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公开(公告)号：CN113214366B
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202110571930.2
申请日：2021-05-25
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了一种重组新城疫病毒基质蛋白及其应用，所述重组新城疫病毒基质蛋白为发生了R247K和/或S263R突变的基质蛋白；所述新城疫病毒为新城疫病毒疫苗株La Sota株。本发明还提供了一种核酸分子、一种重组载体、一种重组细胞、一种重组新城疫病毒及其制备方法以及一种新城疫病毒疫苗。所述重组新城疫病毒基质蛋白具有更好的核质穿梭效率、更强的出胞能力及更快的出芽速度，可以促进新城疫病毒的增殖与释放；含有重组基质蛋白的重组新城疫病毒具有更高的滴度和更快的增殖速度，且依然保持弱毒毒力，对于疫苗的研发与改进具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN110295197A
公开(公告)日：2019-10-01
申请号：CN201910603170.1
申请日：2019-07-05
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N15/866 , C07K14/10 , A61K39/12 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种重组表达载体、制备得到的III型鸭甲型肝炎病毒样颗粒、制备方法及应用，包含III型鸭甲型肝炎病毒结构蛋白前体基因P1和蛋白水解酶基因3C；所述结构蛋白前体基因P1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述蛋白水解酶基因3C的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。经过密码子优化的基因在昆虫细胞中表达水平明显提高，可获得具有较好空间构型的蛋白，在胞内自发组装成病毒样颗粒(VLPs)，够获得高纯度、形态均一、性状稳定的病毒颗粒。
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公开(公告)号：CN119751660A
公开(公告)日：2025-04-04
申请号：CN202411750530.8
申请日：2024-12-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种猫麻疹病毒特异性单克隆抗体及其应用，所述单克隆抗体由猫麻疹病毒N蛋白免疫制备得到，所述单克隆抗体特异性识别猫麻疹病毒N蛋白，识别的猫麻疹病毒N蛋白包括核酸序列如SEQ ID NO:1所示的猫麻疹病毒N蛋白‑N片段和核酸序列如SEQ ID NO:2所示的猫麻疹病毒N蛋白‑C片段。本发明所提供的单克隆抗体能够特异性识别猫麻疹病毒N蛋白，效价高，亲和力好，灵敏度高，基于该抗体制备的检测试剂盒可以有效的检测猫血液、尿液等体液中的猫麻疹病毒，为猫麻疹病毒感染的流行病学监测和诊断提供技术支持。
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公开(公告)号：CN118956963A
公开(公告)日：2024-11-15
申请号：CN202411174405.7
申请日：2024-08-26
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开了一种提高NDV反向遗传载体外源蛋白表达量的方法及其重组毒株，将抗原蛋白VP2整合到重组NDV载体上得到新城疫病毒NDnIBDO1株；VP2蛋白的核酸序列如SEQ ID NO.3所示，将NC90序列修饰后的VP2蛋白VP2NPC整合到重组NDV载体上得到新城疫病毒NDnIBDO2株,VP2NPC蛋白的核酸序列如SEQ ID NO.4所示，将NC90序列修饰后的VP2mNPC整合到改造后的重组NDV载体上得到新城疫病毒NDnIBDO3株,VP2mNPC蛋白的核酸序列如SEQ ID NO.5所示，本发明对重组毒株进行生物学特性及免疫原性检测，结果表明，外源蛋白经NC90序列优化后表达量显著高于亲本，免疫原性高于亲本。
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公开(公告)号：CN118291388A
公开(公告)日：2024-07-05
申请号：CN202410391110.9
申请日：2024-04-01
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N5/10 , C12N15/113 , C12N15/867 , A01K67/0276 , A61K31/7088 , A61K48/00 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，特别是涉及靶向Xkr8基因的sgRNA、重组载体及在抗新城疫病毒感染中的应用。本发明基于CRISPR系统，提供了一种特异性靶向Xkr8基因的sgRNA。利用本发明提供的sgRNA能够有效地靶向Xkr8基因并且能够敲除该基因，具有操作时间短，靶向精准，制备成本低等特点。通过敲除Xkr8基因，本发明发现Xkr8基因敲除细胞株可降低新城疫病毒感染滴度，此外，针对Xkr8基因设计的小分子靶向药物也可以应用于抑制NDV感染宿主细胞及对NDV易感鸡群。另外，通过敲除Xkr8基因可培育Xkr8基因敲除鸡品系有潜力应用于天然抗NDV感染的研究。
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公开(公告)号：CN118222521A
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202410503097.1
申请日：2024-04-25
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开了一种新城疫病毒重组弱毒毒株以及疫苗的制备和应用，所述重组疫苗的所述毒株于2023年11月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC No.45762。本发明病毒滴度明显提高，具有更好的热稳定性，能够更快、更高地激发抗体，保护鸽免受鸽副黏病毒Ⅰ型的感染，且实现零排毒。
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公开(公告)号：CN113214366A
公开(公告)日：2021-08-06
申请号：CN202110571930.2
申请日：2021-05-25
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了一种重组新城疫病毒基质蛋白及其应用，所述重组新城疫病毒基质蛋白为发生了R247K和/或S263R突变的基质蛋白；所述新城疫病毒为新城疫病毒疫苗株La Sota株。本发明还提供了一种核酸分子、一种重组载体、一种重组细胞、一种重组新城疫病毒及其制备方法以及一种新城疫病毒疫苗。所述重组新城疫病毒基质蛋白具有更好的核质穿梭效率、更强的出胞能力及更快的出芽速度，可以促进新城疫病毒的增殖与释放；含有重组基质蛋白的重组新城疫病毒具有更高的滴度和更快的增殖速度，且依然保持弱毒毒力，对于疫苗的研发与改进具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN110093318B
公开(公告)日：2021-08-03
申请号：CN201910344592.1
申请日：2019-04-26
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及一种稳定表达仓鼠TIGAR基因的BHK细胞系及其构建方法和应用，该细胞系含有TIGAR基因，保藏号为CCTCC NO:C201928。通过先扩增仓鼠TIGAR基因并构建质粒；再将构建的质粒与PAX、PMD2G质粒同时转入293T细胞，形成包装好的慢病毒；将其感染BHK细胞后，进行药物筛选，然后扩大培养，即得所述细胞系。该细胞系可增加细胞抗凋亡能力，从而延长细胞存活时间，提高新城疫在细胞中的病毒滴度；并成功构建筛选适合新城疫病毒繁殖的高产细胞株。
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公开(公告)号：CN112342244A
公开(公告)日：2021-02-09
申请号：CN202011211170.6
申请日：2020-11-03
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了一种表达Furin蛋白的细胞株及其在禽传染性支气管炎病毒培养中的应用，所述表达Furin蛋白的细胞株为基因组中整合有鸡源Furin基因的哺乳动物细胞，所述鸡源Furin基因通过慢病毒导入哺乳动物细胞。本发明的表达Furin蛋白的细胞株可用于多株IBV的体外培养，克服了现有技术中大多数IBV毒株无法在哺乳动物细胞内生长的技术难题，简化了病毒的扩繁过程，也消除了可能因感染其他禽类而带来的生物隐患，在基础研究及疫苗研发中具有广泛的应用价值。
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公开(公告)号：CN111621480A
公开(公告)日：2020-09-04
申请号：CN202010409254.4
申请日：2020-05-14
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明属于生物检测方法领域，涉及新城疫病毒(NDV)感染子宫颈癌细胞系HeLa细胞后所产生的外泌体(exosome)的纯化和检测方法。本发明的exosome纯化方法，依次包括下列步骤：(1)将含有待测exosome的细胞上清液以10000g-12000g的速度离心20-35min；(2)取上清以135000g-145000g的速度离心90-100min。本发明的检测方法包括：透射电子显微镜确定exosome形态；exosome表面标志性蛋白CD63的确定；exosome大小、浓度分析。本发明可用于纯化和检测NDV感染HeLa细胞后产生exosome，为研究exosome在病毒感染中的作用奠定基础。
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