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公开(公告)号:CN107625960B
公开(公告)日:2020-10-02
申请号:CN201710868395.0
申请日:2017-09-22
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: A61K39/108 , A61K39/39 , A61P31/04 , A61P1/12
Abstract: 本发明提供一种通用型猪大肠杆菌病疫苗及其制备方法,属于动物细菌基因工程技术领域。所述疫苗,含有如下抗原:由周质伴侣蛋白Skp、MltA‑相关蛋白MipA和长链脂肪酸外膜转运蛋白Lomt形成的融合蛋白、不耐热肠毒素的B亚基和志贺毒素2e的B亚基,所述抗原的序列分别如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示。本发明通用型猪大肠杆菌病疫苗免疫后,可以使动物产生较高的IgG和IgA抗体水平,抗体持续期超过120天。本发明疫苗免疫后,能够同时保护ETEC F4、F5、F6、F41和O139的攻击,保护率均为100%,且无腹泻现象发生,与现有疫苗相比,保护范围显著扩大。
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公开(公告)号:CN107937619A
公开(公告)日:2018-04-20
申请号:CN201711497886.5
申请日:2017-12-29
Applicant: 江苏省农业科学院
Inventor: 肖琦 , 何孔旺 , 茅爱华 , 汪伟 , 俞正玉 , 郭佳慧 , 温立斌 , 胡屹屹 , 朱雪蛟 , 李彬 , 郭容利 , 范宝超 , 周萍 , 曲梦 , 倪艳秀 , 周俊明 , 祝昊丹 , 王丹丹 , 张雪寒 , 张碧成 , 吕立新 , 沈江萍
Abstract: 本发明提供一种用于检测猪圆环病毒3型的引物组合物及其应用,涉及生物技术领域。用于检测猪圆环病毒3型的引物组合物,包括上游引物和下游引物,所述上游引物的序列如SEQ ID NO:1所示,所述下游引物的序列如SEQ ID NO:2所示。本发明还提供以非诊断为目的的检测猪圆环病毒3型的方法,以待检样品中提取的总DNA为模板,采用权利要求1-3之一所述引物组合物进行PCR扩增,从而确定待检样品中是否存在猪圆环病毒3型。采用本发明引物组合物及检测方法,能够快速、准确、灵敏的检测出样品中是否存PCV3。
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公开(公告)号:CN107099506A
公开(公告)日:2017-08-29
申请号:CN201710269905.2
申请日:2017-04-24
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供猪流行性腹泻病毒双抗体夹心ELISA定量检测试剂盒及其应用,涉及生物检测领域。抗PEDV N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株PEDV,保藏编号为CCTCC NO:C201710。猪流行性腹泻病毒双抗体夹心ELISA定量检测试剂盒,包括预包被酶标板和酶标记抗体,预包被酶标板是采用所述抗PEDV N蛋白单克隆抗体包被的酶标板,酶标记抗体是辣根过氧化物酶标记的抗PEDV N蛋白多克隆抗体;抗PEDV N蛋白多克隆抗体通过用猪流行性腹泻病毒N蛋白免疫兔子,获取兔子血清后纯化获得。本发明试剂盒特异性好、灵敏度高、稳定性好,能够快速、简便、高效的定量检测猪流行性腹泻病毒,成本低、适合高通量检测。
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公开(公告)号:CN105400881A
公开(公告)日:2016-03-16
申请号:CN201510925222.9
申请日:2015-12-14
Applicant: 江苏省农业科学院
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q2600/158
Abstract: 本发明提供了胸膜肺炎放线杆菌血清4型PCR检测用引物及其试剂盒,属于生物技术领域。以基因组DNA为模板,利用所提供引物进行PCR扩增,反应结束后根据扩增片段的数量和分子量大小判定结果。本发明的引物特异性好,检测方法快速简单,灵敏度高,不仅可从细菌培养液,也能直接从病料中检测胸膜肺炎放线杆菌血清4型,可用于胸膜肺炎放线杆菌血清4型的分子流行病学调查、疫病诊断及疫苗菌株的筛选。
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公开(公告)号:CN103866030B
公开(公告)日:2015-10-28
申请号:CN201410130191.3
申请日:2014-04-02
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及食品和生物领域检测,特别是涉及大肠杆菌O157:H7的LAMP检测引物及检测试剂盒。是一种运用4条特异性引物检测样品中大肠杆菌O157:H7的方法及试剂盒。其步骤为:步骤一,提取待检样品中的核苷酸;步骤二,利用所述LAMP检测试剂盒检测样品中核苷酸,判断样品中是否含有大肠杆菌O157:H7。本发明的试剂盒操作简便、结果直观,敏感性和特异性良好。
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公开(公告)号:CN103866035A
公开(公告)日:2014-06-18
申请号:CN201410132107.1
申请日:2014-04-02
Applicant: 江苏省农业科学院
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明涉及一种用于检测大肠杆菌O157:H7核苷酸片段的引物和探针序列,属于生物和食品检测技术领域。引物包括:由序列为gccaggcaaatatgtttgtga的上游引物pZF和序列为catttggcatttgaacgatgaa的下游引物pZR组成的引物对。探针pZP序列为cctggataccgctactcaaattctgtcaaaat。该套引物和探针根据GenBank上大肠杆菌O157:H7?EDL933(登录号:AE005174)设计,具有较高的灵敏度和特异性。
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公开(公告)号:CN102154513B
公开(公告)日:2013-01-30
申请号:CN201110063355.1
申请日:2011-03-16
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及一种检测猪Hokovirus的PCR检测方法,属于生物技术领域。具体采用25μl的PCR反应体系,在0.2mlPCR反应管内分别加入缓冲液,上、下游引物,DNA聚合酶以及提取的DNA模板,用灭菌超纯水加至总体积,将试剂混合均匀后,至于PCR扩增仪中,进行变性、退火、延伸,共循环35次;PCR反应结束后,取10μl产物在琼脂糖凝胶上,使用TAE缓冲液进行电泳,在紫外投射仪下观察PCR产物,并与标准分子量相对照,阳性样品可出现540bp片段。本发明所提供的检测方法敏感性高、特异性好、操作简便、迅速,并且对检测材料质量要求低,便于临床上的应用。
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公开(公告)号:CN102206607A
公开(公告)日:2011-10-05
申请号:CN201110087699.6
申请日:2011-04-08
Applicant: 江苏省农业科学院
Inventor: 何孔旺 , 张雪寒 , 卢维彩 , 赵攀登 , 叶青 , 温立斌 , 郭容利 , 李彬 , 王小敏 , 倪艳秀 , 吕立新 , 周俊明 , 俞正玉 , 茅爱华 , 周萍 , 沈江萍
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , A61K39/108 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及肠出血性大肠杆菌O157:H7三基因缺失菌株,属于生物技术领域。①抗性诱导,获得具有链霉素抗性的EHECO157:H7菌株。②缺失株构建,首先EHECO157:H7(△hly),而后依次构建EHECO157:H7(△hly△stx)和EHECO157:H7(△hly△stx△toxB)。EHECO157:H7(△hly△stx△toxB)致病性和小鼠体内定植能力较亲本菌株有明显降低而免疫原性良好。本发明构建了EHECO157:H7(△hly△stx△toxB),并明确了致病性和定植特性。本发明构建的缺失菌株EHECO157:H7(△hly△stx△toxB),可用于研制EHEC基因缺失活疫苗,免疫接种动物以减少EHECO157:H7在肠道内的定植,进而降低人类感染EHECO157:H7的机会,保障人类身心健康。
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公开(公告)号:CN102174662A
公开(公告)日:2011-09-07
申请号:CN201110063365.5
申请日:2011-03-16
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及一种检测猪博卡病毒的PCR检测方法,属于生物技术领域。具体采用25μl的PCR反应体系,在0.2mlPCR反应管内分别加入缓冲液,上、下游引物,DNA聚合酶以及提取的DNA模板,用灭菌超纯水加至总体积,将试剂混合均匀后,至于PCR扩增仪中,进行变性、退火、延伸,共循环35次;PCR反应结束后,取10μl产物在琼脂糖凝胶上,使用TAE缓冲液进行电泳,在紫外投射仪下观察PCR产物,并与标准分子量相对照,阳性样品可出现约为270bp的片段。本发明所提供的检测方法敏感性高、特异性好、操作简便、迅速,并且对检测材料质量要求低,便于临床上的应用。
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公开(公告)号:CN102154513A
公开(公告)日:2011-08-17
申请号:CN201110063355.1
申请日:2011-03-16
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及一种检测猪Hokovirus的PCR检测方法,属于生物技术领域。具体采用25μl的PCR反应体系,在0.2mlPCR反应管内分别加入缓冲液,上、下游引物,DNA聚合酶以及提取的DNA模板,用灭菌超纯水加至总体积,将试剂混合均匀后,至于PCR扩增仪中,进行变性、退火、延伸,共循环35次;PCR反应结束后,取10μl产物在琼脂糖凝胶上,使用TAE缓冲液进行电泳,在紫外投射仪下观察PCR产物,并与标准分子量相对照,阳性样品可出现540bp片段。本发明所提供的检测方法敏感性高、特异性好、操作简便、迅速,并且对检测材料质量要求低,便于临床上的应用。
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