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公开(公告)号：CN115128268A
公开(公告)日：2022-09-30
申请号：CN202210404918.7
申请日：2022-04-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/68 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种马流产沙门氏菌病4种致病病原菌通用型间接ELISA抗体检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有截短表达的沙门氏菌外膜重组蛋白OmpA包被的酶标板，所述的截短表达的沙门氏菌外膜重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明利用Pull down技术成功筛选到了马流产沙门氏菌病4种病原的共同优势抗原，并将其克隆到表达载体通过截短分段表达实现了对该OmpA蛋白的可溶性表达，同时建立了马流产沙门氏菌病4种致病病原菌通用型间接ELISA抗体检测试剂盒以及相应的iELISA抗体诊断方法，实验证明，使用该试剂盒建立的方法具有特异性强、敏感性高的优点，将成为马流产沙门菌病抗体检测的一种有效工具，也为未来疫苗研发的抗体监测奠定了方法学基础。
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公开(公告)号：CN112501273B
公开(公告)日：2021-06-29
申请号：CN202011488629.7
申请日：2020-12-16
Applicant: 暨南大学 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/6876 , C12Q1/6848 , C12N15/11 , C12N15/85 , C07K16/10
Abstract: 本发明涉及基因工程及抗体制备领域，具体而言，涉及一种用于扩增马抗体的巢式PCR引物、试剂盒及其应用。该巢式PCR引物可匹配的抗体重链及轻链基因的阳性率为56％左右，进而能够从单个B淋巴细胞分离抗体基因的方法，并制备高通量马源抗体。该方法保留了轻链重链可变区的天然配对，具有基因多样性好、效价高、抗体亲和力好、特异性强、实验周期短等优势，为研制传染性疾病及自身免疫性疾病的单克隆抗体的预防与治疗性药物或诊断性抗体提供了一条广阔的途径，同时也为生命科学基础研究获得外源性蛋白的抗体提供了一个更加高效、简单、快速的方法。
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公开(公告)号：CN112501273A
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN202011488629.7
申请日：2020-12-16
Applicant: 暨南大学 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/6876 , C12Q1/6848 , C12N15/11 , C12N15/85 , C07K16/10
Abstract: 本发明涉及基因工程及抗体制备领域，具体而言，涉及一种用于扩增马抗体的巢式PCR引物、试剂盒及其应用。该巢式PCR引物可匹配的抗体重链及轻链基因的阳性率为56％左右，进而能够从单个B淋巴细胞分离抗体基因的方法，并制备高通量马源抗体。该方法保留了轻链重链可变区的天然配对，具有基因多样性好、效价高、抗体亲和力好、特异性强、实验周期短等优势，为研制传染性疾病及自身免疫性疾病的单克隆抗体的预防与治疗性药物或诊断性抗体提供了一条广阔的途径，同时也为生命科学基础研究获得外源性蛋白的抗体提供了一个更加高效、简单、快速的方法。
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公开(公告)号：CN111088379A
公开(公告)日：2020-05-01
申请号：CN202010046938.2
申请日：2020-01-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种用于检测马流产沙门氏菌的特异性引物组及其用途。所述的引物组由上游引物以及下游引物组成，其中所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。特异性实验结果表明该引物组只与马流产沙门氏菌反应，而与其他马、驴常见传染病病原均无交叉反应，具有良好的特异性。灵敏度实验表明，该引物组检测马流产沙门氏菌的最低限度为4.7×103CFU/ml，具有良好的敏感性。本发明的提出为马流产沙门氏菌的检测或诊断提供了一种有效技术手段，通过本发明的方法，使马流产沙门氏菌的检出率极大提高，诊断更精确，对于马流产沙门氏菌病的防控具有重要意义。
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