公开(公告)号：CN110592165A

公开(公告)日：2019-12-20

申请号：CN201910996268.8

申请日：2019-10-18

Applicant: 福州大学

Inventor： 魏峥 ,  黄海月 ,  林江慧 ,  梁群焘

IPC: C12P19/26 ,  C12P19/14 ,  G01N30/88

Abstract: 本发明提供燕窝中硫酸乙酰肝素/肝素的提取方法与结构解析，属于天然产物制备纯化领域。该方法先将粉末状燕窝用胰蛋白酶酶解，再通过DEAE阴离子交换色谱柱、透析、冻干等一系列步骤得到燕窝糖胺聚糖。然后样品用肝素酶Ⅰ、肝素酶Ⅱ、肝素酶Ⅲ特异性酶解燕窝糖胺聚糖至硫酸乙酰肝素/肝素二糖，再利用分子排阻色谱法，分离纯化得到硫酸乙酰肝素二糖/肝素二糖。硫酸乙酰肝素二糖/肝素二糖以离子对试剂为流动相，利用LC/MS-ITTOF分析二糖组分的结构并得到摩尔百分比，最后建立硫酸乙酰肝素二糖/肝素区域结构模型。

公开(公告)号：CN104764847B

公开(公告)日：2016-08-17

申请号：CN201510187284.4

申请日：2015-04-21

Applicant: 福州大学

Inventor： 魏峥 ,  林江慧

IPC: G01N30/88 ,  G01N30/06

Abstract: 本发明涉及含N?乙酰化肝素糖库的制备纯化方法，是以肝素酶Ⅰ深度酶解低分子量肝素来富集含N?乙酰化结构寡糖，然后通过Bio?Gel P10凝胶色谱法制备了包括二糖至十四糖的系列肝素寡糖粗样品，再利用强阴离子高效液相色谱等方法对粗样品进一步分离，分别提纯到4种六糖和3种八糖片段。应用肝素酶Ⅰ、肝素酶Ⅱ和肝素酶Ⅲ复合酶解与强阴离子色谱法分析各纯化寡糖的二糖组分，并结合肝素酶Ⅰ底物特异性，初步推断4种六糖和3种八糖的序列结构；最终应用电喷离子阱?时间飞行质谱（ESI?IT?TOF?MS）鉴定结构。本发明解决了含N?乙酰化肝素寡糖难制备及结构测定问题，该问题的解决也将使肝素/硫酸类肝素特殊结构和功能之间关系的研究得以进一步开展。

公开(公告)号：CN104764847A

公开(公告)日：2015-07-08

申请号：CN201510187284.4

申请日：2015-04-21

Applicant: 福州大学

Inventor： 魏峥 ,  林江慧

IPC: G01N30/88 ,  G01N30/06

Abstract: 本发明涉及含N-乙酰化肝素糖库的制备纯化方法，是以肝素酶Ⅰ深度酶解低分子量肝素来富集含N-乙酰化结构寡糖，然后通过Bio-Gel P10凝胶色谱法制备了包括二糖至十四糖的系列肝素寡糖粗样品，再利用强阴离子高效液相色谱等方法对粗样品进一步分离，分别提纯到4种六糖和3种八糖片段。应用肝素酶Ⅰ、肝素酶Ⅱ和肝素酶Ⅲ复合酶解与强阴离子色谱法分析各纯化寡糖的二糖组分，并结合肝素酶Ⅰ底物特异性，初步推断4种六糖和3种八糖的序列结构；最终应用电喷离子阱-时间飞行质谱（ESI-IT-TOF-MS）鉴定结构。本发明解决了含N-乙酰化肝素寡糖难制备及结构测定问题，该问题的解决也将使肝素/硫酸类肝素特殊结构和功能之间关系的研究得以进一步开展。