公开(公告)号：CN104805100B

公开(公告)日：2017-12-01

申请号：CN201510155417.X

申请日：2015-04-03

Applicant: 浙江大学

Inventor： 潘刚 ,  杨茜 ,  黎坤瑜 ,  龚盼 ,  程方民

IPC: C12N15/55 ,  C12N15/84 ,  C12N1/21 ,  A01H5/12

Abstract: 本发明公开了水稻基因OsSμBP‑2在延缓植物叶片衰老中的应用，所述水稻基因OsSμBP‑2的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述的应用，包括：将所述水稻基因OsSμBP‑2连入表达载体中，构建得到重组表达载体；将所述重组表达载体转化受体植物。本发明通过图拉克隆技术从水稻早衰突变体ossμbp‑2中克隆获得基因OsSμBP‑2；并通过功能互补实验证明基因OsSμBP‑2能够延缓植物叶片衰老；该基因OsSμBP‑2可应用于植物育种领域，对耐衰老植物品种的筛选和选育具有重要意义。

公开(公告)号：CN106092682A

公开(公告)日：2016-11-09

申请号：CN201610395026.X

申请日：2016-06-03

Applicant: 浙江大学

Inventor： 赵倩 ,  程方民 ,  刘建超 ,  潘刚

IPC: G01N1/28 ,  G01N21/64

CPC classification number: G01N21/6458 ,  G01N1/2813

Abstract: 本发明公开了一种快速检测水稻花药游离钙离子分布的荧光标记方法，包括：(1)将水稻花药包埋冷冻、切片，将含有水稻花药组织的切片贴于载玻片上；(2)在切片上滴加Fluo‑3AM荧光探针孵育液，在4～37℃培养箱内避光孵育1～120min后，滴加抗荧光猝灭封片液，盖上盖玻片；(3)用荧光显微镜观察装载有Fluo‑3AM荧光探针的切片。该方法快速准确，适用于需要大批量检测和研究工作，并可被推广应用于其他植物组织中游离钙离子分布的检测。

公开(公告)号：CN104805100A

公开(公告)日：2015-07-29

申请号：CN201510155417.X

申请日：2015-04-03

Applicant: 浙江大学

Inventor： 潘刚 ,  杨茜 ,  黎坤瑜 ,  龚盼 ,  程方民

IPC: C12N15/55 ,  C12N15/84 ,  C12N1/21 ,  A01H5/12

Abstract: 本发明公开了水稻基因OsSμBP-2在延缓植物叶片衰老中的应用，所述水稻基因OsSμBP-2的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述的应用，包括：将所述水稻基因OsSμBP-2连入表达载体中，构建得到重组表达载体；将所述重组表达载体转化受体植物。本发明通过图拉克隆技术从水稻早衰突变体ossμbp-2中克隆获得基因OsSμBP-2；并通过功能互补实验证明基因OsSμBP-2能够延缓植物叶片衰老；该基因OsSμBP-2可应用于植物育种领域，对耐衰老植物品种的筛选和选育具有重要意义。

公开(公告)号：CN104745600A

公开(公告)日：2015-07-01

申请号：CN201510156258.5

申请日：2015-04-03

Applicant: 浙江大学

Inventor： 潘刚 ,  龚盼 ,  黎坤瑜 ,  杨茜 ,  程方民

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/82 ,  C12N1/21 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明公开了水稻基因OsVHAl在延缓植物叶片衰老和提高植物耐盐性中的应用，所述水稻基因OsVHAl的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述的应用，包括：将所述水稻基因OsVHAl连入表达载体中，构建得到重组表达载体；将所述重组表达载体转化受体植物。本发明通过图拉克隆技术从水稻早衰突变体osvhal中克隆获得基因OsVHAl；并通过功能互补实验证明基因OsVHAl能够延缓植物叶片衰老，通过盐处理实验证明基因OsVHAl能够提高植物的耐盐能力；该基因OsVHAl可应用于植物育种领域，对耐衰老、耐盐植物品种的筛选和选育具有重要意义。

公开(公告)号：CN103409417B

公开(公告)日：2015-05-06

申请号：CN201310352510.0

申请日：2013-08-14

Applicant: 浙江大学

Inventor： 潘刚 ,  赵晨晨 ,  毛节景 ,  程方民

IPC: C12N15/11 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种稻瘟病抗性基因Pi-d2的功能型分子标记及其专用引物序列与应用，功能型分子标记包括Pi-d2A和Pi-d2B，Pi-d2A为由引物对SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2从水稻基因组DNA中扩增出的核苷酸序列，经特异限制性内切酶MluI酶切之后，与稻瘟病抗性基因Pi-d2呈特异性带型；Pi-d2B为由引物对SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4的引物对从水稻基因组DNA中扩增出的核苷酸序列，经特异限制性内切酶PvuI酶切之后，与稻瘟病抗性基因Pi-d2呈特异性带型。利用上述引物对从水稻中扩增出Pi-d2A和Pi-d2B，并用对应的特异限制性内切酶酶切，两段核苷酸序列中至少一段被成功酶切，则水稻中含有稻瘟病抗性基因Pi-d2。本发明能直接鉴定种质资源和育种后代中的抗性基因Pi-d2，极大地缩短了育种进程，提高了育种效率。

公开(公告)号：CN103409417A

公开(公告)日：2013-11-27

申请号：CN201310352510.0

申请日：2013-08-14

Applicant: 浙江大学

Inventor： 潘刚 ,  赵晨晨 ,  毛节景 ,  程方民

IPC: C12N15/11 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种稻瘟病抗性基因Pi-d2的功能型分子标记及其专用引物序列与应用，功能型分子标记包括Pi-d2A和Pi-d2B，Pi-d2A为由引物对SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2从水稻基因组DNA中扩增出的核苷酸序列，经特异限制性内切酶MluI酶切之后，与稻瘟病抗性基因Pi-d2呈特异性带型；Pi-d2B为由引物对SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4的引物对从水稻基因组DNA中扩增出的核苷酸序列，经特异限制性内切酶PvuI酶切之后，与稻瘟病抗性基因Pi-d2呈特异性带型。利用上述引物对从水稻中扩增出Pi-d2A和Pi-d2B，并用对应的特异限制性内切酶酶切，两段核苷酸序列中至少一段被成功酶切，则水稻中含有稻瘟病抗性基因Pi-d2。本发明能直接鉴定种质资源和育种后代中的抗性基因Pi-d2，极大地缩短了育种进程，提高了育种效率。