,干燥后获得正电荷分子筛;将待纯化的蛋白样品经步骤1)获得的正电荷分子筛过滤,获得的滤液经尺寸排阻色谱层析对蛋白进行纯化,或者将获得的滤液经阴离子交换层析对蛋白进行纯化,获得纯化溶液。本发明使用于工业化生产目的蛋白。
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公开(公告)号:CN109097378A
公开(公告)日:2018-12-28
申请号:CN201810916774.7
申请日:2018-08-13
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
Abstract: 本发明公开了一种异戊二烯合酶和其编码基因、表达载体、工程菌以及生产异戊二烯的方法及应用,属于基因工程技术领域。该异戊二烯合酶基因IspSib的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,异戊二烯合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,本发明还提供了一种含有所述异戊二烯合酶基因的原核表达载体以及由该原核表达载体以及甲羟戊酸途径下游表达载体共转化获得产异戊二烯工程菌,本发明还提供了一种发酵生产异戊二烯的方法以及上述异戊二烯合酶基因、异戊二烯合酶、具有异戊二烯合酶活性的酶、其原核表达载体及其工程菌在生产异戊二烯中的应用。本发明所提供的异戊二烯合酶酶活性较高且对底物DMAPP的亲和力高。
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公开(公告)号:CN108659055A
公开(公告)日:2018-10-16
申请号:CN201810400796.8
申请日:2018-04-28
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
IPC: C07F15/02 , C08F136/08 , C08F4/70
Abstract: 本发明公开了一种基于柔性骨架的铁配合物、其制备方法及其在异戊二烯聚合中的应用,所述基于柔性骨架的铁配合物作为主催化剂,助催化剂为三甲基铝、三乙基铝、三异丁基铝、甲基铝氧烷或改性的甲基铝氧烷。步骤为:将主催化剂,溶剂和助催化剂加入后,再加入异戊二烯单体进行聚合反应从而得到聚异戊二烯。得到的异戊橡胶中顺式1,4结构所占比例范围为29-48%,3,4结构所占比例范围为52-71%。而且聚合物分子量高,分子量分布窄。本发明提供的异戊橡胶制备方法可以有效地提高铁系催化剂的使用效率和工业应用价值。
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公开(公告)号:CN108484504A
公开(公告)日:2018-09-04
申请号:CN201810402124.0
申请日:2018-04-28
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
IPC: C07D231/12 , C07C46/02 , C07C50/04
Abstract: 本发明公开了一种仿生催化断裂芳基含氮化合物中C-N键的方法,使用金属卟啉模拟酶仿生催化芳基含氮化合物中C-N键断裂的反应体系,涉及催化剂的制备和反应体系优化。本发明采用铁卟啉、锰卟啉和钴卟啉作为模拟酶,以H2O2为氧化剂,分别实现了催化不同结构的芳基吡唑衍生物C-N键断裂,氮杂环产物收率最高可达15.2%,为生物酶催化的4倍,且与硝酸铈铵氧化的收率(20%)接近。本发明与传统氧化剂或过渡金属催化体系相比具有简单、温和、经济及绿色的优点。
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公开(公告)号:CN108440698A
公开(公告)日:2018-08-24
申请号:CN201810399932.6
申请日:2018-04-28
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
IPC: C08F136/08 , C08F4/68
Abstract: 本发明公开了一种高反式-1,4-聚异戊二烯的制备方法,涉及化学合成领域,技术方案为:在惰性气体氛围下,将主催化剂、溶剂、异戊二烯单体和助催化剂混合进行聚合反应,制备高反式-1,4-聚异戊二烯。本申请的催化剂体系能在较温和的条件下催化异戊二烯的聚合,得到高分子、低分子量分布的异戊橡胶。反应对温度比较敏感,聚合物的微观结构可通过温度的调节进行调控,反式1,4-异戊橡胶的比例可调范围为68-99%,顺式-1,4-异戊橡胶的比例范围为0-23%,3,4-异戊橡胶的比例可调范围为0-7%。
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公开(公告)号:CN105018511B
公开(公告)日:2018-08-17
申请号:CN201510458357.9
申请日:2015-07-30
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
Abstract: 本发明公开了一种体外酶反应合成间苯三酚的方法及应用,属于生物工程技术领域。本发明所提供的方法是分别构建含有乙酰辅酶A合成酶ACS基因,乙酰辅酶A羧化酶亚基基因accA,乙酰辅酶A羧化酶亚基基因accB,乙酰辅酶A羧化酶亚基基因accC,乙酰辅酶A羧化酶亚基基因accD及聚酮合成酶基因phlD的重组载体,将重组载体分别转化到宿主菌中后过表达,利用超声波破碎菌体,分离纯化后获得酶液,按比例混合酶液和反应底物后通过体外酶反应合成间苯三酚。本发明实现了通过体外酶反应合成间苯三酚,并可以精确调控各酶及辅助因子的用量。
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公开(公告)号:CN108085332A
公开(公告)日:2018-05-29
申请号:CN201711443855.1
申请日:2017-12-27
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
CPC classification number: C12N15/815 , C12N9/0065 , C12N11/02 , C12Y111/01
Abstract: 本发明提供了一种细胞表面展示有豆壳过氧化物酶的重组酵母菌及其构建方法与应用,属于基因工程技术领域。本发明通过设计如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,并将该序列化学合成后连接到pUC57-simple载体上,然后亚克隆到pMIZY05v2表达载体上,构建重组载体pMIZY05v2-oEp,经线性化后转化到解脂耶罗威亚酵母PO1h菌株中,得到可表面展示重组豆壳过氧化物酶的工程菌,然后在含有血红素的PPB培养基中培养2~5d,离心收集细胞即得固定化重组豆壳过氧化物酶。利用通过简单离心收集菌体即可得到重组豆壳过氧化物酶,可以省去过氧化酶繁琐的分离纯化步骤,简化生产工艺,降低生产成本。
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公开(公告)号:CN107793514A
公开(公告)日:2018-03-13
申请号:CN201711229796.8
申请日:2017-11-29
Applicant: 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 辽宁庆阳特种化工有限公司
IPC: C08F212/08 , C08F212/36 , C08F8/04 , C08F8/30 , B01J20/26 , B01J20/30 , C02F1/28
CPC classification number: B01J20/265 , C02F1/285 , C08F8/04 , C08F8/30 , C08F212/08 , C08F212/36
Abstract: 一种功能基化超高交联树脂及其制备方法,属于树脂合成领域。本发明解决了现有技术中以氯甲基化的苯乙烯二乙烯苯共聚物为骨架制备功能基化超高交联树脂时,氯甲基降低树脂的超高交联程度,以及较大的官能团占据孔道空间,不利于吸附质在树脂内部的传质的问题。本发明以苯乙烯-二乙烯基苯为骨架,利用硝化试剂硝化超高交联树脂,再用还原剂将硝基还原为胺基,在超高交联树脂骨架中引入含氮、氧元素的官能团,从而制备出一系列硝化还原树脂,可用于高吸附性能的树脂合成、芳香化物的生产废水治理、资源回收和硝基苯酚的环境分析等领域。
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