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公开(公告)号：CN116396876B
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202310174396.0
申请日：2023-02-28
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种生产人参皂苷Rd的酿酒酵母工程菌及其构建方法，属于分子生物学和生物工程技术领域。所述的生产人参皂苷Rd的酿酒酵母工程菌是在产原人参二醇的起始菌株ZW04BY酿酒酵母中敲除β‑葡萄糖苷酶EGH1，过表达葡萄糖磷酸变位酶1、葡萄糖磷酸变位酶2和UDP‑葡萄糖焦磷酸化酶，糖基转移酶Pn1‑31、糖基转移酶PnUGT53、糖基转移酶PnUGT50和原人参二醇合成酶PPDS。本发明获得的酿酒酵母工程菌能够利用葡萄糖发酵生产人参皂苷Rd，产量为56.68±16.21mg/L；酵母生长繁殖较快，仅需发酵罐就可以生产，为人工细胞高效合成人参皂苷Rd奠定了基础。
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公开(公告)号：CN116064267B
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202211438823.3
申请日：2022-11-17
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种生产人参皂苷Rg3的酿酒酵母工程菌及其构建方法，属于分子生物学和生物工程技术领域。本发明将糖基转移酶PnUGT50和糖基转移酶PnUGT31进行酵母密码子优化，分别在组合型启动子和G418抗性标签的作用下，插入ZW04BY酵母基因组的δ序列多拷贝位点，获得生产人参皂苷Rg3的酿酒酵母工程菌。本发明通过在起始菌株ZW04BY酿酒酵母中异源过表达人参皂苷Rg3通路合成的2个关键酶实现了人参皂苷Rg3在酿酒酵母中的生产，使其产量达到254.07±56.49mg/L，本发明的方法为人工细胞高效合成人参皂苷Rg3奠定了基础。
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公开(公告)号：CN116064267A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202211438823.3
申请日：2022-11-17
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种生产人参皂苷Rg3的酿酒酵母工程菌及其构建方法，属于分子生物学和生物工程技术领域。本发明将糖基转移酶PnUGT50和糖基转移酶PnUGT31进行酵母密码子优化，分别在组合型启动子和G418抗性标签的作用下，插入ZW04BY酵母基因组的δ序列多拷贝位点，获得生产人参皂苷Rg3的酿酒酵母工程菌。本发明通过在起始菌株ZW04BY酿酒酵母中异源过表达人参皂苷Rg3通路合成的2个关键酶实现了人参皂苷Rg3在酿酒酵母中的生产，使其产量达到254.07±56.49mg/L，本发明的方法为人工细胞高效合成人参皂苷Rg3奠定了基础。
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公开(公告)号：CN113667655A
公开(公告)日：2021-11-19
申请号：CN202110969942.0
申请日：2021-08-24
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开一种仙茅糖基转移酶Co84A‑471基因及在制备苔黑酚葡萄糖苷中的应用。仙茅糖基转移酶Co84A‑471基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。以苔黑酚和糖基供体UDP‑葡萄糖为原料，在由仙茅糖基转移酶Co84A‑471基因编码得到的仙茅糖基转移酶的催化下，在苔黑酚的C3或C5位上的羟基上进行一次糖基化，生成苔黑酚葡萄糖苷。本发明通过体外合成苔黑酚葡萄糖苷，可控性强，可以减少对原料种植的需求，节约农业用地，生产产物单一，便于后期苔黑酚葡萄糖苷的分离和纯化。所述仙茅糖基转移酶Co84A‑471基因作为苔黑酚葡萄糖苷生物合成的关键基因，还可用于仙茅等植物育种研究。
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