一种合成桧烯的基因工程菌及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN109777745A

    公开(公告)日:2019-05-21

    申请号:CN201711130703.6

    申请日:2017-11-15

    Abstract: 一种合成桧烯的基因工程菌及其构建方法与应用,属于基因工程技术领域。本发明解决了游离基因在微生物发酵中不稳定、易丢失、不利于大规模的发酵生产,生产桧烯的原料成本高问题,本发明通过CRISPR-Cas9系统对酿酒酵母基因组进行编辑,将含有Cas9基因的pML104质粒转入酵母,在酵母中表达Cas9蛋白,同时转入含有同源臂的供体DNA,将桧烯合成酶基因SabS1整合到GAL80位点,同时将GAL80基因敲除,而不引入其它标记基因,利用5-FOA筛选质粒丢失的转化子酵母菌株,最终获得合成桧烯的基因工程菌;并用该菌株在含有合适碳源、氮源及其他生长因子的条件下,发酵生产桧烯。本发明可用于大规模发酵生产桧烯。

    植酸提取的方法
    42.
    发明授权

    公开(公告)号:CN107098928B

    公开(公告)日:2019-02-26

    申请号:CN201710469639.8

    申请日:2017-06-20

    Abstract: 植酸提取的方法,它涉及一种植酸提取精制的方法。本发明是为了解决现有提取植酸的方法大量使用酸碱的技术问题,植酸提取的方法按照以下步骤进行:一、原料预处理;二、将预处理原料与水混合,调节pH值,然后预处理,固液分离,合并滤液和清洗液;过0.01微米超滤膜,收集透过液;将透过液进入电渗析器的淡水室,浓水室添加纯水,直到淡水室中植酸与氯离子的浓度比小于0.000286,将所得的溶液减压浓缩,得到浓度为50%‑70%的植酸。该工艺路线短,不需要大量酸碱,是一种绿色环保的新型植酸提取精制工艺。本发明生产液体植酸提高了产品纯度。回收率可达87.2,纯度可达87.8。本发明属于植酸提取的领域。

    一种蛋白分离纯化的方法
    43.
    发明公开

    公开(公告)号:CN109206476A

    公开(公告)日:2019-01-15

    申请号:CN201811383933.8

    申请日:2018-11-20

    Abstract: 一种蛋白分离纯化的方法,属于蛋白纯化技术领域。本发明为了能够大剂量纯化出纯度较高的蛋白,本发明提供了一种蛋白分离纯化的方法,包括如下步骤:制备正电荷分子筛:将不带电荷的分子筛树脂与有机溶剂混合,在变性剂和保护剂的作用下,在140-160℃下反应的时间为24-48h,制备获得复合分子筛树脂,再加入酸性溶液抽滤洗涤至中性,干燥后获得正电荷分子筛;将待纯化的蛋白样品经步骤1)获得的正电荷分子筛过滤,获得的滤液经尺寸排阻色谱层析对蛋白进行纯化,或者将获得的滤液经阴离子交换层析对蛋白进行纯化,获得纯化溶液。本发明使用于工业化生产目的蛋白。

    一种仿生催化断裂芳基含氮化合物中C-N键的方法

    公开(公告)号:CN108484504A

    公开(公告)日:2018-09-04

    申请号:CN201810402124.0

    申请日:2018-04-28

    Abstract: 本发明公开了一种仿生催化断裂芳基含氮化合物中C-N键的方法,使用金属卟啉模拟酶仿生催化芳基含氮化合物中C-N键断裂的反应体系,涉及催化剂的制备和反应体系优化。本发明采用铁卟啉、锰卟啉和钴卟啉作为模拟酶,以H2O2为氧化剂,分别实现了催化不同结构的芳基吡唑衍生物C-N键断裂,氮杂环产物收率最高可达15.2%,为生物酶催化的4倍,且与硝酸铈铵氧化的收率(20%)接近。本发明与传统氧化剂或过渡金属催化体系相比具有简单、温和、经济及绿色的优点。

    一种高反式-1,4-聚异戊二烯的制备方法

    公开(公告)号:CN108440698A

    公开(公告)日:2018-08-24

    申请号:CN201810399932.6

    申请日:2018-04-28

    Abstract: 本发明公开了一种高反式-1,4-聚异戊二烯的制备方法,涉及化学合成领域,技术方案为:在惰性气体氛围下,将主催化剂、溶剂、异戊二烯单体和助催化剂混合进行聚合反应,制备高反式-1,4-聚异戊二烯。本申请的催化剂体系能在较温和的条件下催化异戊二烯的聚合,得到高分子、低分子量分布的异戊橡胶。反应对温度比较敏感,聚合物的微观结构可通过温度的调节进行调控,反式1,4-异戊橡胶的比例可调范围为68-99%,顺式-1,4-异戊橡胶的比例范围为0-23%,3,4-异戊橡胶的比例可调范围为0-7%。

    一种体外酶反应合成间苯三酚的方法及应用

    公开(公告)号:CN105018511B

    公开(公告)日:2018-08-17

    申请号:CN201510458357.9

    申请日:2015-07-30

    Inventor: 咸漠 张汝兵

    Abstract: 本发明公开了一种体外酶反应合成间苯三酚的方法及应用,属于生物工程技术领域。本发明所提供的方法是分别构建含有乙酰辅酶A合成酶ACS基因,乙酰辅酶A羧化酶亚基基因accA,乙酰辅酶A羧化酶亚基基因accB,乙酰辅酶A羧化酶亚基基因accC,乙酰辅酶A羧化酶亚基基因accD及聚酮合成酶基因phlD的重组载体,将重组载体分别转化到宿主菌中后过表达,利用超声波破碎菌体,分离纯化后获得酶液,按比例混合酶液和反应底物后通过体外酶反应合成间苯三酚。本发明实现了通过体外酶反应合成间苯三酚,并可以精确调控各酶及辅助因子的用量。

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