提高目的片段与psiCHECK2载体连接效率的方法

    公开(公告)号:CN113736791B

    公开(公告)日:2024-01-26

    申请号:CN202111161574.3

    申请日:2021-09-30

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提出了一种提高目的片段与psiCHECK2载体连接效率的方法,该方法以牛基因组DNA为模板,利用载体同源序列引物替换传统引物中的保护碱基序列,通过PCR扩增目的片段,将PCR扩增产物与psiCHECK2载体连接后导入感受态细胞,判断目的片段与psiCHECK2载体的载体连接效率。本发明的同源片段实验组的连接效率要比常规引物实验组和细菌内源性同源重实验组效率高,但该方法并不是基于同源重组原理,而是通过改变保护碱基的长度(本发明中采用的是载体同源序列)提高双酶切效率达到改善重组效率的目的。本发明可为其他载体构建提供技术依据。

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