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公开(公告)号:CN107881146A
公开(公告)日:2018-04-06
申请号:CN201711340838.5
申请日:2017-12-14
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
Inventor: 董念国 , 刘保庆 , 李飞 , 尚小珂 , 史峰 , 邱雪峰 , 史嘉玮 , 陈思 , 吴龙 , 刘隽炜 , 刘义华 , 胡行健 , 洪昊 , 李华东 , 孙永丰 , 乔韡华 , 张超 , 王寅 , 李庚 , 朱鹏 , 刘名 , 代金池 , 白鹏 , 姜烨凡
IPC: C12N5/077
CPC classification number: C12N5/0657 , C12N2500/30 , C12N2509/00 , C12N2533/32 , C12N2533/52 , C12N2533/54
Abstract: 本发明公开了一种心肌细胞分离提纯方法,涉及生物细胞培养技术领域,S1,将配好的包被液加入于六孔板中孵育;S2,将心肌缓冲液加入培养皿中,取心脏置于装有心肌缓冲液的培养皿中漂洗;S3,剪下的心脏组织置于装有心肌缓冲液的离心管中;S4,将0.05%Ⅱ型胶原酶加入离心管中,摇床培养,弃上清;S5,将0.1%Ⅱ型胶原酶加入步骤S4处理后的离心管中,摇床培养,取上清放入装有血清的离心管中混匀;S6,上清混匀后过滤、离心,离心后用心肌缓冲液重悬,将细胞悬液加入离心管中;S7,将细胞悬液缓慢加入配好的密度梯度液中,进行离心;S8,将吸出的中间层置于离心管中,进行离心,离心后重悬,计数后加入步骤S1处理后的六孔板培养。
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公开(公告)号:CN119367611A
公开(公告)日:2025-01-28
申请号:CN202411525563.2
申请日:2024-10-29
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
Abstract: 本发明公开了酶促交联处理心脏瓣膜的方法、人工生物心脏瓣膜及应用,所述心脏瓣膜交联方法采用表面巯基化修饰基于巯基氧化酶交联去细胞瓣膜,满足廉价易行和避免细胞毒性的需求,生物力学性能较好的去细胞瓣膜支架材料;与此同时,对瓣膜表面进行ε‑聚赖氨酸和α‑聚赖氨酸的酰胺化修饰,利用其广谱抗菌性能和促进细胞黏附、增殖和分化的能力,加速瓣膜内皮化,延长瓣膜使用寿命。
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公开(公告)号:CN118681065A
公开(公告)日:2024-09-24
申请号:CN202410698620.0
申请日:2024-05-31
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: A61L27/36 , A61K31/225 , A61K9/14 , A61K47/34 , A61P9/00
Abstract: 本发明公开了一种基于生物正交反应的纳米颗粒载药递送系统与TCO修饰生物瓣,属于医疗器械技术领域。本发明通过体内外细胞及动物实验筛选抗钙化药物4‑衣康酸辛酯,该药物可调控浸润瓣膜内部巨噬细胞代谢状态,抑制其凋亡、氧化应激,从而减轻生物瓣钙化。本发明中生物瓣修饰TCO基团,载4‑衣康酸辛酯的PLGA‑PEG纳米颗粒修饰Tz基团,该载药纳米颗粒通过TCO‑Tz基团的生物正交反应靶向结合到生物瓣位置释放药物发挥显著的抗钙化作用。本发明为生物瓣抗钙化提供了新的思路。
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公开(公告)号:CN118681064A
公开(公告)日:2024-09-24
申请号:CN202410698609.4
申请日:2024-05-31
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
Abstract: 本发明公开了一种基于聚多巴胺‑壳聚糖衣康酸层层自组装的抗钙化生物瓣及其制备方法与应用,属于医疗器械技术领域。本发明通过将生物瓣依次浸泡于0.5‑1.5mg/mL聚多巴胺工作液、0.5‑1.5mg/mL壳聚糖衣康酸工作液中可制备不同自组装层数的生物瓣,该生物瓣抗钙化效果显著,相较经典生物瓣钙化程度明显降低;层层自组装可负载大剂量药物,药物可起长期抗钙化作用,相较全身给药(口服、静脉)方式,局部给药可减少药物副作用。
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公开(公告)号:CN112980770A
公开(公告)日:2021-06-18
申请号:CN202110235774.2
申请日:2021-03-03
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明涉及一种诱导人类多能干细胞定向内皮分化方法,具体包括以下步骤:1、人类诱导多能干细胞达到80%融合以上时,使用含有10‑50ng/ml WNT3a的分化培养基,对消化后的干细胞进行诱导分化;2、使用含有10‑50ng/ml WNT3a和10‑30ng/ml BMP2的分化培养基,对细胞继续诱导分化;3、使用含有10‑30ng/ml BMP2的分化培养基,对步骤2诱导分化后的细胞继续诱导分化为中胚层细胞;4、使用含有10‑15ng/ml FGF8的培养基,对细胞继续诱导分化为内皮细胞。本发明通过改良培养基及相关细胞因子,本实验方案可以具备更高的内皮诱导效率。
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公开(公告)号:CN111925939A
公开(公告)日:2020-11-13
申请号:CN202010933002.1
申请日:2020-09-08
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
Abstract: 本发明涉及一种动态加压组织工程瓣膜细胞接种器及其使用方法,包括上基座、上盖、下基座、下盖和瓣膜夹具,所述上基座内设有上部液室,所述下基座内设有下部液室,所述上盖内设有上部气室,所述下盖内设有下部气室,所述上盖与所述上基座连接,所述上部气室和所述上部液室之间设有上部隔膜,所述下盖与所述下基座连接,所述下部气室和所述下部液室之间设有下部隔膜,所述瓣膜夹具设置在所述上部液室内,所述上基座和所述下基座通过卡扣连接。本发明用于人体心脏组织工程瓣膜的细胞接种,可以实现种子细胞的加压动态培养,使种子细胞均匀接种于支架材料,并在压力作用下可进入瓣膜支架内部,实现支架的全面细胞化,避免细胞脱落。
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公开(公告)号:CN111560345A
公开(公告)日:2020-08-21
申请号:CN201910388100.9
申请日:2019-05-10
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
Inventor: 李飞 , 董念国 , 吴龙 , 刘保庆 , 刘名 , 尚小珂 , 史峰 , 邱雪峰 , 史嘉玮 , 刘隽炜 , 胡行健 , 洪昊 , 王寅 , 李华东 , 孙永丰 , 张超 , 乔韡华 , 蔡子文 , 李睿
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明公开了一种猪原代瓣膜内皮细胞分离纯化方法,包括以下步骤:步骤1、前期准备,将医疗器械和细胞培养基准备好;步骤2、包被将配好的包被液分别加入培养皿中,37℃孵育至少1小时,种细胞前PBS清洗3次;步骤3、取瓣膜组织无菌环境下剪取猪瓣膜组织,置入4℃预冷无菌肝素生理盐水中冲洗干净;步骤4、通过配置的密度梯度液,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。本发明具备以下有益效果:本发明的猪原代瓣膜内皮细胞分离纯化方法历时约2h,极大的提高了瓣膜内皮细胞分离纯化效率,且3-4h后即可观测到内皮细胞呈旋涡状或铺路石样排列、生长;免疫荧光显示内皮细胞纯度达95%以上,且简便、易操作。
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公开(公告)号:CN109821069A
公开(公告)日:2019-05-31
申请号:CN201910040192.1
申请日:2019-01-16
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
Abstract: 本发明涉及一种光交联型去细胞瓣膜及其制备方法和其应用。上述制备方法包括:步骤一、将去细胞处理后的瓣膜置于核黄素溶液中并轻柔摇晃以使核黄素充分扩散进入去细胞基质中;步骤二、将经步骤一处理的瓣膜从核黄素溶液中取出,再以紫外线照射交联后清洗去除瓣膜中残余核黄素,即可获得一种光交联型去细胞瓣膜。本发明中创新性的将核黄素及光交联用于处理并增强去细胞基质瓣膜的力学性能,且结果显示该处理能显著提高瓣膜的杨氏模量,并能减缓其体内降解速度。
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公开(公告)号:CN108004205A
公开(公告)日:2018-05-08
申请号:CN201711342017.5
申请日:2017-12-14
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
Inventor: 董念国 , 刘保庆 , 李飞 , 尚小珂 , 史峰 , 邱雪峰 , 史嘉玮 , 陈思 , 吴龙 , 刘隽炜 , 刘义华 , 胡行健 , 洪昊 , 李华东 , 孙永丰 , 乔韡华 , 李庚 , 朱鹏 , 李光周 , 王怡轩 , 耿冰川 , 刘发远 , 谢飞 , 刘名 , 刘春耕 , 黄玉明
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明公开了一种用于心肌细胞分离提纯的心肌缓冲液试剂盒及使用方法,涉及生物细胞培养技术领域,试剂盒包括心肌缓冲粉末,心肌缓冲粉末包括7.012-8.007份Nacl,0.395-0.403份Kcl,0.123-0.222份MgSO4.7H2O,0.973-1.046份葡萄糖,0.060-0.077份KH2PO4,0.042-0.071份Na2HPO4,4.766-5.958份4-羟乙基哌嗪乙磺酸。采用本发明的试剂盒进中心肌缓冲粉末为低钙粉末,不含有胰酶或添加化学抑制剂,避免了胰酶化学抑制剂对心肌细胞的损伤,适宜于保持心肌细胞活性,因此,采用本发明的试剂盒可最大程度上保证了心肌细胞的活性,细胞存活率更高。
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公开(公告)号:CN214694229U
公开(公告)日:2021-11-12
申请号:CN202120468435.4
申请日:2021-03-04
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: C12M3/00
Abstract: 本实用新型涉及一种用于组织工程动态培养的平板流动反应腔,包括带扣底板、软胶板和盖样板,所述带扣底板的顶部开设有方形槽,所述软胶板的外轮廓与方形槽配合且软胶板设置于方形槽内,所述软胶板的顶部均匀开设有若干凹槽;所述盖样板设置于带扣底板顶部,所述带扣底板的外侧均匀设置有若干卡扣,所述卡扣用于卡住盖样板顶部使盖样板固定于带扣底板顶部,所述盖样板的底部开设有流体通道,所述盖样的顶部设置有两个连通管,两个连通管分别连接流体通道两端。本实用新型由带扣底板、软胶板和盖样板组成,结合生物反应器使用,可实现种植细胞后的组织工程瓣膜或者组织工程血管的动态培养。
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