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公开(公告)号：CN105039330A
公开(公告)日：2015-11-11
申请号：CN201510487540.1
申请日：2015-08-10
Applicant: 广东省微生物研究所 , 广东环凯微生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种GII.4型诺如病毒基因组扩增引物和扩增方法。本发明分别以六对引物作为扩增引物的上下游引物，以GII.4型诺如病毒的RNA为模板进行RT-PCR扩增，分别得到扩增产物，然后对扩增产物进行核酸序列测序，然后再拼接比对，得到GII.4型诺如病毒基因组全长序列。本发明针对GII.4型诺如病毒主要流行基因型，根据基因组所包含的三个开放阅读框设计了“4+1+1”的分段扩增策略，并根据保守区域设计相应的扩增引物；其能有效的扩增出GII.4型诺如病毒的全基因组序列。本发明可广泛应用于医疗卫生、检验检疫等具有诺如病毒检测需求及相应的科研领域。
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公开(公告)号：CN105176984B
公开(公告)日：2018-07-06
申请号：CN201510617459.0
申请日：2015-09-23
Applicant: 广东省微生物研究所 , 广东环凯微生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种GII.17型诺如病毒基因组扩增引物和扩增方法。本发明分别以七对引物作为扩增引物的上下游引物，以GII.17型诺如病毒的RNA为模板进行RT‑PCR扩增，分别得到扩增产物，然后对扩增产物进行核酸序列测序，然后再拼接比对，得到GII.17型诺如病毒基因组全长序列。本发明针对新出现的GII.17型诺如病毒流行基因型，根据基因组所包含的三个开放阅读框设计了“4+1+1”的分段扩增策略，根据保守区域设计相应的扩增引物，将该扩增引物应用于实际检出样本，获得了GII.17型诺如病毒基因组序列。本发明方法具有操作简单、周期短、成本低以及灵敏度高的特点，可广泛应用于医疗卫生、检验检疫等具有诺如病毒检测需求及相应的科研领域。
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公开(公告)号：CN105925573A
公开(公告)日：2016-09-07
申请号：CN201610510474.X
申请日：2016-06-30
Applicant: 广东省微生物研究所 , 广东环凯微生物科技有限公司
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明公开了一种GII.P12/GII.3重组型诺如病毒基因组扩增引物和扩增方法。本发明分别以六对扩增引物作为扩增引物的上下游引物，以GII.P12/GII.3重组型诺如病毒的RNA为模板进行RT‑PCR扩增，分别得到扩增产物，然后采用以上六对扩增引物以及两条测序引物II.12‑Seq1R、II.3‑Seq6F对扩增产物进行核酸序列测序，然后再拼接比对，得到GII.P12/GII.3重组型诺如病毒基因组全长序列。本发明针对我国常见的一种GII.P12/GII.3重组型诺如病毒，根据其基因组所包含的三个开放阅读框设计了“4+1+1”的分段扩增策略，根据保守区域设计相应的扩增引物，将该扩增引物应用于实际检出样本，获得了GII.P12/GII.3重组型诺如病毒基因组序列。本发明可广泛应用于医疗卫生、检验检疫等有诺如病毒检测需求及相关科研领域。
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公开(公告)号：CN104498445A
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201410790113.6
申请日：2014-12-17
Applicant: 广东省微生物研究所 , 广东环凯微生物科技有限公司
IPC: C12N7/02
Abstract: 本发明公开了一种从水体中高效浓缩病毒的方法。它是将待测水样去除杂质不溶物后，在其中加入足量的Mg2+和PO43+，以形成絮凝物沉淀待测水样中的病毒，然后再经负压抽滤过混合纤维滤膜，取下滤膜，用pH值3.5～4.5的溶液冲洗并溶解滤膜上的凝固物，得到洗涤液，洗涤液再经超滤浓缩，得到病毒浓缩液。本发明的方法除了能高浓缩效率的特点外，还有如下优点：一是快速：絮凝快，洗脱也快；二是比较简便：目前正电荷膜全部依靠进口，材料不易获得，应用本发明的方法，使用任何一种普通的微孔滤膜均可；三是可用于现场快速浓缩病毒：在现场采样时，不需要采取大量水样回到实验室进行检测，只需待水样絮凝静止沉降后，即可获得小体积的初步浓缩样品。
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