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公开(公告)号:CN106362164A
公开(公告)日:2017-02-01
申请号:CN201610842282.9
申请日:2016-09-22
Applicant: 河南科技大学
IPC: A61K48/00 , A61K31/713 , A61P7/00 , A61P37/06 , C12N15/113
CPC classification number: A61K31/713 , C12N15/1138 , C12N2310/14 , C12N2320/30
Abstract: 本发明公开了一种抑制小鼠B淋巴细胞CD86基因表达的siRNA及其应用,属于分子生物学技术领域。本发明根据小鼠B淋巴细胞CD86 mRNA序列设计并合成小分子干扰RNA(序列如SEQ ID NO:1~2所示),该CD86 siRNA能有效抑制小鼠WEHI-231细胞CD86 mRNA与CD86蛋白的表达,在干扰小鼠CD86基因表达后,囊素促小鼠WEHI-231细胞分泌型IgM(sIgM)抗体mRNA的表达水平显著降低,其在制备抗小鼠B淋巴细胞活化(或发育分化)的免疫抑制剂方面具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN104130312B
公开(公告)日:2016-07-13
申请号:CN201410215916.9
申请日:2014-05-21
Applicant: 河南科技大学
Abstract: 本发明公开了一种法氏囊活性五肽BP5特异性结合肽及其应用,属于蛋白质多肽技术领域。法氏囊活性五肽BP5特异性结合肽的氨基酸序列为:短肽1:PINMQTLNCMAA,短肽2:GCTLNPMSDLLG,短肽3:MSSTLNGMLNSL,三条短肽的保守序列为TLNXM。本发明筛选得到的结合肽能与法氏囊活性五肽BP5特异性结合,且在一定浓度下抑制BP5抗鸡DT40细胞增殖活性,在制备抑制法氏囊活性五肽BP5抗肿瘤细胞增殖的药物方面具有良好的应用前景,为BP5抑制剂的研究开发及应用奠定基础。
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公开(公告)号:CN102676471B
公开(公告)日:2015-01-21
申请号:CN201110426952.6
申请日:2011-12-17
Applicant: 河南科技大学
Abstract: 本发明涉及一种重组鸡白细胞介素18(Interleukin-18,IL-18)与新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶(hemagglutinin-neuraminidase,HN)融合蛋白(chIL-18-HN融合蛋白)的制备方法和应用。该融合蛋白为鸡IL-18(chIL-18)蛋白和新城疫病毒HN蛋白通过柔性Linker肽融合而成,编码该融合蛋白的DNA序列插入表达载体pPICZαA,电转化酵母菌X-33,获得高效表达重组chIL-18-HN融合蛋白的基因工程菌,通过液体培养、纯化制得的重组chIL-18-HN融合蛋白,该重组融合蛋白可作为新城疫新型基因工程疫苗,也可作为新城疫常规疫苗的新型免疫佐剂。本发明的chIL-18-HN融合蛋白经动物免疫实验证实,安全性好,无毒副作用,能够有效增强机体细胞免疫和体液免疫水平,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN104193804A
公开(公告)日:2014-12-10
申请号:CN201410361045.1
申请日:2014-07-25
Applicant: 河南科技大学
Abstract: 本发明公开了一种鸭坦布苏病毒囊膜E蛋白特异性结合肽及其应用,属于动物病毒分子生物学技术领域。本发明通过噬菌体随机12肽库筛选得到鸭坦布苏病毒囊膜E蛋白特异性结合肽,其氨基酸序列为:THRSWQGNSWYM。该特异性结合肽可抑制鸭坦布苏病毒HN1株在鸭胚成纤维细胞的增殖,在不同浓度下均能显著下调鸭坦布苏病毒在鸭胚成纤维细胞中的病毒拷贝数,同时显著降低鸭坦布苏病毒在鸭胚成纤维细胞中的病毒滴度,而其本身对鸭胚成纤维细胞的增殖无明显影响。鸭坦布苏病毒囊膜E蛋白特异性结合肽在制备抗鸭坦布苏病毒病的药物或饲料添加剂中具有良好的应用前景,可用于鸭坦布苏病毒病的防治。
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公开(公告)号:CN103145854B
公开(公告)日:2014-11-26
申请号:CN201310071097.0
申请日:2013-03-05
Applicant: 河南科技大学
Abstract: 本发明公开了重组Tβ4-BP5融合肽、基因、工程菌及应用。该重组融合肽为胸腺素β4和法氏囊五肽BP5通过柔性Linker融合而成。本发明将重组Tβ4-BP5融合肽基因插入表达载体,转化大肠杆菌,获得高效表达重组Tβ4-BP5融合肽的基因工程菌,通过液体培养、纯化制得的重组Tβ4-BP5融合肽,该融合肽经N端带有His标签的肠激酶去除硫氧还蛋白,再经亲和层析纯化,可获得单一的重组Tβ4-BP5融合肽。本发明的重组Tβ4-BP5融合肽可作为配合疫苗使用的新型多肽免疫佐剂,能够有效增强机体细胞免疫和体液免疫水平,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN104130312A
公开(公告)日:2014-11-05
申请号:CN201410215916.9
申请日:2014-05-21
Applicant: 河南科技大学
Abstract: 本发明公开了一种法氏囊活性五肽BP5特异性结合肽及其应用,属于蛋白质多肽技术领域。法氏囊活性五肽BP5特异性结合肽的氨基酸序列为:短肽1:PINMQTLNCMAA,短肽2:GCTLNPMSDLLG,短肽3:MSSTLNGMLNSL,三条短肽的保守序列为TLNXM。本发明筛选得到的结合肽能与法氏囊活性五肽BP5特异性结合,且在一定浓度下抑制BP5抗鸡DT40细胞增殖活性,在制备抑制法氏囊活性五肽BP5抗肿瘤细胞增殖的药物方面具有良好的应用前景,为BP5抑制剂的研究开发及应用奠定基础。
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公开(公告)号:CN103145853B
公开(公告)日:2014-06-11
申请号:CN201310069941.6
申请日:2013-03-05
Applicant: 河南科技大学
Abstract: 本发明公开了重组Tα1-BP5融合肽、基因、工程菌及应用。该重组融合肽为胸腺素α1和法氏囊五肽BP5通过柔性Linker融合而成。本发明将重组Tα1-BP5融合肽基因插入表达载体,转化大肠杆菌,获得高效表达重组Tα1-BP5融合肽的基因工程菌,通过液体培养、纯化制得的重组Tα1-BP5融合肽,该融合肽经N端带有His标签的肠激酶去除硫氧还蛋白,再经亲和层析纯化,可获得单一的重组Tα1-BP5融合肽。本发明的重组Tα1-BP5融合肽可作为配合疫苗使用的新型多肽免疫佐剂,能够有效增强机体细胞免疫和体液免疫水平,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN102550864B
公开(公告)日:2013-11-06
申请号:CN201210000741.0
申请日:2012-01-04
Applicant: 河南科技大学
Abstract: 一种抗禽流感的功能性饲料添加剂的制备方法,将人工合成H5N1亚型禽流感病毒血凝素基因的部分片段和真核表达载体pBI-221连接获得重组质粒,通过基因枪、电转化等转化方法将获得的重组质粒转化入杜氏藻细胞,使血凝素在杜氏藻细胞中表达,制备得到表达病毒蛋白亚单位的工程藻;将制备的工程藻细胞进行开放式扩大培养后,收集藻体,然后经低温干燥、制粒等加工工艺过程,得到一种抗禽流感的功能性饲料添加剂。本发明所制备的饲料添加剂应用于禽类养殖业具有抗禽流感的免疫保护作用,能够提高禽类机体的免疫力和生长速度,并且无任何毒副作用,生物安全性好。
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公开(公告)号:CN102690319A
公开(公告)日:2012-09-26
申请号:CN201110406602.3
申请日:2011-12-08
Applicant: 河南科技大学
IPC: C07K1/14
Abstract: 本发明涉及一种生物被膜状态下猪链球菌总蛋白的提取方法,包括以下步骤:(1)对处于生物被膜状态下猪链球菌的处理;(2)步骤(1)得到的清洗的菌体细胞以蔗糖缓冲液重悬,每毫升缓冲液中添加变溶菌素,在36.5—37.5℃的温度下孵育;(3)离心8—15min收集处于原生质体的细胞,以超声缓冲液重悬细胞,加入蛋白酶抑制剂,冰浴中超声破碎共60-100个循环;(4)随后在15-32℃的温度下孵育10-60min;(5)蛋白上清液加入5-15%TCA后冰浴;用预冷的丙酮洗蛋白,离心收集总蛋白,室温条件下干燥收集到的总蛋白,即获得所述细菌总蛋白。本发明的方法可广泛应用于各种处于生物被膜状态下细菌总蛋白的提取,特别是对于细菌生物被膜状态下细菌蛋白组学研究中,应用前景广阔。
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公开(公告)号:CN102676483A
公开(公告)日:2012-09-19
申请号:CN201210011427.2
申请日:2012-01-15
Applicant: 河南科技大学
Abstract: 本发明涉及一种一菌多酶菌株产蛋白酶的方法,包括以下步骤:将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)1.1111,保藏于中国典型培养物保藏中心,其保藏号为CCTCC NO:M 2011286刺种在酪蛋白琼脂培养基上,在37℃温箱中培养24h,发现有水解圈产生,而且水解圈与菌落直径的可达4.80。本发明通过Folin酚测定酶活法测定其最优酶活条件为:在培养基初始pH值7.0,接种量为3%,种龄22h,培养温度37℃,发酵时间24h时,所产生的蛋白酶酶活达到最高。同时,通过Folin酚测定酶活法对影响蛋白酶酶活的温度、pH、热稳定性以及金属离子等因素进行了研究。结果表明该菌株所产蛋白酶最适作用温度为40℃,最适作用pH为5.7,Mn2+和Cu2+对酶有一定的促进作用,Al3+对酶有强烈的抑制作用。本发明为进一步探索各酶相关影响因素、最适的培养基配制、最适的发酵条件、最佳的复合酶配伍,以期实现一菌多酶高质、高量的共同发酵生产奠定基础。
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