菜蛾盘绒茧蜂抗菌肽防御素基因、抗菌多肽及应用

    公开(公告)号:CN102816770A

    公开(公告)日:2012-12-12

    申请号:CN201210315023.2

    申请日:2012-08-30

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,旨在提供一种菜蛾盘绒茧蜂抗菌肽防御素基因、抗菌多肽及应用。该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,该基因编码的抗菌多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示;将该抗菌多肽去除信号肽前体后还得到的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的抗菌多肽。本发明还提供了抗菌多肽合成方法及在制备用于治疗革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌感染的食品添加剂或药物中的应用。本发明所提供的菜蛾盘绒茧蜂抗菌肽防御素(Cv-def)基因及其编码的核苷酸序列,使其能够应用在菜蛾盘绒茧蜂中表达的新的抗菌蛋白、编码序列及其在开发成有应用价值的食品添加剂和药物并应用于农业、工业和食品卫生等多个领域。

    加强果蝇类生物防治效果的蛹寄生蜂人工繁育生产方法

    公开(公告)号:CN107439491B

    公开(公告)日:2019-09-10

    申请号:CN201710749534.8

    申请日:2017-08-28

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明涉及农业害虫生物防治领域,旨在提供一种加强果蝇类生物防治效果的蛹寄生蜂人工繁育生产方法。该方法包括:收集被毛角锤角细蜂寄生的黑腹果蝇蛹,羽化出蜂后连续三代用于海德氏果蝇蛹的寄生,收集蜂种;对海德氏果蝇接种繁殖,然后以寄生蜂的雌蜂对海德氏果蝇化蛹进行寄生、培养,收集羽化后的寄生蜂并保存留种。本发明在生产接种过程中控制了毛角锤角细蜂的寄生时间,避免了因寄生时间过短导致的低寄生率或因过度寄生而造成的低出蜂率;对毛角锤角细蜂的培育更便利于寄生蜂的合理接种及利用;能够进行大规模连续生产,完善优势寄主选择和繁蜂技术,实现优质、高效、大批量繁殖毛角锤角细蜂,为毛角锤角细蜂的繁殖利用奠定了良好基础。

    菜蛾盘绒茧蜂丝氨酸蛋白酶抑制剂CvT-SERPIN基因及其编码蛋白

    公开(公告)号:CN105821050B

    公开(公告)日:2019-04-09

    申请号:CN201610290698.4

    申请日:2016-05-05

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域,旨在提供一种菜蛾盘绒茧蜂丝氨酸蛋白酶抑制剂CvT‑SERPIN基因及其编码蛋白。该菜蛾盘绒茧蜂丝氨酸蛋白酶抑制剂CvT‑SERPIN基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。该基因编码的蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。所述蛋白去除信号肽前体后得到的重组蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明通过基于高通量转录组测序方法,得到CvT‑SERPIN的cDNA核苷酸序列后,利用大肠杆菌表达系统进行诱导表达蛋白,利用His‑tag能够在较短的时间内获得大量的可溶性CvT‑SERPIN重组蛋白,为进行CvT‑SERPIN的活性实验提供了便利。

    菜蛾盘绒茧蜂畸形细胞丝氨酸蛋白酶抑制剂CvT-SPI基因及应用

    公开(公告)号:CN107523572A

    公开(公告)日:2017-12-29

    申请号:CN201710818904.9

    申请日:2017-09-12

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明涉及分子生物学、基因工程以及蛋白工程领域,旨在提供一种菜蛾盘绒茧蜂畸形细胞丝氨酸蛋白酶抑制剂CvT-SPI基因及应用。该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,由该基因编码的蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。由该基因体外原核表达获得的重组蛋白能够有效抑制其寄主小菜蛾血淋巴酚氧化酶原的激活,从而抑制寄主血淋巴的黑化作用,减弱寄主的免疫反应,为获得新型转基因抗虫作物提供了序列参考。该重组蛋白能够抑制枯草杆菌蛋白酶A,胰蛋白酶和猪胰腺弹性蛋白酶的活性,对于开发丝氨酸蛋白酶抑制剂类药物具有重要的意义。本发明能够在较短的时间内获得大量的可溶性CvT-SPI重组蛋白,为进行CvT-SPI的活性实验提供了便利。

    CvBV29-1基因在降低果蝇免疫力和制备免疫低下型果蝇模型中的应用

    公开(公告)号:CN107287217A

    公开(公告)日:2017-10-24

    申请号:CN201710520498.8

    申请日:2017-06-30

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了CvBV29-1基因在降低果蝇免疫力和制备免疫低下型果蝇模型中的应用,该CvBV29-1基因是菜蛾盘绒茧蜂多分DNA病毒的35个基因组片段中的第29个环上的第1个基因,其碱基序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用转基因技术,将菜蛾盘绒茧蜂多分DNA病毒基因CvBV29-1转入果蝇基因组,获得了稳定遗传、纯合体的转基因果蝇品系;该转基因品系表达多分DNA病毒基因CvBV29-1后,存在血细胞凋亡的现象,并且在受到病原物侵染时,具有明显的免疫力低的性状,在对研究昆虫免疫相关机制、增强人类免疫类药剂的筛选等方面有重要意义。

    一种小菜蛾胚胎细胞系的培养方法及其应用

    公开(公告)号:CN106222128A

    公开(公告)日:2016-12-14

    申请号:CN201610679203.7

    申请日:2016-08-16

    Applicant: 浙江大学

    CPC classification number: C12N5/0601 C12N2509/00 G01N33/5014 G01N2333/43552

    Abstract: 本发明公开了一种小菜蛾胚胎细胞系的培养方法及其应用,该培养方法包括以下步骤:取小菜蛾胚胎期的蛾卵,消毒处理后,破碎,过筛,获得小菜蛾的胚胎细胞;将所述胚胎细胞置于细胞培养基中,进行原代培养和传代培养,获得所述小菜蛾胚胎细胞系。本发明采用小菜蛾胚胎期的蛾卵进行原代培养和传代培养,获得的小菜蛾胚胎细胞系,能够应用于判断不同药剂对小菜蛾毒性的高低,实现药剂的筛选,简化了现有药剂筛选的步骤,降低了药剂筛选的假阳性率。

    颈双缘姬蜂人工繁殖生产方法

    公开(公告)号:CN104304183A

    公开(公告)日:2015-01-28

    申请号:CN201410427556.9

    申请日:2014-08-27

    Applicant: 浙江大学

    CPC classification number: A01K67/033

    Abstract: 本发明涉及农业害虫生物防治领域,旨在提供颈双缘姬蜂人工繁殖生产方法。该颈双缘姬蜂人工繁殖生产方法包括步骤:采集和繁殖蜂种、生产寄主、小菜蛾的接种繁殖、小菜蛾蛹的发育、颈双缘姬蜂接种、颈双缘姬蜂培养与收集和留种。本发明完善了优势蜂种选择、繁蜂和放蜂技术,实现优质、高效、大批量繁殖颈双缘姬蜂;另外,本发明生产方法能够进行大规模连续生产,应用于农业害虫防治领域,用于防治小菜蛾害虫,从而更大程度上满足农业生产需要,为十字花科蔬菜害虫的生物防治提供了很大便利。

    烟粉虱抗真菌肽defensin基因及其所编码的抗菌肽与制备

    公开(公告)号:CN102586262B

    公开(公告)日:2014-04-16

    申请号:CN201210073276.3

    申请日:2012-03-19

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明涉及抗菌肽及应用,旨在提供烟粉虱抗真菌肽defensin基因及其所编码的抗菌肽与制备。该抗菌肽基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,该抗菌肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明在表达载体中引入蛋白酶Xa因子,能够有效的酶切重组融合蛋白,并根据蛋白分子大小利用超滤方式快速分离得到defensin多肽。整个过程快速简单。所得抗菌肽具有抗真菌活性,能明显抑制球孢白僵菌、金龟子绿僵菌和灰霉菌等昆虫病原真菌生长。

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