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公开(公告)号：CN109136207B
公开(公告)日：2020-12-04
申请号：CN201810843255.2
申请日：2018-07-27
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了一种重组大肠杆菌生产磷脂酶D的方法，将磷脂酶D基因置于严谨型启动子控制下，在表达质粒中插入pSC101的par区域，同时使用大肠杆菌recA突变株保持质粒的遗传稳定，生长期富集含质粒的细胞培养至高密度，诱导期饱和诱导，同时降低温度和施加碱金属盐胁迫，缓解PLD对宿主的细胞毒性，抑制细胞裂解，延长PLD的合成时间，从而提高PLD的表达。
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公开(公告)号：CN109136207A
公开(公告)日：2019-01-04
申请号：CN201810843255.2
申请日：2018-07-27
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了一种重组大肠杆菌生产磷脂酶D的方法，将磷脂酶D基因置于严谨型启动子控制下，在表达质粒中插入pSC101的par区域，同时使用大肠杆菌recA突变株保持质粒的遗传稳定，生长期富集含质粒的细胞培养至高密度，诱导期饱和诱导，同时降低温度和施加碱金属盐胁迫，缓解PLD对宿主的细胞毒性，抑制细胞裂解，延长PLD的合成时间，从而提高PLD的表达。
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公开(公告)号：CN103204951B
公开(公告)日：2015-08-05
申请号：CN201310167325.4
申请日：2013-05-08
Applicant: 厦门大学
IPC: C08B37/00
Abstract: 裂殖壶藻胞外多糖的分离纯化方法，涉及胞外多糖。包括以下步骤：1）以裂殖壶菌发酵液为原料，用乙醇沉淀发酵液中多糖，有机溶剂清洗不溶物，再用去离子水溶解不溶物，三氯乙酸法去除蛋白，再次使用乙醇沉淀得多糖粗品，使用去离子水为溶媒，配制成待分级溶液；2）将步骤1）配制成的待分级溶液经快流速纤维素琼脂糖凝胶阴离子交换树脂梯度洗脱分管收集，硫酸苯酚法测定各管多糖浓度，绘制洗脱曲线，将收集的各个部分合并，浓缩，经透析膜出去小分子杂质，冻干后即得分离纯化的裂殖壶藻胞外多糖。操作简便﹑高效，适用于大规模工业生产，获得多糖性质专一，生理活性高。
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公开(公告)号：CN101608209B
公开(公告)日：2011-08-31
申请号：CN200910112190.5
申请日：2009-07-14
Applicant: 厦门大学
Abstract: 核糖体抗性诱变选育万古霉素生产菌株及其应用，涉及一种微生物的选育。提供东方拟无枝酸菌的诱变菌株的诱变选育方法及其在制备万古霉素中的应用。将东方拟无枝酸菌接种至高氏1号琼脂培养基平板中培养；取出孢子用无菌水制成孢子悬液涂于万古霉素及链霉素混合抗性的高氏1号琼脂培养基平板中培养；随机选取生长出来的单菌落划线接种于高氏1号琼脂平板培养基上培养，对长出的诱变菌株进行生物活性测定；选取抑菌圈直径大于出发菌株2mm的诱变菌株接种于液体发酵培养基中培养，通过HPLC法测定发酵液中万古霉素的含量，验证所获的万古霉素诱变菌株；将获得的万古霉素诱变菌株经5次连续传代稳定性考察，获得万古霉素生产菌株。
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公开(公告)号：CN101550194B
公开(公告)日：2011-08-10
申请号：CN200910111757.7
申请日：2009-05-12
Applicant: 厦门大学
IPC: C08B5/14
Abstract: 纤维素硫酸钠的制备方法，涉及一种微胶囊的制备方法。提供一种成本低、工艺流程简便的纤维素硫酸钠的制备方法。将硫酸和无水乙醇分别冷冻至-18～-22℃；将硫酸倒入无水乙醇中，搅拌得反应液；待温度回升至-6～6℃，将纤维素投入反应液中，混匀后静置反应；分离纤维素与反应液，除去纤维素上吸附的反应液，洗涤；将洗涤过的纤维素用去离子水溶解，再用NaOH调pH至1.5～3.0，搅拌；离心或抽滤除去未溶解的纤维素，保留上清，用NaOH调pH至9～10；在上清中加入乙醇，沉淀出纤维素硫酸钠，收集沉淀，烘干，得到纤维素硫酸钠。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101608209A
公开(公告)日：2009-12-23
申请号：CN200910112190.5
申请日：2009-07-14
Applicant: 厦门大学
Abstract: 核糖体抗性诱变选育万古霉素生产菌株及其应用，涉及一种微生物的选育。提供东方拟无枝酸菌的诱变菌株的诱变选育方法及其在制备万古霉素中的应用。将东方拟无枝酸菌接种至高氏1号琼脂培养基平板中培养；取出孢子用无菌水制成孢子悬液涂于万古霉素及链霉素混合抗性的高氏1号琼脂培养基平板中培养；随机选取生长出来的单菌落划线接种于高氏1号琼脂平板培养基上培养，对长出的诱变菌株进行生物活性测定；选取抑菌圈直径大于出发菌株2mm的诱变菌株接种于液体发酵培养基中培养，通过HPLC法测定发酵液中万古霉素的含量，验证所获的万古霉素诱变菌株；将获得的万古霉素诱变菌株经5次连续传代稳定性考察，获得万古霉素生产菌株。
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公开(公告)号：CN118599754A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410762778.X
申请日：2024-06-13
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N1/36 , C12N1/14 , C12P7/6432 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种驯化裂殖壶菌的方法及其应用，包括：将野生型裂殖壶菌Schizochytrium sp.SR21于甘油浓度为150g/L的驯化培养基中驯化35代，得到驯化菌株Schizochytrium sp.HG1；将驯化菌株Schizochytrium sp.HG1于甘油浓度为175g/L的驯化培养基中驯化20代，得到驯化菌株Schizochytrium sp.HG2。该方法能够驯化得到以甘油为底物生产EPA的驯化菌株，菌株能够高效利用甘油生产EPA，实现EPA的高值化利用。
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公开(公告)号：CN116970506A
公开(公告)日：2023-10-31
申请号：CN202210428361.0
申请日：2022-04-22
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了一种阶段调控pH培养阿克曼氏菌的方法，可改善阿克曼氏菌生长情况且提高细胞疏水性。本发明分为血清瓶摇瓶培养以及发酵罐培养两部分。所述血清瓶摇瓶培养采用控制初始pH，所述发酵罐培养采用添加碳酸钠和氢氧化钠，并且在生长延滞期、指数期及稳定期分别控制不同的pH环境，可提高菌体生长速度，避免生长后期生物量的快速下降，且可以提高其细胞疏水性，有利于阿克曼氏菌在肠道中的定植，为阿克曼氏菌的培养和应用奠定基础。
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公开(公告)号：CN113265340A
公开(公告)日：2021-08-17
申请号：CN202110546695.3
申请日：2021-05-19
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了产角鲨烯的裂殖壶菌基因工程菌株及其构建方法和应用。本发明采用裂殖壶菌Schizochytrium limacinum SR21为野生型菌株，在大肠杆菌中构建以延长酶基因(elogase，elo1)两端序列为同源臂、博来霉素为筛选标记的elo1基因敲除载体pBlue‑ZEO‑elo1和以18sRNA为同源臂、潮霉素为筛选标记的磷脂酸磷酸酶基因(phosphatidic acid phosphatase，pap)干扰载体pBlue‑HYG‑siRNA‑18s，将两个载体同源重组结构域线性化后电转进入裂殖壶菌内，得到一株elo1基因敲除结合pap基因干扰的高产角鲨烯的裂殖壶菌基因工程菌株，命名为MIX菌株。本发明通过调控相关基因的表达水平改变了碳代谢流向，抑制了裂殖壶菌油脂合成的能力，为角鲨烯合成提供了更多的碳通量。本发明为裂殖壶菌实现多基因改造提供了理论依据，同时为裂殖壶菌生产角鲨烯奠定了实验基础。
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