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公开(公告)号:CN114606151B
公开(公告)日:2023-05-19
申请号:CN202210456408.4
申请日:2022-04-27
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开一种表面展示β‑半乳糖苷酶的重组毕赤酵母,通过在原始毕赤酵母中异源表达来源于米曲霉BK03的β‑半乳糖苷酶基因lacA与来源于酿酒酵母的细胞壁蛋白pir1p得到。所得的重组菌株GS115‑pir1p‑lacA通过锚定蛋白将β‑半乳糖苷酶基因lacA锚定在细胞表面,固定化后的酶可以用做全细胞催化剂,且重组表面展示菌株能一直保持较高的酶活力,酶活能持续较久,随着菌的存活一直稳定存在。
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公开(公告)号:CN113817616B
公开(公告)日:2023-05-09
申请号:CN202111106831.3
申请日:2021-09-22
Applicant: 南京工业大学 , 南京高新工大生物技术研究院有限公司 , 中粮生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一株几丁质合酶转录调控基因MedA失活的黑曲霉基因工程菌及其应用。本发明通过基因敲除手段构建了一株几丁质合酶转录调控基因MedA缺失的黑曲霉基因工程菌。该基因工程菌使黑曲霉在固定化发酵产柠檬酸过程中生物膜量减少,使载体孔径被堵死的现象得到有效缓解,增加了载体与外界的传氧传质效果,从而发挥出固定化发酵的优势,提高了柠檬酸的产量,缩短了发酵周期,有效解决了现有工业上黑曲霉发酵生产柠檬酸时产量低、发酵周期长的问题。
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公开(公告)号:CN116064487A
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202310274227.4
申请日:2023-03-21
Applicant: 南京高新工大生物技术研究院有限公司 , 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种固定化里氏木霉高产纤维素酶的方法。通过采用一定密度、孔径和外观直径的聚氨酯泡沫作为里氏木霉吸附的固定化载体,利于系统传质作用,可减少工业放大生产过程中的能耗。将利用改性剂聚醚酰亚胺改性后的固定化载体置于生物反应器的固定化载体区域使其自由悬浮更好的吸附里氏木霉,再通过调节发酵培养中的碳氮源和发酵方式,调控菌体的生长,减少菌体量过多对传质带来的影响,同时也促进了酶活的提升,有利于实现长期稳定的固定化连续发酵纤维素酶。
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公开(公告)号:CN112725369B
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202110163662.0
申请日:2021-02-05
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开一种耐盐腺苷酸环化酶的基因、重组载体、重组菌及其应用。所述的耐盐腺苷酸环化酶基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,该基因编码的耐盐腺苷酸环化酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,共334个氨基酸,理论分子量为35.99kDa。该重组菌所表达腺苷酸环化酶的催化活力随着氯化钠浓度的提高而增强,在氯化钠浓度为2.2 M时,重组菌细胞催化活力达到最大,最适底物浓度为30mM,最适pH为10.0,最适温度为40°C;利用该重组菌全细胞催化合成cAMP,产率达到96.6%。与现有报道的腺苷酸环化酶酶催化工艺或全细胞催化合成cAMP过程相比,该重组菌在高渗条件下具备更高的稳定性和催化效率,具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN115851467A
公开(公告)日:2023-03-28
申请号:CN202210803808.8
申请日:2022-07-07
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株过表达Cna1基因的重组酿酒酵母及其构建方法;所述的重组酿酒酵母过表达Cna1基因。所述Cna1基因的核苷酸序列为SEQ ID No.1,所述的酿酒酵母为Saccharomyces cerevisiae S288c。本发明通过过表达Cna1基因,促进了重组菌株生物膜的形成,同时本发明第一次将真菌信号通路基因利用到基于生物膜固定化发酵生产乙醇当中,提高了重组菌株的生物膜量。
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公开(公告)号:CN112779170B
公开(公告)日:2023-02-21
申请号:CN202110095568.6
申请日:2021-01-25
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株重组黑曲霉基因工程菌及构建方法和应用,所述重组黑曲霉基因工程菌中铁获取调控基因失活。该基因工程菌使黑曲霉在固定化发酵产柠檬酸过程中生物膜量减少,使载体孔径被堵死的现象得到有效缓解,增加了载体与外界的传氧传质效果,从而发挥出固定化发酵的优势,提高了柠檬酸的产量和糖酸转化率,缩短了发酵周期,有效解决了现有工业上黑曲霉发酵生产柠檬酸时产量低、发酵周期长的问题;且所得重组黑曲霉基因工程菌能够12批次连续发酵,发酵强度无明显下降。
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公开(公告)号:CN114958705A
公开(公告)日:2022-08-30
申请号:CN202210712627.4
申请日:2022-06-22
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/65 , C12N15/31 , C12N15/60 , C12N15/56 , C12N11/12 , C12P13/08 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种将鞭毛运动蛋白motA应用于群体感应动态调控系统提高大肠杆菌固定化发酵的方法。所述大肠杆菌基因工程菌是向大肠杆菌W1688中导入含esaI/R系统的pUC19‑PJ23119‑MCS质粒,并将其与运动基因motA相结合。本发明首次将大肠杆菌成膜相关的运动基因motA与群体感应系统esaI/R结合,通过群体感应信号分子之间的信号传递控制生物膜的形成、分解与扩散,建立特异性的调控方式,精确调控发酵过程中生物膜的形成过程,加强生物膜在发酵前中期的形成、削弱其后期的分解与扩散,提高生物膜固定化效率和催化效率。
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公开(公告)号:CN114606151A
公开(公告)日:2022-06-10
申请号:CN202210456408.4
申请日:2022-04-27
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开一种表面展示β‑半乳糖苷酶的重组毕赤酵母,通过在原始毕赤酵母中异源表达来源于米曲霉BK03的β‑半乳糖苷酶基因lacA与来源于酿酒酵母的细胞壁蛋白pir1p得到。所得的重组菌株GS115‑pir1p‑lacA通过锚定蛋白将β‑半乳糖苷酶基因lacA锚定在细胞表面,固定化后的酶可以用做全细胞催化剂,且重组表面展示菌株能一直保持较高的酶活力,酶活能持续较久,随着菌的存活一直稳定存在。
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公开(公告)号:CN114317389A
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202111577723.4
申请日:2021-12-22
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用重组大肠杆菌共培养发酵产L‑苏氨酸的方法,即利用重组大肠杆菌△bluF+nMagHigh和重组大肠杆菌△bluF+pMagHigh共培养发酵产L‑苏氨酸。本发明中nMagHigh与pMaghigh的表达共培养,对重组菌的生物膜形成有促进作用,对大肠杆菌发酵产L‑苏氨酸有促进作用,同时缩短了发酵周期、实现了细胞的可循环使用,节约了成本。同时本发明是第一次将光遗传学元件Magnet系统应用到基于生物膜固定化发酵产氨基酸当中。
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公开(公告)号:CN114292885A
公开(公告)日:2022-04-08
申请号:CN202111496998.5
申请日:2021-12-09
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12P7/56 , C12N11/04 , C12N11/08 , C12N11/082 , C12N11/093 , C12N11/14 , C12N9/42 , C12N1/20 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一种利用提高凝结芽孢杆菌发酵产L‑乳酸的方法,以脱木质素纤维经酶解所得的上清液为发酵培养基,以聚酰胺纤维、聚酯纤维、聚氨酯、炭黑、棉纤维和聚氯乙烯中的任意一种或几种组合为固定化载体,进行固定化发酵产L‑乳酸。本发明所提供的方法中固定化细胞连续多批次发酵不仅缩短了单批次生产周期,提高了生产能力,平均产酸浓度108g/L,平均物料乳酸转化率0.41g/(g半脱玉米秸秆),比单批次游离细胞发酵提高17.39%,平均产酸速率达1.82g/(h·L),是游离细胞发酵的1.42倍,发酵效果明显高于游离细胞发酵,而且省去了发酵前不断活化培养菌体的操作,大大简化了生产工艺。
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