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公开(公告)号：CN118109325A
公开(公告)日：2024-05-31
申请号：CN202410232801.4
申请日：2024-02-29
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种高甲醇利用率和耐受性的基因工程菌及其应用，涉及生物工程领域。本发明的酵母基因工程菌能够实现在以甲醇为碳源的培养基中具有更高的甲醇耐受性、更快的生长速度和更高的产物合成效率。本发明改造的巴斯德毕赤酵母菌株可用于构建高效和环保的细胞工厂，该基因工程策略可用于改造其他甲基营养型酵母。
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公开(公告)号：CN114940952B
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202210495966.1
申请日：2022-05-05
Applicant: 浙江大学杭州国际科创中心
Abstract: 本发明公开了一种发酵生产长春质碱的基因工程菌及其应用，涉及生物工程技术领域。本发明实现利用微生物以简单碳源为底物发酵生产长春质碱。实现了从头合成长春质碱的关键技术难点，强化毕赤酵母中心代谢，为萜类吲哚生物碱的生物合成提供参考。本发明利用微生物一步法合成长春质碱，与植物提取和化学合成相比，不受气候地理等条件限制，环境友好，满足国家绿色生物制造的战略需求。本发明的酵母工程菌通过代谢甲醇直接合成长春质碱，其产量可达2.57mg/L，为其工业化生产奠定了基础。
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公开(公告)号：CN116536175A
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202211680727.X
申请日：2022-12-26
Applicant: 浙江大学杭州国际科创中心
Abstract: 本发明公开了一种利用木糖发酵生产三乙酸内酯的酵母工程菌及其应用。该毕赤酵母基因工程菌的SCX培养基摇瓶发酵产量近588.5mg/L。本发明通过在三乙酸内酯合成的毕赤酵母工程菌中导入外源高效的木糖利用途经酶的编码基因，实现毕赤酵母利用木糖高效合成三乙酸内酯。本发明通过导入PK途经酶的编码基因，提高了三乙酸内酯合成的直接前体乙酰辅酶A的供应，进一步提高了毕赤酵母工程菌利用木糖合成三乙酸内酯的产量。本发明开发的毕赤酵母工程菌具有木糖利用效率高、生长速度快、产量高、副产物少等优点，为后续开发高效利用木糖合成乙酰辅酶A衍生产物的毕赤酵母底盘菌株奠定了基础。
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公开(公告)号：CN116515655A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202211645599.5
申请日：2022-12-20
Applicant: 浙江大学杭州国际科创中心
IPC: C12N1/19 , C12N15/81 , C12N15/60 , C12N15/61 , C12N15/52 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12P5/00 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种生产β‑榄香烯的酵母工程菌及其应用，涉及微生物制药领域。本发明可以高效生产β‑榄香烯，其摇瓶发酵产量接近300mg/L，lL发酵罐发酵产量最高可达1.8g/L，为目前报道最高产量。本发明利用毕赤酵母高效生成β‑榄香烯，具有周期短，环保和节约资源的特点。本发明高产β‑榄香烯的毕赤酵母工程菌具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN116144692A
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN202211513260.X
申请日：2022-11-24
Applicant: 浙江大学杭州国际科创中心
Abstract: 本发明公开了一种适用于罗尔斯通式菌基因组进化的系统、应用及基因组进化方法。本发明适用于罗尔斯通式菌基因组进化的系统包括用于将编码胞嘧啶脱氨酶的基因和编码特异性单链DNA结合蛋白的基因进行融合表达的表达载体。利用本发明建立的基因组进化方法，对罗尔斯通式菌基因组进行连续进化，在操作上具有简单、高效等优点；在功能上，能提高底物消耗速率、扩展底物谱、增强对有机试剂、氧化剂及电微生物系统等生长环境的耐受性，有助于后续的合成生物学改造。所以，使用本发明的基因组进化方法能够造成菌体性状和功能的多样性，根据工业生产要求，可对某一性状(如菌株鲁棒性和生物合成效率)进行连续筛选和定向进化。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116121093A
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202211598448.9
申请日：2022-12-12
Applicant: 浙江大学杭州国际科创中心
Abstract: 本发明公开了一种用于表达细胞色素P450的工程酵母菌株及其应用，属于生物工程技术领域。本发明构建的利用酿酒酵母MAGIC全基因组筛选文库以提高细胞色素P450表达的酿酒酵母平台菌株构建方法，利用包含甜菜黄素生物传感器酵母菌株和酿酒酵母MAGIC全基因组筛选gRNA文库，通过全基因组扰动和荧光耦合的高通量筛选，借助流式细胞术成功筛选酿酒酵母中能提高CYP76AD1表达的靶点基因。同时，将这些微环境改造靶点基因应用于提升其他P450酶的功能性表达，证明其通用性，说明该方法能有效建立一个平台工程酵母菌株，用于多种P450酶的高活性表达。
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公开(公告)号：CN116042425A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202211644975.9
申请日：2022-12-20
Applicant: 浙江大学杭州国际科创中心
Abstract: 本发明公开了一种生产广藿香醇的酵母工程菌及其应用，涉及微生物制药领域。本发明可以高效生产广藿香醇，其摇瓶发酵产量接近1.2mg/L，较出发菌株的产量提高了10倍。本发明利用毕赤酵母高效生成广藿香醇，具有周期短，环保和节约资源的特点。
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公开(公告)号：CN114574516A
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202210053387.1
申请日：2022-01-18
Applicant: 浙江大学杭州国际科创中心
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9的酵母基因组稳定整合方法。本发明通过筛选在酵母基因组中筛选到了17个稳定整合的位点，可以用于外源基因的稳定整合，特别是对于需要整个多个基因的化合物生物合成途径的整合，具有很好的效果。本发明开发的基于CRISPR/Cas9的酵母基因组稳定整合方法，能够实现外源基因的稳定整合，为外源基因在酵母体内的稳定组装提供了有力工具。
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公开(公告)号：CN114426929A
公开(公告)日：2022-05-03
申请号：CN202111597483.4
申请日：2021-12-24
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N1/19 , C12N15/81 , C12N15/90 , C12N15/60 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/62 , C12P17/18 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了一种发酵生产血根碱的酵母工程菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明所述工程菌异源表达多个血根碱合成途径相关基因，引入酪氨酸脱羧酶突变体TYDCY350F重写上游途径，解决限速步骤牛心果碱氧化酶BBE的功能性表达，实现了以微生物发酵碳源从头合成血根碱。相较于传统的植物提取，本发明不受气候地域限制，环境友好污染小，产量可达628mg/L，接近产业化需求。
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公开(公告)号：CN119736176A
公开(公告)日：2025-04-01
申请号：CN202411515367.7
申请日：2024-10-28
Applicant: 浙江新安化工集团股份有限公司 , 浙江大学杭州国际科创中心
Abstract: 本发明公开了一种增强异源蛋白分泌表达的酵母基因工程菌及其应用。本发明以酵母作为出发菌株，通过导入基因构建获得所述酵母基因工程菌，导入基因包括以下任意一组：(1)grpE基因；(2)groES基因；(3)groEL基因；(4)PDI1基因；(5)ERO1基因；(6)dnaJ基因；(7)tig基因；(8)dnaK基因。本发明首次将大肠杆菌中广泛使用的伴侣蛋白应用于毕赤酵母中，以显著提升异源蛋白的分泌表达效率。本发明选择毕赤酵母中难以表达的糖基转移酶EUGT11m作为模型蛋白，通过实验发现，当这些分子伴侣被引入毕赤酵母后，EUGT11m不仅实现了有效的分泌表达，而且通过酶活性检测确认了其功能性。
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