一种提高乳酰-N-四糖产量的基因工程菌及其生产方法

    公开(公告)号:CN113684163B

    公开(公告)日:2023-07-25

    申请号:CN202110891714.6

    申请日:2021-08-04

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高乳酰‑N‑四糖产量的基因工程菌及其生产方法,属于代谢工程和食品发酵技术领域。本发明通过lgtA和wbgO的外源表达,组合调控乳酰‑N‑四糖合成途径中galE,galT和galK的表达并敲除大肠杆菌宿主乳酰‑N‑四糖合成途径中的lacZ表达,以及对发酵培养基的半乳糖和IPTG添加量进行优化,从而达到提高乳酰‑N‑四糖产量的目的,在摇瓶实验中,大肠杆菌生产乳酰‑N‑四糖的能力由0.22g/L提升至4.00g/L,在3L发酵罐中,乳酰‑N‑四糖的产量达到19.80g/L,为乳酰‑N‑四糖的工业化生产奠定了基础。

    一类基于ZZ domain的二抗及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110078832B

    公开(公告)日:2021-12-14

    申请号:CN201910314766.X

    申请日:2019-04-18

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一类基于ZZ domain的二抗及其制备方法和应用,属于抗体技术领域。该二抗,具备两种功能域,分别行使结合IgG抗体的功能和报告基团功能;其中,行使结合IgG抗体功能的域,为衍生于金黄色葡萄球菌Protein A的ZZ domain,且可以结合多种来源的IgG;行使报告基团的域,是具备催化功能的酶或具备发光功能的蛋白。具备两种功能域,分别行驶结合IgG抗体(一抗)和报告基团功能。本发明的二抗为融合蛋白,融合表达后其IgG抗体的结合能力和报告基团功能的发挥均不受影响。该二抗可以结合多种物种的IgG一抗,例如可以结合小鼠源、大鼠源、人源、兔源等IgG。

    一种提高乳酰-N-岩藻五糖产量的基因工程菌及其生产方法

    公开(公告)号:CN113832092B

    公开(公告)日:2023-10-03

    申请号:CN202111222784.9

    申请日:2021-10-20

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高乳酰‑N‑岩藻五糖产量的基因工程菌及其生产方法,属于生物技术和食品发酵工程领域。本发明通过外源基因lgtA,wbgO和futC的表达和大肠杆菌内源基因galE,galT,galK,manB,manC,gmd和wcaG的过表达,从而构建出乳酰‑N‑岩藻五糖的从头合成路径,以及敲除大肠杆菌宿主乳酰‑N‑岩藻五糖合成途径中旁支路径的lacZ和wcaJ表达,从而提高乳酰‑N‑岩藻五糖产量。在摇瓶发酵中,乳酰‑N‑岩藻五糖的产量达到1.99g/L,在3L发酵罐中,乳酰‑N‑岩藻五糖的产量达到16.8g/L,成功打造更高效的生产菌株,为乳酰‑N‑岩藻五糖的工业化生产奠定了基础。

    一种产岩藻糖基乳糖的基因工程菌及生产方法

    公开(公告)号:CN114480240A

    公开(公告)日:2022-05-13

    申请号:CN202210184191.6

    申请日:2022-02-22

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种产岩藻糖基乳糖的基因工程菌及生产方法,属于代谢工程和食品发酵技术。本发明利用合成生物学手段,基于从头合成途径构建岩藻糖基乳糖的大肠杆菌细胞工厂,采用CRISPR/Cas9基因编辑技术对宿主细胞中的旁路相关基因lacZ、wcaJ、nudD、pfkA、lon进行敲除,通过多质粒表达系统进行基因manB、manC、gmd和wcaG的组装,构建不同拷贝数的表达载体以增加关键基因的表达水平;并筛选不同来源的岩藻糖基转移酶提高限速酶的活力。构建得到的重组大肠杆菌可以利用甘油合成2’‑岩藻糖基乳糖和3‑岩藻糖基乳糖,遗传稳定,表达水平高,具有明显的工业化生产潜力。

    一种提高乳酰-N-四糖产量的基因工程菌及其生产方法

    公开(公告)号:CN113684163A

    公开(公告)日:2021-11-23

    申请号:CN202110891714.6

    申请日:2021-08-04

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高乳酰‑N‑四糖产量的基因工程菌及其生产方法,属于代谢工程和食品发酵技术领域。本发明通过lgtA和wbgO的外源表达,组合调控乳酰‑N‑四糖合成途径中galE,galT和galK的表达并敲除大肠杆菌宿主乳酰‑N‑四糖合成途径中的lacZ表达,以及对发酵培养基的半乳糖和IPTG添加量进行优化,从而达到提高乳酰‑N‑四糖产量的目的,在摇瓶实验中,大肠杆菌生产乳酰‑N‑四糖的能力由0.22g/L提升至4.00g/L,在3L发酵罐中,乳酰‑N‑四糖的产量达到19.80g/L,为乳酰‑N‑四糖的工业化生产奠定了基础。

    一类基于ZZ domain的广谱二抗及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110078832A

    公开(公告)日:2019-08-02

    申请号:CN201910314766.X

    申请日:2019-04-18

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一类基于ZZ domain的广谱二抗及其制备方法和应用,属于抗体技术领域。该广谱二抗,具备两种功能域,分别行使结合IgG抗体的功能和报告基团功能;其中,行使结合IgG抗体功能的域,为衍生于金黄色葡萄球菌Protein A的ZZ domain,且可以结合多种来源的IgG;行使报告基团的域,是具备催化功能的酶或具备发光功能的蛋白。具备两种功能域,分别行驶结合IgG抗体(一抗)和报告基团功能。本发明的广谱二抗为融合蛋白,融合表达后其IgG抗体的结合能力和报告基团功能的发挥均不受影响。该广谱二抗可以结合多种物种的IgG一抗,例如可以结合小鼠源、大鼠源、人源、兔源等IgG。

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