公开(公告)号：CN112342301B

公开(公告)日：2023-11-24

申请号：CN202011259217.6

申请日：2020-11-12

Applicant: 扬州大学

Inventor： 孙伟 ,  曹修凯 ,  袁泽湖 ,  王善禾 ,  王珊

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提出了一种检测湖羊NSMF基因CNV标记的方法及其应用，所述的CNV标记是指湖羊NSMF基因候选区域chr3:545787‑597706内的拷贝数变异，以湖羊基因组DNA为模板，以正常双拷贝基因ANKRD1为内参基因，通过荧光定量PCR分别扩增湖羊NSMF基因和内参基因部分片段，根据2*2−ΔCt定量结果将湖羊个体划分为增加型、缺失型和正常型。本发明在DNA水平上检测与湖羊体长性状密切相关的CNV标记，并应用于湖羊生长性状的分子标记辅助选择，从而加快湖羊遗传选育进程。

公开(公告)号：CN113736791A

公开(公告)日：2021-12-03

申请号：CN202111161574.3

申请日：2021-09-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 孙伟 ,  曹修凯 ,  王珊 ,  袁泽湖 ,  王善禾

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明提出了一种提高目的片段与psiCHECK2载体连接效率的方法，该方法以牛基因组DNA为模板，利用载体同源序列引物替换传统引物中的保护碱基序列，通过PCR扩增目的片段，将PCR扩增产物与psiCHECK2载体连接后导入感受态细胞，判断目的片段与psiCHECK2载体的载体连接效率。本发明的同源片段实验组的连接效率要比常规引物实验组和细菌内源性同源重实验组效率高，但该方法并不是基于同源重组原理，而是通过改变保护碱基的长度（本发明中采用的是载体同源序列）提高双酶切效率达到改善重组效率的目的。本发明可为其他载体构建提供技术依据。

公开(公告)号：CN112080568A

公开(公告)日：2020-12-15

申请号：CN202011031224.0

申请日：2020-09-27

Applicant: 扬州大学

Inventor： 孙伟 ,  张卫博 ,  王善禾 ,  王利宏 ,  苏锐 ,  曹修凯

IPC: C12Q1/6888 ,  C12N15/113 ,  C12N15/11 ,  A01K67/02

Abstract: 本发明提出了一种与湖羊肌肉细胞增殖相关的miRNA标志物及其检测引物和应用，所述的miRNA标志物为miRNA‑29a，其序列为SEQ ID NO.2。本发明通过生物信息学预测靶向YAP1的miRNA，再利用双荧光素酶报告系统、RT‑qPCR、CCK‑8以及Western blot技术进一步验证了miRNA‑29a在湖羊肌肉细胞增殖过程中表达起显著下调作用，提出的miRNA‑29a可作为生物标志物应用于鉴定湖羊肌肉细胞的增殖。