用于检测马流产沙门氏菌的特异性引物组及其用途

    公开(公告)号:CN111088379B

    公开(公告)日:2023-03-21

    申请号:CN202010046938.2

    申请日:2020-01-16

    Inventor: 胡哲 王晓钧

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测马流产沙门氏菌的特异性引物组及其用途。所述的引物组由上游引物以及下游引物组成,其中所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。特异性实验结果表明该引物组只与马流产沙门氏菌反应,而与其他马、驴常见传染病病原均无交叉反应,具有良好的特异性。灵敏度实验表明,该引物组检测马流产沙门氏菌的最低限度为4.7×103CFU/ml,具有良好的敏感性。本发明的提出为马流产沙门氏菌的检测或诊断提供了一种有效技术手段,通过本发明的方法,使马流产沙门氏菌的检出率极大提高,诊断更精确,对于马流产沙门氏菌病的防控具有重要意义。

    马流产沙门氏菌驴源株及其在制备驴副伤寒灭活疫苗中的应用

    公开(公告)号:CN111154678A

    公开(公告)日:2020-05-15

    申请号:CN202010036541.5

    申请日:2020-01-14

    Abstract: 本发明公开了马流产沙门氏菌驴源株及其在制备驴副伤寒灭活疫苗中的应用,属于生物疫苗领域。本发明所述的马流产沙门氏菌驴源株,命名为20180422.D.DE.X,保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,菌种保藏编号为:CGMCC No.18342。本发明的马流产沙门氏菌驴源株20180422.D.DE.X具有免疫原性好、培养特性好等优点,将该马流产沙门氏菌驴源株接种于沙门氏菌增菌液,培养后,用甲醛(终浓度0.2%)灭活后,制备成灭活疫苗。实验证明,使用本发明制备得到的灭活疫苗免疫小鼠,能够使小鼠免于强毒马流产沙门氏菌的攻击,且在驴体上免疫安全性良好。因此该疫苗具有安全、低剂量免疫等优点,是首个驴用马流产沙门氏菌灭活疫苗,可以用于预防由马流产沙门氏菌引起的驴副伤寒。

    一种用于检测非洲马瘟的胶体金免疫层析抗体检测试纸条及其应用

    公开(公告)号:CN118443931A

    公开(公告)日:2024-08-06

    申请号:CN202410535423.7

    申请日:2024-04-29

    Inventor: 王晓钧 胡哲 郭奎

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测非洲马瘟的胶体金免疫层析抗体检测试纸条及其应用。所述的试纸条包括从左到右依次连接的样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜以及吸水滤纸,还包括位于下方的PVC底板,其中PVC底板的作用是提供组装平台,硝酸纤维素膜上具有马IgG抗体喷涂的质控线,以及非洲马瘟病毒重组VP7蛋白喷涂的检测线,胶体金垫上涂覆有非洲马瘟病毒重组VP7蛋白标记的胶体金颗粒,样品垫提供了待测样品加入的位置。实验结果显示,该试纸条的诊断敏感性和诊断特异性均为100%,最低检测限度为1:1024。与商品化试剂盒检测结果符合率为100%。本发明的胶体金免疫层析抗体检测试纸条在37℃加速实验中可稳定保存15天。本发明的提出为非洲马瘟的检测提供了有效的技术手段。

    一种检测马IL-1β双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN117143826A

    公开(公告)日:2023-12-01

    申请号:CN202311002569.7

    申请日:2023-08-09

    Abstract: 本发明公开了一种检测马IL‑1β双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用。本发明分别使用由保藏号CGMCC No.45601和CGMCC No.45602的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体作为捕获抗体和检测抗体,建立了双抗体夹心ELISA方法。特异性试验结果表明该方法特异性良好,与IL‑1α、IL‑1Ra、IFN‑α和SAA均不发生反应。灵敏性试验表明该方法对IL‑1β的最低检出量为143pg/mL,灵敏度为9.3pg/mL;检测范围为200‑10000pg/mL。重复性试验表明该方法变异系数均小于5%,确定该方法具有良好的重复性。通过对临床样品的检测发现,本发明建立的双抗体夹心ELISA方法与RD公司的DY3340双抗体夹心ELISA方法的检测结果基本一致,符合率为94%。本发明的提出为检测马IL‑1β提供了一种快速检测方法和监测手段。

    一种基于抗体捕获的非洲马瘟间接ELISA抗体检测试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN116338193A

    公开(公告)日:2023-06-27

    申请号:CN202210879227.2

    申请日:2022-07-25

    Inventor: 胡哲 王晓钧 郭奎

    Abstract: 本发明公开了一种基于抗体捕获的非洲马瘟间接ELISA抗体检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有特异性抗非洲马瘟病毒VP7蛋白单克隆抗体包被的酶标板,其中所述的特异性抗非洲马瘟病毒VP7蛋白单克隆抗体由杂交瘤细胞株ANSV‑VP7‑3G9分泌产生,所述的杂交瘤细胞株ANSV‑VP7‑3G9的保藏编号为CGMCC No.45157。本发明基于抗体捕获提出了一种非洲马瘟间接ELISA抗体检测试剂盒,本发明的酶标板上首先包被一种可以识别抗原的单克隆抗体,利用单克隆抗体特异性地捕获抗原,再加入血清及酶标二抗。通过单克隆抗体捕获抗原,减少非目标抗原(如大肠杆菌)与ELISA酶标板的吸附作用,从而提高方法的特异性。该方法相比普通间接ELISA的2次级联放大作用变为三次级联放大,即保留了间接ELISA方法的敏感性,又提高了特异性。

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