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公开(公告)号:CN110054576A
公开(公告)日:2019-07-26
申请号:CN201910300552.7
申请日:2019-04-15
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07C319/18 , C07C321/14 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K16/44 , C07K16/06 , G01N33/535 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种异丙甲草胺手性半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法和应用。所述异丙甲草胺手性半抗原具有如式(I)所示的分子结构:本发明首先将消旋异丙甲草胺与3-巯基丙酸反应,得到半抗原;再将此半抗原进行手性拆分,拆分为四个立体异构体半抗原αRS-、αRR-、αSS-、αSR-MMPA,然后分别与载体蛋白偶联制得人工抗原。将这4种人工抗原分别免疫动物获取对映选择性抗体,得到的4种抗体对其对映体药物进行检测的IC50分别为28.89ng/mL、13.34ng/mL、27.07ng/mL、5.68ng/mL,特异性强、灵敏度高,可用于食品安全的现场快速检测,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN109734621A
公开(公告)日:2019-05-10
申请号:CN201811647750.2
申请日:2018-12-29
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07C249/08 , C07C251/60 , C07K14/79 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K14/795 , C07K1/107 , C07K16/44 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了1-萘酚半抗原及其制备方法和应用,一种1-萘酚的半抗原,具有如下结构式:,其中,R=H或OH。利用该半抗原进一步制备得到1-萘酚完全抗原和1-萘酚抗体,并建立了1-萘酚的间接竞争酶联免疫检测方法,本检测方法对1-萘酚的检测范围达到20.8~475.7 ng/mL,检测限为8.3 ng/mL,灵敏度可达99.5 ng/mL。本发明所制备的半抗原以及以此为基础的说建立的免疫分析法线性范围广,灵敏度较高,可满足快速筛查诊断需求。
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公开(公告)号:CN108794632A
公开(公告)日:2018-11-13
申请号:CN201810229096.7
申请日:2018-03-20
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N15/13 , G01N33/543
CPC classification number: C07K16/44 , C07K2317/569 , G01N33/543 , G01N2430/10
Abstract: 本发明公开了一种广谱特异性识别二乙氧基有机磷农药的纳米抗体及酶联免疫分析方法。本发明首先构建了一种噬菌体展示纳米抗体文库,并从噬菌体展示纳米抗体文库中筛选得到一种针对二乙氧基有机磷农药的纳米抗体,该纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码该纳米抗体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该纳米抗体能够检测多种二乙氧基有机磷农药,能够广谱特异性识别二乙氧基有机磷农药,且检测结果准确、效果好、稳定性好。该方法可以广泛的应用于农产品中二乙氧基有机磷农药残留的检测,有很大的应用推广价值。
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公开(公告)号:CN108558718A
公开(公告)日:2018-09-21
申请号:CN201711489726.6
申请日:2017-12-29
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07C317/40 , C07K14/795 , C07K14/765 , C07K14/77 , G01N33/531 , G01N33/94
Abstract: 本发明公开了氟苯尼考及氟苯尼考胺抗原、抗体及其同时检测酶联免疫分析方法。本发明利用氟苯尼考作为半抗原与载体蛋白偶联获得人工抗原,作为包被原;同时在氟苯尼考分子苄羟基上衍生丁二酸半酯偶联手臂得到氟苯尼考半抗原,与载体蛋白偶联得到氟苯尼考人工抗原,作为免疫原;制备了检测抗体,并建立了酶联免疫检测方法,对于氟苯尼考的IC50=37.10 ng/mL,线性检测范围为12.03~114.49 ng/mL,对于氟苯尼考胺IC50=45.3 ng/mL,线性检测范围为10.76~190.69 ng/mL,具有灵敏度高,特异性好等显著优势,可用于快速检测食品中残留的氟苯尼考及氟苯尼考胺,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN108218992A
公开(公告)日:2018-06-29
申请号:CN201711482207.7
申请日:2017-12-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种直接识别3‑氨基‑5‑吗啉甲基‑2‑恶唑烷酮(AMOZ)的单链抗体(scFv)及其制备方法和应用。所述单链抗体包括重链可变区和轻链可变区,其序列分别如SEQ ID NO.1和2所示,或与所示序列经缺失、取代或添加一个或多个氨基酸但与所示序列具有相同功能的氨基酸序列。本发明提供的单链抗体scFv与抗原的结合可被游离的半抗原竞争性抑制,IC50为72.93ng/mL,检测限为13.35ng/mL,具有很好的抗原结合活性;通过标准曲线可知线性检测范围分别在24.98~212.92ng/mL之间。该基因工程抗体在AMOZ的免疫检测和大量样品的快速检测筛选方面具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN108164472A
公开(公告)日:2018-06-15
申请号:CN201711308739.9
申请日:2017-12-11
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07D249/14 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K16/44 , G01N33/577 , G01N33/68
CPC classification number: C07D249/14 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K16/44 , C07K19/00 , G01N33/577 , G01N33/6848 , G01N2333/47
Abstract: 本发明公开了一种基于4H‑三唑环结构限定性N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉半抗原、人工抗原、抗体及应用。一种N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉半抗原,结构如式I所示:其中R为羧基和对羧基苯基。并以此制备了N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉人工抗原和抗体,对N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉的检测效率高、操作简便,可用于N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉的酶联免疫快速检测;且本发明的抗原抗体合成过程简单、成本较低,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN108059622A
公开(公告)日:2018-05-22
申请号:CN201711308738.4
申请日:2017-12-11
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07D251/18 , C07K14/77 , C07K14/765 , C07K16/44 , G01N33/577 , G01N33/68
Abstract: 本发明一种基于三嗪环结构限定性N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉半抗原、人工抗原、抗体及应用。所述N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉半抗原的结构如式I所示:其中R为‑H和‑CH3。并以此制备了N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉人工抗原和抗体,对N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉的检测效率高、操作简便,可用于N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉的酶联免疫快速检测;且本发明的抗原抗体合成过程简单、成本较低,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN104865248B
公开(公告)日:2018-05-01
申请号:CN201510280178.0
申请日:2015-05-27
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N21/78
Abstract: 本发明公开了一种用于检测农药残留的重组家蚕乙酰胆碱酯酶的制备方法。本发明将家蚕乙酰胆碱酯酶基因与锚定蛋白基因AGα1相连插入到酵母表达载体pPIC9K中构建成表面展示载体并转化毕赤酵母GS115,筛选阳性重组子,并利用甲醇对阳性重组子进行诱导表达,表达结束后离心去除上清液,将菌体冷冻干燥即得重组家蚕乙酰胆碱酯酶。制备得到的重组酶稳定性好、操作简单、检出限低、灵敏度高、尤其成本低廉,可在家庭、市场、蔬菜生产基地等进行现场检测,非常适合大量样品的筛查,具有重要的实际应用推广意义。
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公开(公告)号:CN104897748B
公开(公告)日:2017-12-26
申请号:CN201510287384.4
申请日:2015-05-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物传感器技术领域,具体公开了一种检测组胺的可抛式一步电沉积免疫生物传感器及其制备方法。本发明免疫生物传感器采用表面有普鲁士蓝‑壳聚糖‑纳米金复合膜的电极,所述电极上固定有组胺包被原;其中,复合膜中纳米金与普鲁士蓝的摩尔浓度比为1:2000~1:20,壳聚糖的质量体积含量为0.01~0.05%。并且,采用一步沉积电极的方式使电极表面获得复合膜,沉积步骤比传统高分子聚合物修饰电极制备步骤简便,且更容易暴露抗原结合位点。本发明免疫生物传感器将竞争免疫反应和生物传感器相结合,并可根据需要得到组胺检测工作曲线等一系列性能表征,具有操作简单、灵敏度高、快速方便等优势,可用于样品中组胺的现场快速检测。
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公开(公告)号:CN107056946A
公开(公告)日:2017-08-18
申请号:CN201611236387.6
申请日:2016-12-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K16/44 , G01N33/577
CPC classification number: C07K16/44 , C07K2317/51 , C07K2317/515 , C07K2317/55 , C07K2317/92 , G01N33/577 , G01N2430/10
Abstract: 本发明公开了一种抗二乙氧基硫代磷酸酯类有机磷农药的Fab抗体及制备方法和应用。Fab抗体包括轻链和重链,所述重链具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列,或具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列经缺失、取代或添加一个或多个氨基酸获得的氨基酸序列;所述轻链具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列,或具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列经缺失、取代或添加一个或多个氨基酸获得的氨基酸序列。本发明提供的Fab抗体与抗原的结合可被游离的半抗原竞争性抑制,IC50为135.7ng/mL,具有很好的抗原结合活性。通过标准曲线可知线性检测范围分别在7.2~861.7 ng/mL之间。
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