公开(公告)号：CN102140545A

公开(公告)日：2011-08-03

申请号：CN201110063287.9

申请日：2011-03-16

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 李彬 ,  何孔旺 ,  毛立 ,  温立斌 ,  张雪寒 ,  倪艳秀

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明涉及一种用于检测猪博卡病毒核苷酸片段的引物和探针序列，属于动物病原微生物检测技术领域。引物对包括：由序列为TCGAGCTATACAACCGAAGAAGAGA的上游引物pNPF和序列为TGTTTCGGAGATGTCCTTGCT的下游引物pNPR组成的引物对。探针pNPP序列为CAGCTCTTCGAATCGCCGCTCTCC。该套引物和探针序列根据GenBank上猪博卡病毒全基因组序列（HQ223038）设计，具有较高的灵敏度和特异性。

公开(公告)号：CN101289658A

公开(公告)日：2008-10-22

申请号：CN200810024644.9

申请日：2008-03-28

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 何孔旺 ,  潘群兴 ,  温立斌 ,  张雪寒 ,  倪艳秀 ,  俞正玉 ,  郭容利 ,  吕立新 ,  茅爱华 ,  肖琦 ,  黄克和

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/34 ,  C12N15/861 ,  A61K39/12 ,  A61P31/12

Abstract: 本发明涉及表达2型猪圆环病毒核衣壳蛋白Cap基因的重组病毒样粒子的构建及应用，属于基因工程疫苗领域。将猪细小病毒(PPV)VP2基因的C端基因片段克隆于人5型腺病毒穿梭载体，获得重组腺病毒rAd－ΔVP2，ΔVP2蛋白成功的高效表达，并能自我装配成病毒样粒子[PPV:VLPs]。以PPV VP2病毒样粒子作为抗原转运载体，将2型猪圆环病毒(PCV2)核衣壳蛋白(Cap)的165－200位氨基酸(ΔCap)基因嵌合在PPV VP2的N端(ΔVP2)，获得重组腺病毒rAd－ΔCap－ΔVP2。嵌合的VP2(ΔCap－ΔVP2)蛋白成功的高效表达，并能自我装配成病毒样粒子[PPV:VLP(PCV2)]。本发明还涉及该重组病毒及其表达Cap基因的重组PPV VP2病毒样粒子在疫苗免疫等方面的应用。

公开(公告)号：CN101173243A

公开(公告)日：2008-05-07

申请号：CN200710134465.6

申请日：2007-10-23

Applicant: 江苏省农业科学院 ,  南京天邦生物科技有限公司

Inventor： 张雪寒 ,  何孔旺 ,  刘亚彬 ,  周俊明 ,  俞正玉 ,  倪艳秀 ,  郭容利 ,  吕立新 ,  周萍 ,  沈江萍

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/09 ,  C12R1/46

Abstract: 本发明涉及次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)猪链球菌2型(S52)缺失株，属于生物技术领域。包括设计引物，获取impdh基因上下游序列(IN和IC)和氯霉素(cat)基因完整表达盒，基因经串联并克隆入simple pMD18－T载体，串联片段经测序后再经酶切后克隆入温敏质粒pSET4s载体，构建重组基因敲除质粒pSET4s－IN－cat－IC，转化入SS2。IMPDHm培养特性、生化特性和致病性较亲本菌株SS2有明显的不同。本发明构建了IMPDH缺失菌株(IMPDHm)，可用于研制SS2的基因缺失灭活疫苗，为更加安全而有效的防控猪链球菌病提供技术方法。

公开(公告)号：CN1292254C

公开(公告)日：2006-12-27

申请号：CN200510038211.5

申请日：2005-01-24

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 何孔旺 ,  彭小华 ,  王芳 ,  邱索平 ,  张雪寒 ,  倪艳秀 ,  郭容利 ,  俞正玉 ,  陆承平

IPC: G01N33/569 ,  C12N15/31 ,  C12Q1/04 ,  G01N33/543 ,  G01N33/535 ,  C07K14/36

Abstract: 一种检测胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropeumoniae，App)野毒感染的试剂盒，其组成成分如下：细菌毒素ApxIV纯化表达蛋白包被好的酶标板、辣根过氧化物酶标记的羊抗猪IgG抗体、柠檬酸、碳酸氢二钠、EDTA缓冲系统加TMB构成的显色系统、阳性血清、阴性血清和试剂盒说明书。其特征是利用聚合酶链反应(PCR)从App血清1型的ApxIV基因中扩增出目的基因，构建了含目的基因的表达质粒pET32a-ApxIV，该质粒转化入宿主菌BL21(DE3)，体外表达蛋白经镍柱纯化后作为抗原，建立酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法并优化反应条件形成了检测试剂盒，该试剂盒在App的诊断、流行病学调查和免疫监测等方面具有重要应用价值。

公开(公告)号：CN117838678A

公开(公告)日：2024-04-09

申请号：CN202410030727.8

申请日：2024-01-09

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 李彬 ,  陶然 ,  程曦 ,  张雪寒 ,  周金柱 ,  朱雪蛟 ,  郭容利 ,  汪伟

IPC: A61K31/164 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明涉及医药领域，特别是涉及神经酰胺类化合物在抑制轮状病毒感染中的应用。本发明提供了神经酰胺在制备抗轮状病毒药物中的应用。本发明首次发现神经酰胺在病毒复制阶段发挥抗病毒作用，实现对轮状病毒的抗病毒作用。并且在具体实施例中通过筛选发现，长链神经酰胺有效抑制浓度在10‑15μM之间，短链神经酰胺有效抑制浓度在20‑40μM之间，且短链神经酰胺对多种轮状病毒的增殖均有明显抑制效果。由此可见，本发明所述神经酰胺同样具有广谱性。

公开(公告)号：CN116466079A

公开(公告)日：2023-07-21

申请号：CN202310177016.9

申请日：2023-02-28

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 李彬 ,  范宝超 ,  宋旭 ,  周俊明 ,  王丹丹 ,  钱嘉莉 ,  赵永祥 ,  朱雪蛟 ,  李运川 ,  郭容利 ,  张雪寒 ,  何孔旺

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种检测猪流行性腹泻病毒抗体SIgA的ELISA方法，属于生物技术领域。该方法包括以S1蛋白作为包被抗原，检测待测样品中猪流行腹泻病毒抗体SIgA抗体的步骤，其中，所述S1蛋白的氨基酸序列为第19‑719位的截断序列。本发明通过优化条件初步建立了检测血清、肠道组织和乳汁中猪流行性腹泻病毒特异性SIgA抗体的间接ELISA方法，并确定最佳抗原包被浓度和包被时间分别为0.25μg/ml和4℃过夜12h‑16h，以及其他的最佳检测条件。本研究建立的检测血清、肠道组织和乳汁中PEDV特异性SIgA的方法简便快速，具有较好的敏感性、特异性，这为评价PEDV黏膜免疫水平提供了依据和检测标准。

公开(公告)号：CN114525294B

公开(公告)日：2023-02-17

申请号：CN202210191044.1

申请日：2022-02-24

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 范宝超 ,  李彬 ,  宋诗颖 ,  张雪寒 ,  朱雪蛟 ,  周金柱 ,  赵永祥 ,  李基棕 ,  郭容利 ,  郭玮璐 ,  张雪

IPC: C12N15/70 ,  C07K14/555 ,  A61K38/21 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开了制备猪源干扰素δ5的方法和猪源干扰素δ5的应用。制备猪源干扰素δ5的方法包括：步骤S1，利用预处理后的猪小肠上皮细胞IPEC‑J2总RNA通过RT‑PCR扩增获取包含猪源干扰素δ5基因的DNA片段；步骤S2，将所述包含猪源干扰素δ5基因的DNA片段插入到外源表达载体中，构建得到用于表达猪源干扰素δ5基因的重组表达载体；步骤S3，将所述重组表达载体引入到合适的宿主细胞中，并在所述宿主细胞中驱动表达所述猪源干扰素δ5基因以获得所述猪源干扰素δ5。利用本发明的方法能够容易地获得大量高纯度的重组猪源干扰素δ5蛋白，该重组猪源干扰素δ5蛋白能够制备用于抑制PEDV、TGEV、PDCoV和PRoV感染的药物或制剂。

公开(公告)号：CN108685980A

公开(公告)日：2018-10-23

申请号：CN201810673676.5

申请日：2018-06-26

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 胡屹屹 ,  卢宇 ,  何孔旺 ,  温立斌 ,  祝昊丹 ,  张碧成 ,  张雪寒

IPC: A61K36/537 ,  A61K9/14 ,  A61K9/08 ,  A61P37/04 ,  A61P31/20 ,  A61P31/14 ,  A23K50/30 ,  A23K10/30

CPC classification number: A61K36/254 ,  A23K10/30 ,  A23K50/30 ,  A61K9/0019 ,  A61K9/08 ,  A61K9/14 ,  A61K36/26 ,  A61K36/30 ,  A61K36/424 ,  A61K36/47 ,  A61K36/537 ,  A61K2236/331 ,  A61K2236/39 ,  A61K2236/51 ,  A61P31/14 ,  A61P31/20 ,  A61P37/04 ,  A61K2300/00

Abstract: 本发明公开了一种改善猪免疫抑制状态的中草药复方制剂及其制备方法和应用，属于兽药领域。本发明的中草药复方制剂为散剂或液体制剂，由刺五加、绞股蓝、叶下珠、荔枝草、紫草、马蹄香六种药材直接混合制得或将上述药材加水煎煮，去渣取液浓缩后制得；所述刺五加、绞股蓝、叶下珠、荔枝草、紫草和马蹄香的质量比为2：2：2：1：1：1。本发明的中草药复方制剂可作为饲料添加剂或注射剂应用于畜禽养殖中，有效提升动物特异性的抗体效价，降低病毒载量，增强免疫细胞和免疫介质的数量与活性，促进免疫器官的生长发育，全面增强动物免疫功能和防御疾病的能力，克服了疫苗、化药、抗生素的毒副作用与食品安全隐患，研发前景乐观，临床应用广阔。

公开(公告)号：CN106943393A

公开(公告)日：2017-07-14

申请号：CN201710303750.X

申请日：2017-05-03

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 胡屹屹 ,  卢宇 ,  茅爱华 ,  何孔旺 ,  温立斌 ,  张雪寒 ,  张碧成

IPC: A61K31/36 ,  A61K31/357 ,  A61K31/352 ,  A61P29/00 ,  A61P7/06 ,  A61P7/00 ,  A61P1/16 ,  A61P13/12 ,  A61P37/04 ,  A61P39/00

CPC classification number: A61K31/357 ,  A61K31/352 ,  A61K31/36 ,  A61K2300/00

Abstract: 本发明涉及一种防治猪细菌内毒素病的中药方剂，其特征在于：包括如下重量份数的原料：水飞蓟宾0.5～1.5份、秦皮素0.5～1.5份、葛根素0.5～1.5份、五味子乙素0.5～1.5份。上述技术方案中提供的防治猪细菌内毒素病的中药方剂，能显著抑制动物体温升高，提高动物的生产性能和经济价值；降低血清中LPS和炎症因子的高水平，具有明显的抗炎与组织修复作用；还能提升白蛋白和球蛋白数目，降低尿素水平，起到保护肝肾功能，促进营养吸收和增强免疫功能的作用。

公开(公告)号：CN106754592A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201611050768.5

申请日：2016-11-25

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 何孔旺 ,  王勇 ,  祝昊丹 ,  倪艳秀 ,  周俊明 ,  张雪寒 ,  俞正玉 ,  肖琦 ,  张碧成

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/74 ,  A61K39/09 ,  A61P31/04 ,  C12R1/46

Abstract: 本发明提供猪链球菌2型Rex基因敲除突变株及其构建方法和应用，属于基因工程领域。突变株SS2‑1ΔRex，是将SS2‑1株基因组中Rex编码基因敲除后获得的。突变株SS2‑1ΔRex的构建方法：构建含有同源重组片段的基因敲除质粒 pSET4s::Rex，将 pSET4s::Rex电转化入SS2‑1株内，同源重组，采用抗性筛选；所述同源重组片段的两侧为SS2‑1株基因组中Rex编码基因上、下游片段，中间为抗性基因片段。突变株SS2‑1ΔRex，毒力较亲本株显著降低，构建方法简单、高效，突变株SS2‑1ΔRex的活疫苗，仅需接种两次，就能够有效控制SS2的感染，没有明显的毒副反应。