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公开(公告)号：CN110669152B
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN201910995448.4
申请日：2019-10-18
Applicant: 福州大学
IPC: C08B37/08 , C12P19/26 , C12P21/06 , G01N30/96 , G01N30/72 , G01N30/74 , G01N30/89 , G01N30/06 , G01N30/14 , G01N30/86 , G01N30/02
Abstract: 本发明提供一种从蛤蟆油中提取硫酸软骨素/硫酸皮肤素/透明质酸的方法。所述方法先将蛤蟆油充分溶胀后加入的胰蛋白酶酶解蛤蟆油，再通过DEAE阴离子交换色谱柱提取蛤蟆油中的糖胺聚糖OR‑GAG，然后经透析、冻干、浓缩后，用硫酸软骨素ABC酶特异性酶解OR‑GAG，足量的酶可将长链酶解至硫酸软骨素/硫酸皮肤素/透明质酸(CS/DS/HA)二糖单元。CS/DS/HA二糖单元经2‑氨基吖啶酮荧光标记后，利用LC/MS‑ITTOF进行结构分析，得到蛤蟆油中各二糖组分的结构与摩尔百分比。
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公开(公告)号：CN110592165A
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201910996268.8
申请日：2019-10-18
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明提供燕窝中硫酸乙酰肝素/肝素的提取方法与结构解析，属于天然产物制备纯化领域。该方法先将粉末状燕窝用胰蛋白酶酶解，再通过DEAE阴离子交换色谱柱、透析、冻干等一系列步骤得到燕窝糖胺聚糖。然后样品用肝素酶Ⅰ、肝素酶Ⅱ、肝素酶Ⅲ特异性酶解燕窝糖胺聚糖至硫酸乙酰肝素/肝素二糖，再利用分子排阻色谱法，分离纯化得到硫酸乙酰肝素二糖/肝素二糖。硫酸乙酰肝素二糖/肝素二糖以离子对试剂为流动相，利用LC/MS-ITTOF分析二糖组分的结构并得到摩尔百分比，最后建立硫酸乙酰肝素二糖/肝素区域结构模型。
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公开(公告)号：CN109913517A
公开(公告)日：2019-06-21
申请号：CN201910238268.1
申请日：2019-03-27
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明涉及一种硫酸乙酰肝素/肝素（HS/Hp）的不同区域寡糖的制备及纯化方法。所述方法以市售肝素为原料，利用肝素酶Ⅰ特异性酶解含有3个亚硫酸根的高硫二糖，精确控制酶解反应条件达到部分酶解，得到含高硫二糖的高硫酸化区域寡糖，同时也使得HS/Hp中含NS和NAc结构的低度硫酸化寡糖片段富集下来，从而制备了系列含不同结构的低硫酸化区域寡糖。通过凝胶色谱法和离子交换高效液相色谱分离提纯了二糖至十糖一系列低度硫酸化的HS/Hp寡糖。本发明建立的制备HS/Hp的不同区域寡糖的方法快速简便，并且成本低，为HS/Hp的结构与功能研究提供重要的糖库样品，也为肝素类新型药物的开发提供了重要的前驱体。
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