溶藻弧菌双重TaqMan探针实时荧光定量PCR检测试剂盒及其制备方法

    公开(公告)号:CN111996268A

    公开(公告)日:2020-11-27

    申请号:CN202010900767.5

    申请日:2020-08-31

    Abstract: 本发明利用溶藻弧菌两个基因的保守序列分别设计一对引物,优化PCR反应条件和反应体系,建立起检测溶藻弧菌的双重TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法,在此基础上组装出简便、快速、特异性强、灵敏度高的溶藻弧菌检测试剂盒,该试剂盒对质粒的检测下限为5×101拷贝数/μL,对细菌纯培养物的检测下限为1.8×102 cfu/mL。本发明克服了单探针法在检测同属近缘细菌时可能存在的假阳性,可实现复杂样品基质中目标病原菌的特异性检测,因而在溶藻弧菌的流行病学调查、溶藻弧菌所致疾病的快速诊断、以及水产品质量安全监测等方面具有广泛的应用价值。

    大黄鱼白细胞介素4/13B基因启动子序列及其应用

    公开(公告)号:CN120040577A

    公开(公告)日:2025-05-27

    申请号:CN202510206741.3

    申请日:2025-02-25

    Abstract: 本发明公开了一种大黄鱼白细胞介素4/13B(IL‑4/13B)基因的启动子,所述启动子序列如SEQ ID NO.1所示。将重组质粒pGL3‑IL‑4/13B和对照质粒pGL3‑Basic分别转染鲤上皮瘤EPC细胞,以海肾荧光素酶报告基因质粒pRL‑TK为内参,使用双萤光素酶报告基因检测系统分析不同组间萤火虫荧光素酶活性差异;再分别使用Poly(I:C)、植物凝集素PHA和灭活的变形假单胞菌刺激转染pGL3‑IL‑4/13B质粒的EPC细胞,分析萤火虫荧光素酶活性的变化。本发明提供的大黄鱼 IL‑4/13B 基因的启动子序列,具有启动子基础活性,可启动下游报告基因转录表达,并响应Poly(I:C)、PHA、灭活的变形假单胞菌等外源刺激,为研究大黄鱼 IL‑4/13B 基因的转录调控机制提供优良的实验系统,也可用于高效表达外源基因或应用于转基因大黄鱼的研究,具有理论意义和实践价值。

    一种降低大黄鱼应激反应的声学标签植入装置及方法

    公开(公告)号:CN119837669A

    公开(公告)日:2025-04-18

    申请号:CN202510043462.X

    申请日:2025-01-10

    Abstract: 本发明涉及鱼类行为及声学遥测技术领域,具体涉及一种降低大黄鱼应激反应的声学标签植入装置及方法,包括麻醉水槽,所述麻醉水槽的一侧设置有鱼体术后静养槽,位于麻醉水槽和鱼体术后静养槽之间的上方设置有用于固定鱼体的鱼体固定装置;所述麻醉水槽内经纵向设置的第一隔板分隔为能够实现水流循环的鱼体适应暂养区和造流麻醉剂投放区,位于麻醉水槽和鱼体术后静养槽的上方均安装有高清摄像头。该装置及方法能够提高微创手术、声学标签植入以及缝合手术的工作效率,并有效减少操作胁迫对于大黄鱼的影响。

    一种与花鲈净膛重性状相关的分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN118957099A

    公开(公告)日:2024-11-15

    申请号:CN202411260103.1

    申请日:2024-09-10

    Abstract: 本发明涉及分子生物学及遗传育种领域,具体公开了一种与花鲈净膛重性状相关的分子标记及其应用;为更快速准确地在育种中筛选快生长的花鲈作为繁殖亲本,本方案采用全基因组重测序结合极端表型全基因组关联分析的方法鉴定了花鲈净膛重性状相关的遗传标记,其中位于8号染色体第15408385处的SNP标记与花鲈净膛重显著相关,表型方差解释百分比达13.0%,该位点存在C/T突变,基因型为CC的花鲈净膛重显著高于CT及TT基因型的个体。针对该位点我们设计了检测引物并建立了检测方法。花鲈繁殖周期长,需三到四年达到性成熟,本发明提供的SNP标记可应用于花鲈分子标记辅助育种,提高选育的准确定并缩短育种周期,进而加快育种进程。

    一种物理诱导皱纹盘鲍四倍体的方法

    公开(公告)号:CN118696882A

    公开(公告)日:2024-09-27

    申请号:CN202411070482.8

    申请日:2024-08-06

    Abstract: 一种皱纹盘鲍四倍体的诱导方法,涉及贝类四倍体的培育方法。包括以下步骤:1)种鲍选择及促熟:选取无外部损伤、健康有活力的雌雄种鲍分别置于种鲍培育池中同步促熟;2)人工催产:挑选性腺发育良好的二倍体鲍进行催产,至雌雄种鲍产卵和排精为止;3)精卵的选择和混合受精:分别滤除精卵中的杂质,将精子加入卵液中同步混合受精;4)冷休克诱导:当60%~80%受精卵准备第一次卵裂开始伸长时,立即将受精卵收集至预冷温度为2~8℃海水中处理10~15min,以抑制第一次卵裂;5)孵育:冷休克结束后立即将受精卵放入18~22℃孵育水箱中进行孵化。通过改良种鲍催产方式,优化诱导条件,从而实现皱纹盘鲍四倍体的高效稳定获得。

    一种用于变形假单胞菌的冻干保护剂及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN118496999A

    公开(公告)日:2024-08-16

    申请号:CN202410912868.2

    申请日:2024-07-09

    Abstract: 本发明涉及微生物技术领域,尤其涉及一种用于变形假单胞菌的冻干保护剂及其制备方法和应用。所述冻干保护剂以质量分数计包括:5%~7.5%乳糖,0~5%甘露醇,0~5%海藻糖,10%~15%脱脂乳粉,0~0.5%维生素C,0~0.5%明胶,0~3%山梨醇,0~1%甘油,0~2%L‑抗坏血酸钠,余量为灭菌的1wt%氯化钠溶液。优选的,所述冻干保护剂以质量分数计包括:7.5%乳糖,5%甘露醇,5%海藻糖,1%甘油,10%脱脂乳粉,0.5%维生素C,0.5%明胶,余量为灭菌的1wt%氯化钠溶液。使用所述冻干保护剂制备的变形假单胞菌冻干粉,在‑80℃条件下储藏半年,变形假单胞菌的存活率可达到30%以上。

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