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公开(公告)号:CN112391388B
公开(公告)日:2022-06-10
申请号:CN202011357252.1
申请日:2020-11-27
Applicant: 河北农业大学
IPC: C12N15/115 , C12N15/10 , A61K31/7088 , A61P31/14 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种可特异性结合猪流行性腹泻病毒的核酸适配体及其用途,属于分子免疫领域。本发明利用SELEX技术,以猪流行性腹泻病毒(PEDV)作为结合抗原从核酸文库中筛选出核酸序列重复率较高的6条核酸适配体,后续通过适配体亲和力测定、适配体特异性检测、平衡解离常数Kd值测定等鉴定出两条结合力最高、特异性良好的核酸适配体,其核心序列分别如SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示。本发明筛选和制备的猪流行性腹泻病毒(PED virus,PEDV)特异性核酸适配体具有极好的特异性和亲和力,为PEDV抗原检测技术的进一步研究提供了重要技术支撑。
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公开(公告)号:CN108676922A
公开(公告)日:2018-10-19
申请号:CN201810792753.9
申请日:2018-07-18
Applicant: 河北农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6851 , C12Q2561/101 , C12Q2563/107 , C12Q2545/113
Abstract: 本发明涉及分子诊断技术领域,具体公开一种用于检测猪流行性腹泻病毒野毒株的引物和探针及TaqMan实时荧光定量PCR方法。所述引物和探针序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示,其能特异性检测猪流行性腹泻病毒的野毒株。本发明TaqMan实时荧光定量PCR方法利用所述引物和探针对样品进行扩增,若Cq≤36,则判定为阳性,即样品为猪流行性腹泻病毒的野毒株。该方法特异性强,敏感性高,重复性好,临床检出率高,为PED的快速检测与防治提供重要技术手段。
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公开(公告)号:CN107011417A
公开(公告)日:2017-08-04
申请号:CN201710234819.8
申请日:2017-04-12
Applicant: 河北农业大学
IPC: C07K14/165 , C12N15/50 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供了一种重组蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了一种如SEQ ID No.2所示的基因。本发明还提供了一种如上所述的蛋白在检测猪流行性腹泻病毒抗体中的应用,主要是作为包被抗原使用。本发明还提供了一种检测猪流行性腹泻病毒抗体的试剂盒,包括:如上所述的重组蛋白、包被液、洗涤液、封闭液、稀释液、辣根过氧化物酶标记的羊抗猪IgG和底物显色液。本发明以SEQ ID No.1所示的重组蛋白作为包被抗原,采用间接ELISA检测猪流行性腹泻病毒抗体,具有较好的特异性、敏感性及重复性,结果直观准确。
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公开(公告)号:CN105177179A
公开(公告)日:2015-12-23
申请号:CN201510488081.9
申请日:2015-08-11
Applicant: 河北农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2600/166 , C12Q2531/119 , C12Q2521/107 , C12Q2547/101 , C12Q2545/101
Abstract: 本发明公开了一种用于猪流行性腹泻病毒检测的RT-LAMP引物组、试剂盒及其应用。所述引物组由一对外引物、一对内引物和一对环引物组成,所述外引物对序列为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示,所述内引物对序列为SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示,所述环引物对序列为SEQ ID No.5和SEQ ID No.6,可有效检测猪流行性腹泻病毒。该试剂盒包括前述引物,可用于检测猪流行性腹泻病毒。本发明还提供了一种采用前述试剂盒进行猪流行性腹泻病毒检测的方法,其检测结果可直观地根据反应液颜色变化判断,快速准确。本发明具有检测猪流行性腹泻病毒特异性强、敏感性高、快速准确的特点,尤其适用于现场快速检测。
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公开(公告)号:CN103387992A
公开(公告)日:2013-11-13
申请号:CN201310315778.7
申请日:2013-07-25
Applicant: 河北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种编码重组猪β-防御素-1的基因,并设计引物扩增猪β-防御素-1的前体基因序列;还公开了重组猪β-防御素-1的制备方法,包括(1)重组质粒pGM-T-PBD-1的构建;(2)猪β-防御素-1成熟肽基因表达载体的构建;(3)重组猪β-防御素-1的体外诱导表达。本发明采用原核表达,蛋白表达量高,步骤简单,操作简便,蛋白易于纯化,成本低,重组猪β-防御素-1具有较强的抗菌活性。
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公开(公告)号:CN119192372A
公开(公告)日:2024-12-27
申请号:CN202411550505.5
申请日:2024-11-01
Applicant: 河北农业大学
Abstract: 本发明提供了一种猪IL‑15单克隆抗体及其制备方法和应用,涉及免疫学检测技术领域。本发明采用保藏编号为CCTCC NO:C2024127的杂交瘤细胞株制备了猪IL‑15单克隆抗体,通过该抗体建立了一种用于定量检测生物样品中猪IL‑15含量的双抗体夹心ELISA检测方法,该方法具有较高的灵敏度、特异性和准确性,为猪IL‑15相关研究提供了重要工具,具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN118652324A
公开(公告)日:2024-09-17
申请号:CN202410526723.9
申请日:2024-04-29
Applicant: 河北农业大学
IPC: C07K16/08 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明属于病原或病原微生物检测技术领域,具体涉及一种特异性结合ASFV的CD2v蛋白的单克隆抗体及其在ASF诊断和鉴别ASFV强毒株与CD2v基因缺失弱毒株中的应用。该单克隆抗体序列如SEQ ID NO:1所示,其对猪流行性腹泻病毒(PEDV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)等阳性样品进行测试,结果显示,除了与ASFV的CD2v蛋白检测结果为阳性外,其他病毒样品检测结果均为阴性,无交叉反应,特异性好。
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公开(公告)号:CN116769019B
公开(公告)日:2023-12-15
申请号:CN202310221282.7
申请日:2023-03-09
Applicant: 河北农业大学
IPC: C07K16/08 , C07K14/01 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于微生物检测技术领域,具体涉及一种ASFVp30蛋白单克隆抗体及其应用。该ASFVp30蛋白单克隆抗体其能够识别p30蛋白抗原表位的115aa‑134aa。基于该ASFVp30蛋白单克隆抗体建立的阻断ELISA方法对非洲猪瘟病毒抗体进行检测时,与CSFV、PRRSV及PRV等抗体均无交叉反应;最低能检出1∶512倍稀释的阳性血清特异性抗体;批内和批间重复性试验的平均变异系数分别为4.116%和5.187%;与商品试剂盒的阳性符合率92.31%,阴性符合率92.38%,总符合率为92.36%。
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公开(公告)号:CN110894216B
公开(公告)日:2022-03-08
申请号:CN201911149815.5
申请日:2019-11-21
Applicant: 河北农业大学
IPC: C07K14/165 , C07K16/10 , C07K19/00 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及细胞工程及免疫学技术领域,具体公开一种猪流行性腹泻病毒抗原表位肽、单克隆抗体及应用。所述抗原包含SEQ ID No.1所示的表位多肽,采用杂交瘤细胞技术制备与该抗原对应的单克隆抗体。本发明提供的单克隆抗体能够与PEDV重组S蛋白和PEDV特异性结合,该单克隆抗体可以有效鉴别PEDV变异毒株与经典毒株。
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公开(公告)号:CN112391388A
公开(公告)日:2021-02-23
申请号:CN202011357252.1
申请日:2020-11-27
Applicant: 河北农业大学
IPC: C12N15/115 , C12N15/10 , A61K31/7088 , A61P31/14 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种可特异性结合猪流行性腹泻病毒的核酸适配体及其用途,属于分子免疫领域。本发明利用SELEX技术,以猪流行性腹泻病毒(PEDV)作为结合抗原从核酸文库中筛选出核酸序列重复率较高的6条核酸适配体,后续通过适配体亲和力测定、适配体特异性检测、平衡解离常数Kd值测定等鉴定出两条结合力最高、特异性良好的核酸适配体,其核心序列分别如SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示。本发明筛选和制备的猪流行性腹泻病毒(PED virus,PEDV)特异性核酸适配体具有极好的特异性和亲和力,为PEDV抗原检测技术的进一步研究提供了重要技术支撑。
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