公开(公告)号：CN111351929A

公开(公告)日：2020-06-30

申请号：CN202010040714.0

申请日：2020-01-15

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 王利民 ,  徐畅 ,  胡白石 ,  龚伟荣 ,  田艳丽

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明涉及一种基于单克隆抗体的黄瓜绿斑驳花叶病毒快速检测试纸条，可用于甜瓜、黄瓜等作物上黄瓜绿斑驳病的田间快速筛查。其包括底板，底板的一面自上而下依次黏贴吸水板、检测垫、金标垫和样品垫，相邻各垫在连接处交叠连接。所述检测垫为硝酸纤维素膜，该膜自上而下设计1条质控线和1条检测线；所述质控线包被有兔抗鼠IgG；所述检测线包被有用于捕获黄瓜绿斑驳花叶病毒的单克隆抗体2C9；所述金标垫为玻璃纤维素膜，喷涂有纳米金标记的用于识别被检测线捕获的黄瓜绿斑驳花叶病毒的单克隆抗体4D4。试纸条操作简单，灵敏度高，稳定性强。

公开(公告)号：CN106525824A

公开(公告)日：2017-03-22

申请号：CN201610373103.1

申请日：2016-05-30

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘凤权 ,  王利民 ,  钱国良 ,  王玉龙 ,  苏振贺 ,  王鸣华 ,  华修德 ,  张存政

IPC: G01N21/78 ,  G01N21/33

CPC classification number: G01N21/78 ,  G01N21/33

Abstract: 本发明涉及一种基于MarR蛋白调控的Cu2+比色检测方法，包括(1)新型Cu2+高特异性识别元件(MarR蛋白)的制备；(2)MarR蛋白标记纳米金制备比色探针，通过Cu2+诱导MarR蛋白四聚体的形成，导致胶体金探针的沉聚，观察Cu2+添加前后溶液的颜色变化，实现对于Cu2+的半定量比色检测。同时扫描Cu2+添加前后溶液的紫外-可见光谱，以600nm和520nm波长处吸光度比值(A600/A520)为纵坐标，Cu2+标准溶液的浓度为横坐标建立曲线方程，通过测定样品中Cu2+的A600/A520，代入曲线方程，得出待测样品中Cu2+的浓度。本发明涉及的一种基于MarR蛋白调控的Cu2+比色检测方法，不仅快速，简便，同时还兼具低成本，能用于现场检测等特点，可应用于家庭，医院，机场口岸等需要实行快速检测的机构。

公开(公告)号：CN103589688B

公开(公告)日：2016-06-29

申请号：CN201310365944.4

申请日：2013-08-21

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘凤权 ,  王利民 ,  秦娜 ,  方庆奎 ,  华修德

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/44 ,  G01N33/577 ,  C07F9/24 ,  C12Q1/02 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及抗三种有机磷农药的单克隆抗体及其应用。本发明通过化学合成针对上述农药公共结构的人工半抗原，进而制备完全抗原，免疫Balb/C鼠，通过杂交瘤技术制备特异性强的单克隆抗体，并用于农产品和农业生产环境中上述三种农药残留的高灵敏快速检测。本发明抗体的制备技术可行，抗原的整个制备过程不需要特别的仪器设备，易于规模化生产。

公开(公告)号：CN105137081A

公开(公告)日：2015-12-09

申请号：CN201510220708.2

申请日：2015-04-28

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘凤权 ,  王利民 ,  方庆奎

IPC: G01N33/577

CPC classification number: G01N33/577

Abstract: 本发明提供一种基于单克隆抗体的吡虫啉检测金放大试纸条，它包括衬板，衬板的一面自上而下依次黏贴吸水纸、检测垫、金标垫1(放大)、金标垫2(检测)和样品垫，相邻各垫在连接处交叠连接。所述检测垫为硝酸纤维素膜，该膜自上而下设计1条质控线和3条检测线；所述质控线包被有兔抗鼠IgG；所述检测线包被有吡虫啉包被半抗原-鸡卵清白蛋白偶联物；所述金标垫1(放大)为玻璃纤维素膜，喷涂有亲和素标记的纳米金颗粒；所述金标垫2(检测)为玻璃纤维素膜，喷涂有纳米金标记的抗吡虫啉单克隆抗体，该单克隆抗体为由保藏编号为CCTCC NO：C201509的杂交瘤细胞株CH3分泌产生的单克隆抗体。该试纸条对吡虫啉的检测区间为0-5ng/mL(阴性)，5-25ng/mL，25-250ng/mL，250-1000ng/mL以及大于1000ng/mL，可用于叶菜类蔬菜中吡虫啉残留量的半定量快速测定。

公开(公告)号：CN104792782A

公开(公告)日：2015-07-22

申请号：CN201510219755.5

申请日：2015-04-28

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘凤权 ,  王利民 ,  王苏妍

IPC: G01N21/78

Abstract: 本发明涉及一种基于银纳米颗粒的胆碱酯酶活性检测试纸条。该试纸条包括纸板，纸板的一面自上到下依次黏贴吸水纸、检测垫、还原垫和样品垫，相邻各垫在连接处交叠连接。其中检测垫为硝酸纤维素膜，该膜自上而下设置了三条检测线，分别包被了浓度由高到低的硝酸银水溶液；还原垫为玻璃纤维，喷涂有一定浓度的维生素C的HEPES溶液。该试纸条可用于胆碱酯酶活性的快速检测，具有使用简便，灵敏度高，检测结果无需依靠仪器分析等优势。所建立的检测试纸条，对活性胆碱酯酶检测灵敏度可达到0.01nM，可为胆碱酯酶活性检测提供新的方法。

公开(公告)号：CN104130330A

公开(公告)日：2014-11-05

申请号：CN201410399871.5

申请日：2014-08-13

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘凤权 ,  王利民 ,  王苏妍 ,  蔡佳

IPC: C07K16/44 ,  C12N5/20 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明涉及杂交瘤细胞株FQ-4F12，以及该细胞株分泌的抗重金属汞单克隆抗体。杂交瘤细胞株FQ-4F12，保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO.C2014131。其分泌产生的单克隆抗体可识别重金属汞，灵敏度高、特异性好。由该单克隆抗体研制的酶联免疫吸附检测方法可实现水环境中重金属汞的检测，对检测溶液中汞离子含量的IC50可达25ng/mL。

公开(公告)号：CN103018435B

公开(公告)日：2014-10-22

申请号：CN201210237844.9

申请日：2012-07-11

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘凤权 ,  王利民 ,  华修德

IPC: G01N33/531 ,  G01N33/558

Abstract: 本发明涉及甲基对硫磷等8种有机磷农药的多残留快速检测金标试纸条。试纸条含有衬板、样品垫、金标结合垫、纤维素膜和吸水垫。金标结合垫为吸附金标抗体的玻璃纤维素膜；在纤维素膜上有甲基对硫磷偶联的载体蛋白溶液印制的直线式隐形检测线，用兔抗鼠IgG印制的直线式隐形对照线，两条线平行排列组合。本发明试纸条具有检测谱广、灵敏度高、快速、简便、直观、准确的特点，并且前处理简单，不需要任何仪器设备，无需专业人员操作。