一种编码CPC酰基转移酶的核苷酸序列及生产7-ACA的方法

    公开(公告)号:CN101768594B

    公开(公告)日:2012-05-23

    申请号:CN200810205094.0

    申请日:2008-12-30

    Abstract: 本发明公开一种编码头孢菌素C酰基转移酶的核苷酸序列、其重组表达载体及其转化子。该核苷酸序列是选自下组之一的核苷酸序列:a)序列表中SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列;b)与序列表中SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列的同源性≥94.4%的核苷酸序列;c)与a)或b)中所述的核苷酸序列互补的核苷酸序列。本发明还公开一种生产7-氨基头孢烷酸的方法,该方法包括培养上述转化子,从中获得7-ACA。本发明首次采用生物工程技术,由工程菌直接生产7-ACA,与现有的化学合成方法以及生物酶催化方法相比,该方法步骤简单,原料广泛,生产过程中无化工污染,大大降低生产成本,将带来巨大的经济效益,具有优良的工业化前景。

    一种顶头孢霉蛋白质组的制备方法

    公开(公告)号:CN102443047A

    公开(公告)日:2012-05-09

    申请号:CN201010503369.6

    申请日:2010-10-12

    Abstract: 本发明公开了一种顶头孢霉蛋白质组的制备方法,包括以下步骤:将顶头孢霉菌体用液氮研磨成粉末状后,用TCA-丙酮沉淀法提取总蛋白样品;将所得的总蛋白样品与水化溶液混合后,水化上样,采用IPG固相胶条,然后进行等电聚焦,等电聚焦完成后,将胶条平衡后转移至SDS-PAGE凝胶上,进行电泳,当溴酚蓝指示剂到达底部边缘时停止电泳,得凝胶;将所得的凝胶经染色后,用凝胶扫描仪透射扫描,将得到的图像用软件进行分析。头孢菌素C在生产头孢类抗生素中具有重要地位,可由此开展对顶头孢霉的蛋白质组学研究,为优化头孢菌素产生菌的分子育种及代谢工程打下基础,具有重要的意义。

    一种编码CPC酰基转移酶的核苷酸序列及生产7-ACA的方法

    公开(公告)号:CN101768594A

    公开(公告)日:2010-07-07

    申请号:CN200810205094.0

    申请日:2008-12-30

    Abstract: 本发明公开一种编码头孢菌素C酰基转移酶的核苷酸序列、其重组表达载体及其转化子。该核苷酸序列是选自下组之一的核苷酸序列:a)序列表中SEQ?ID?NO.1所述的核苷酸序列;b)与序列表中SEQ?ID?NO.1所述的核苷酸序列的同源性≥94.4%的核苷酸序列;c)与a)或b)中所述的核苷酸序列互补的核苷酸序列。本发明还公开一种生产7-氨基头孢烷酸的方法,该方法包括培养上述转化子,从中获得7-ACA。本发明首次采用生物工程技术,由工程菌直接生产7-ACA,与现有的化学合成方法以及生物酶催化方法相比,该方法步骤简单,原料广泛,生产过程中无化工污染,大大降低生产成本,将带来巨大的经济效益,具有优良的工业化前景。

    一种顶头孢霉蛋白质组的制备方法

    公开(公告)号:CN102443047B

    公开(公告)日:2014-11-19

    申请号:CN201010503369.6

    申请日:2010-10-12

    Abstract: 本发明公开了一种顶头孢霉蛋白质组的制备方法,包括以下步骤:将顶头孢霉菌体用液氮研磨成粉末状后,用TCA-丙酮沉淀法提取总蛋白样品;将所得的总蛋白样品与水化溶液混合后,水化上样,采用IPG固相胶条,然后进行等电聚焦,等电聚焦完成后,将胶条平衡后转移至SDS-PAGE凝胶上,进行电泳,当溴酚蓝指示剂到达底部边缘时停止电泳,得凝胶;将所得的凝胶经染色后,用凝胶扫描仪透射扫描,将得到的图像用软件进行分析。头孢菌素C在生产头孢类抗生素中具有重要地位,可由此开展对顶头孢霉的蛋白质组学研究,为优化头孢菌素产生菌的分子育种及代谢工程打下基础,具有重要的意义。

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