一种鱼类持续激活生长激素受体基因及制备方法和用途

    公开(公告)号:CN102241763B

    公开(公告)日:2013-05-01

    申请号:CN201110141084.7

    申请日:2011-05-27

    Abstract: 本发明公开了一种鱼类持续激活生长激素受体基因及制备方法和用途。通过对鲤鱼GHR信号肽、c-Jun亮氨酸拉链区以及GHR跨膜区和胞内区分别采取PCR扩增,结合又一轮的搭桥PCR扩增,获得持续激活的GHR重组基因片段;将获得的重组基因克隆入表达载体pCA-AT,获得用于基因转移的重组基因载体pCA-SJG-AT。一种编码的蛋白质,其序列为SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列,一种分离的重组基因,其序列为SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列。该重组基因在快速生长转基因鱼中的应用,具有如下优点:(1)重组GHR蛋白的促进信号通路活性高,持续激活的GHR作用比GH作用的效率高3倍以上;(2)持续激活的GHR基因的转基因促生长效应显著,转基因鱼比对照鱼生长速度快50%以上。

    一种雌性鲤鱼性逆转为雄性鲤鱼的培育方法

    公开(公告)号:CN102283149B

    公开(公告)日:2012-12-12

    申请号:CN201110186519.X

    申请日:2011-07-05

    CPC classification number: Y02A40/81

    Abstract: 本发明公开了一种将雌性鲤鱼性逆转为雄性鲤鱼的培育方法,其步骤:A、挤压10-11月龄鲤鱼腹部,将精液流出的雄性鲤鱼与没有精液流出的鲤鱼分开;B、将铜质挖卵器插入不能挤出精液的鲤鱼生殖孔,挑选可以得到卵粒的鲤鱼养殖在水泥池中;C、根据鲤鱼体重,每天投喂含有17α-甲基睾酮的饲料,每5天在鲤鱼胸腔混合注射地欧酮、促黄体素释放激素和鲤鱼垂体;D、连续处理试验鲤鱼2个月后,挤压鲤鱼腹部,有乳白色精液流出的试验鱼就是遗传型为雌性,而生理上是雄性的性逆转鲤鱼。方法易行,操作简便,直接将遗传型为雌性的鲤鱼性逆转为生理雄性的鲤鱼。该性逆转的鲤鱼与普通鲤鱼杂交的子代生长速度快,具有明显的经济效益。

    不育转基因鱼的制备方法
    23.
    发明授权

    公开(公告)号:CN1294808C

    公开(公告)日:2007-01-17

    申请号:CN03125455.1

    申请日:2003-09-26

    Abstract: 本发明公开了一种不育转基因鱼的制备方法,以鲤鱼肌动蛋白基因启动子作为启动子,以反义的286bp鲤鱼鲑鱼型促性腺激素释放激素基因互补脱氧核糖核酸片段[包括sGnRH十肽、促性腺激素释放激素相关肽编码区和64bp的3′非编码区序列]为靶位基因,草鱼生长激素基因3′侧翼序列为终止顺序,构建鲑鱼型促性腺激素释放激素反义RNA表达载体,采用显微注射法将重组DNA片段导入鲤鱼受精卵,聚合链式酶反应及放射免疫检测筛选获得不育转基因鱼。本发明方法易行,操作方便,为解决转基因鱼的遗传和生态安全问题提供了具有普遍适用性的技术平台。

    不育转基因鱼的制备方法
    25.
    发明公开

    公开(公告)号:CN1528131A

    公开(公告)日:2004-09-15

    申请号:CN03125455.1

    申请日:2003-09-26

    Abstract: 本发明公开了一种不育转基因鱼的制备方法,以鲤鱼肌动蛋白基因启动子作为启动子,以反义的286bp鲤鱼鲑鱼型促性腺激素释放激素基因互补脱氧核糖核酸片段[包括sGnRH十肽、促性腺激素释放激素相关肽编码区和64bp的3′非编码区序列]为靶位基因,草鱼生长激素基因3′侧翼序列为终止顺序,构建鲑鱼型促性腺激素释放激素反义RNA表达载体,采用显微注射法将重组DNA片段导入鲤鱼受精卵,聚合链式酶反应及放射免疫检测筛选获得不育转基因鱼。本发明方法易行,操作方便,为解决转基因鱼的遗传和生态安全问题提供了具有普遍适用性的技术平台。

    一种鲟鱼TALEN基因编辑方法

    公开(公告)号:CN108034675B

    公开(公告)日:2020-10-30

    申请号:CN201711282301.8

    申请日:2017-12-07

    Abstract: 本发明公开了一种鲟鱼TALEN基因编辑方法,包括将靶基因质粒和针对靶位点的TALEN mRNA混合后,利用显微操作的方式注射到受精时间不超过20分钟的鲟鱼1细胞期受精卵动物极的受精孔中,将靶基因质粒和针对靶位点的TALEN mRNA按1:3浓度比例混合后,采用显微注射方法按100 ng/µL质粒浓度导入小体鲟1细胞期的受精胚中,可以获得存活率74%,外源靶基因突变率高达93%的小体鲟胚胎,本发明第一次建立鲟鱼外源基因精准编辑技术,为开展鲟鱼基因的功能研究和鲟鱼养殖品种的遗传改良提供了强有力的技术手段。

    一种用于原始生殖细胞靶向突变的转基因载体及制备方法和用途

    公开(公告)号:CN105274141A

    公开(公告)日:2016-01-27

    申请号:CN201510809203.X

    申请日:2015-11-20

    Abstract: 本发明公开了一种用于原始生殖细胞靶向突变的转基因载体及制备方法和用途。将本发明提供的载体pTol2(UAS:Cas9)导入单细胞期斑马鱼胚胎,获得的Tg(UAS:Cas9)品系与Tg(kop:KalTA4品系)雌鱼杂交后,获得的杂交胚胎能够在斑马鱼原始生殖细胞中高效、特异、持续表达Cas9基因。在制备突变品系时,以Tg(UAS:Cas9)雄鱼与Tg(kop:KalTA4)雌鱼杂交胚胎作为受体胚胎,直接注射靶向基因的gRNA后,能够有效减少体细胞突变,从而增加注射的P0代胚胎的成活率,同时P0代成鱼能够有效的传递突变,具有广泛应用前景。

    一种提高鱼类omega-3多不饱和脂肪酸的方法及应用

    公开(公告)号:CN103898159B

    公开(公告)日:2016-01-20

    申请号:CN201410155088.4

    申请日:2014-04-17

    Abstract: 本发明公开了一种提高鱼类omega-3多不饱和脂肪酸的方法及应用,其步骤为:1,构建fat2转基因鱼类家系;2,构建fat1转基因鱼类家系;3,以两个转基因家系为亲本,杂交获得同时表达fat2和fat1基因的富含omega-3多不饱和脂肪酸的双转基因家系。在本方法中,通过转基因引入的fat2和fat1基因填补了鱼类体内从头合成多不饱和脂肪酸通路的断裂,使得转基因鱼获得从头合成omega-3多不饱和脂肪酸的能力,利用该方法可获得高omega-3多不饱和脂肪酸含量的鱼类产品,能有效运用到经济性鱼类的转基因育种中。

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