人乳头瘤病毒11E7蛋白表达及应用

    公开(公告)号:CN104059933A

    公开(公告)日:2014-09-24

    申请号:CN201410194989.4

    申请日:2014-05-11

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明提供一种人类乳头瘤病毒HPV-11E7蛋白的表达、纯化方法,通过设计HPV-11E7的扩增引物,并从HPV-11型全病毒质粒中有效扩增出该基因,插入到载体pGEX-4T2和pEGFP-C1中,获得重组载体,转染,收集上清与4B磁珠结合,再用凝血酶切除GST标签,获取HPV-11E7蛋白,行多点免疫,获得纯化的多克隆抗体。本发明增加了该蛋白原核表达时的可溶性,从而降低下游大规模生产成本以及分离纯化难度,在提高表达量的同时也有利于分离纯化,使该蛋白在工业化放大生产时降低难度,减少成本,并经纯化、免疫,得到高特异性、高效价比的多克隆抗体,能提高检测的准确率,为进一步研究治疗尖锐湿疣疾病奠定基础。

    实时荧光定量PCR检测表皮生长因子受体Ⅲ型突变体的试剂盒

    公开(公告)号:CN101130818A

    公开(公告)日:2008-02-27

    申请号:CN200710069872.3

    申请日:2007-07-03

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明涉及一种实时荧光定量PCR检测表皮生长因子受体III型突变体的试剂盒。试剂盒以逆转录mRNA样品得到的cDNA为模板,结合实时荧光PCR检测技术,主要用于定量测定表皮生长因子受体III型突变体mRNA在各种肿瘤组织中的表达水平。该试剂盒具有以下优点:1.准确性高:标准品质粒测定得出的标准曲线,可以精确了解某样本中所含模板的拷贝数。2.特异性高:荧光标记探针的引入可以大大提高扩增的特异性,而且标准品质粒经测序鉴定,使结果更为可信。3.高通量:高特异性探针的引入使扩增反应和鉴定过程一步完成,软件一次可输出多样本数据,大大提高了工作效率,也为大样本的测定提供了可能。

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