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公开(公告)号:CN109355434B
公开(公告)日:2022-04-15
申请号:CN201811418448.X
申请日:2018-11-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种定量检测鸡马立克氏病毒Meq基因缺失疫苗株和野毒株的荧光定量PCR试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有两套分别用于检测鸡马立克氏病毒Meq基因缺失疫苗株和野毒株的荧光定量PCR引物和探针,其中用于检测鸡马立克氏病毒Meq基因缺失疫苗株的荧光定量PCR引物序列如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示,探针序列如SEQ ID NO.3所示;用于检测鸡马立克氏病毒野毒株的荧光定量PCR引物序列如SEQ ID NO.4以及SEQ ID NO.5所示,探针序列如SEQ ID NO.6所示。经过体外实验证明本发明的试剂盒敏感性高,特异型好,重复性好,能分别准确定量鸡马立克氏病毒Meq基因缺失疫苗株和MDV野毒株,对于鸡马立克氏病的诊断、疫苗的免疫监控等具有重要意义。
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公开(公告)号:CN114196639A
公开(公告)日:2022-03-18
申请号:CN202111370551.3
申请日:2021-11-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N15/62 , C12N15/85 , A61K39/295 , A61K39/245 , A61K39/125 , A61P31/14 , A61P31/22
Abstract: 本发明公开了一种共同表达3型鸭甲型肝炎病毒P1和3C基因的重组鸭瘟病毒及其构建方法和用途,属于医学或兽医学技术领域。具体地,本发明利用重组克隆技术,将包含β‑actin启动子以及3型鸭甲型肝炎病毒P1和3C基因的基因片段β‑actin‑P13C插入到鸭瘟病毒US7和US8基因之间的间隔区中,构建获得在US7和US8基因之间插入β‑actin‑P13C表达框架的重组粘粒,由其拯救获得共同表达3型鸭甲型肝炎病毒P1和3C基因的重组鸭瘟病毒疫苗株rDEV‑US78‑P13C。结果显示,重组病毒疫苗株rDEV‑US78‑P13C免疫雏鸭后7天,就可以诱导对3型鸭甲型肝炎病毒强毒致死性攻击的完全保护,同时对鸭瘟病毒攻毒也显示了良好的免疫保护效果,是一株良好的预防鸭病毒性肝炎和鸭瘟的二联疫苗。
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公开(公告)号:CN110244039B
公开(公告)日:2021-12-24
申请号:CN201910367890.2
申请日:2019-05-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/535 , G01N33/569 , G01N33/536
Abstract: 本发明公开了一种检测J亚群禽白血病病毒抗体的ELISA试剂盒及其应用。包括包被截短表达的ALV‑J gp85蛋白的酶标板,其中,所述的截短表达的ALV‑J gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明利用截短表达的J亚群禽白血病病毒(ALV‑J)gp85蛋白建立了ALV‑J抗体间接ELISA检测方法,试验表明,该方法特异性好,与AB亚群ALV抗体无交叉,且其敏感性和特异性优于同类进口试剂盒,本发明的提出为ALV‑J的检测和流行病学调查以及ALV‑J的早期诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号:CN112501129A
公开(公告)日:2021-03-16
申请号:CN202011466765.6
申请日:2020-12-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了抗IBDV VP2蛋白的单克隆抗体组合及其在鉴别检测IBDV中的用途。所述的单克隆抗体组合由抗IBDV VP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株7D以及25C所分泌的单克隆抗体组成,其中杂交瘤细胞株7D以及25C的菌种保藏编号分别为CGMCC NO.21009以及CGMCC NO.21008。实验证明,7D对IBDV经典毒、超强毒和变异株均能识别,而25C只能识别IBDV经典毒和超强毒,不能识别IBDV变异株。此外,本发明还利用该两株单克隆抗体建立了间接免疫荧光技术,可鉴别检测IBDV变异株和非变异株(经典毒和超强毒),因此,本发明的提出为IBDV的鉴别提供了新的技术手段,对于IBD的综合防控具有重要意义。
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公开(公告)号:CN109355434A
公开(公告)日:2019-02-19
申请号:CN201811418448.X
申请日:2018-11-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12R1/93
CPC classification number: C12Q1/705 , C12Q1/6851 , C12Q2600/166 , C12Q2531/113 , C12Q2545/101 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种定量检测鸡马立克氏病毒Meq基因缺失疫苗株和野毒株的荧光定量PCR试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有两套分别用于检测鸡马立克氏病毒Meq基因缺失疫苗株和野毒株的荧光定量PCR引物和探针,其中用于检测鸡马立克氏病毒Meq基因缺失疫苗株的荧光定量PCR引物序列如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示,探针序列如SEQ ID NO.3所示;用于检测鸡马立克氏病毒野毒株的荧光定量PCR引物序列如SEQ ID NO.4以及SEQ ID NO.5所示,探针序列如SEQ ID NO.6所示。经过体外实验证明本发明的试剂盒敏感性高,特异型好,重复性好,能分别准确定量鸡马立克氏病毒Meq基因缺失疫苗株和MDV野毒株,对于鸡马立克氏病的诊断、疫苗的免疫监控等具有重要意义。
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公开(公告)号:CN114592088B
公开(公告)日:2024-04-02
申请号:CN202210151323.5
申请日:2022-02-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种用于检测或区分禽呼肠孤病毒4种不同基因型的多重PCR试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有多重PCR引物组。所述的多重PCR引物组由1条通用上游引物,和分别用于扩增ARV‑Ⅰ、ARV‑Ⅰ‑sub、ARV‑Ⅱ以及ARV‑Ⅴ特异性基因区域的4条特异性下游引物组成,其中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,分别用于扩增ARV‑Ⅰ、ARV‑Ⅰ‑sub、ARV‑Ⅱ、ARV‑Ⅴ特异性基因区域的4条特异性下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2‑5所示。实验结果表明,该方法敏感性高,特异性良好,对人工感染动物试验样品检测结果表明,mPCR与常规PCR方法检测结果一致,符合率为100%,适用于禽病毒性关节炎临床诊断、流行病学调查以及临床监测工作。
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公开(公告)号:CN114196639B
公开(公告)日:2023-09-19
申请号:CN202111370551.3
申请日:2021-11-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N15/62 , C12N15/85 , A61K39/295 , A61K39/245 , A61K39/125 , A61P31/14 , A61P31/22
Abstract: 本发明公开了一种共同表达3型鸭甲型肝炎病毒P1和3C基因的重组鸭瘟病毒及其构建方法和用途,属于医学或兽医学技术领域。具体地,本发明利用重组克隆技术,将包含β‑actin启动子以及3型鸭甲型肝炎病毒P1和3C基因的基因片段β‑actin‑P13C插入到鸭瘟病毒US7和US8基因之间的间隔区中,构建获得在US7和US8基因之间插入β‑actin‑P13C表达框架的重组粘粒,由其拯救获得共同表达3型鸭甲型肝炎病毒P1和3C基因的重组鸭瘟病毒疫苗株rDEV‑US78‑P13C。结果显示,重组病毒疫苗株rDEV‑US78‑P13C免疫雏鸭后7天,就可以诱导对3型鸭甲型肝炎病毒强毒致死性攻击的完全保护,同时对鸭瘟病毒攻毒也显示了良好的免疫保护效果,是一株良好的预防鸭病毒性肝炎和鸭瘟的二联疫苗。
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公开(公告)号:CN112500458B
公开(公告)日:2022-12-16
申请号:CN202011473614.3
申请日:2020-12-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒新型变异株亚单位疫苗、其制备方法及应用。针对IBDV新型变异株的流行,本发明对IBDV新型变异株代表毒株SHG19主要保护性蛋白VP2的基因表达盒进行了设计,引入了利于其正确构象形成的元件,构建了重组原核表达质粒,制备了重组大肠杆菌基因工程菌,经过表达条件和纯化条件的摸索,高效制备了IBDV新型变异株病毒样颗粒,将该病毒样颗粒与佐剂乳化制备成疫苗,试验结果显示,该疫苗不仅对同源的新型变异株产生了100%的免疫保护,而且对异源的vvIBDV的致死性攻击也产生了良好的免疫保护。本发明的提出为IBDV新型变异株以及超强毒株的防治提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN114592088A
公开(公告)日:2022-06-07
申请号:CN202210151323.5
申请日:2022-02-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种用于检测或区分禽呼肠孤病毒4种不同基因型的多重PCR试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有多重PCR引物组。所述的多重PCR引物组由1条通用上游引物,和分别用于扩增ARV‑Ⅰ、ARV‑Ⅰ‑sub、ARV‑Ⅱ以及ARV‑Ⅴ特异性基因区域的4条特异性下游引物组成,其中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,分别用于扩增ARV‑Ⅰ、ARV‑Ⅰ‑sub、ARV‑Ⅱ、ARV‑Ⅴ特异性基因区域的4条特异性下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2‑5所示。实验结果表明,该方法敏感性高,特异性良好,对人工感染动物试验样品检测结果表明,mPCR与常规PCR方法检测结果一致,符合率为100%,适用于禽病毒性关节炎临床诊断、流行病学调查以及临床监测工作。
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公开(公告)号:CN114231503A
公开(公告)日:2022-03-25
申请号:CN202111349642.9
申请日:2021-11-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , C12N15/40 , A61K39/12 , A61K39/235 , A61P31/14 , A61P31/20 , A61P9/00 , A61P7/10 , A61P1/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒、血清4型禽腺病毒二联灭活疫苗及其制备方法和应用。本发明在血清4型禽腺病毒反向遗传疫苗株rHN20的基础上,在FAdV‑4基因组开放阅读框42和43之间的长度为1966‑bp天然核苷酸缺失位点插入传染性法氏囊病病毒超强毒的VP2基因,获得了一种表达鸡传染性法氏囊病病毒超强毒(vvIBDV)VP2蛋白的重组血清4型禽腺病毒(FAdV‑4)疫苗株,命名为rHN20‑vvIBDV‑VP2。将该疫苗株制备成二联灭活疫苗,免疫保护实验证明,接种rHN20‑vvIBDV‑VP2二联灭活疫苗的SPF鸡可以完全抵抗FAdV‑4强毒株以及IBDV超强毒的攻毒感染,证明rHN20‑vvIBDV‑VP2二联灭活疫苗具有非常好的免疫原性。本发明的提出为防治鸡心包积液‑肝炎综合征以及鸡传染性法氏囊病提供了有效的技术手段。
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