一种用于检测牛羊布鲁氏菌感染ELIspot试剂盒

    公开(公告)号:CN118443936A

    公开(公告)日:2024-08-06

    申请号:CN202410668098.1

    申请日:2024-05-28

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测牛羊布鲁氏菌感染的ELISpot试剂盒及其在牛羊布鲁氏菌感染领域的应用。所述检测试剂盒中包括:支持介质、捕获抗体、检测抗体、阴性对照和阳性对照、特异性刺激剂,特异性刺激剂为布鲁氏菌纯蛋白变应原Br‑PPA。本发明试剂盒中所采用的由杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体具有效价高、特异性好、与天然抗原亲和力强的优势;与布鲁氏菌试管凝集试验(SAT)、虎红平板凝集试验(RBT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法相比,能够更早地检测出牛羊布鲁氏菌感染,检测结果更为客观、准确,能更真实的反应机体细胞免疫状态,以改进现行布鲁氏菌感染的抗体检测方法中存在的准确率低、周期长、假阳性等缺点。

    一种用于检测牛布鲁菌病的ELISPOT检测试剂盒

    公开(公告)号:CN105759054B

    公开(公告)日:2017-10-20

    申请号:CN201610201618.3

    申请日:2016-03-31

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种用于检测牛布鲁菌病ELISPOT检测试剂盒,该ELISPOT检测试剂盒包括:支持介质、捕获抗体、检测抗体、阴性对照和阳性对照、特异性刺激剂,其中,该捕获抗体为第一牛γ干扰素单克隆抗体,该检测抗体为经过标记的第二牛γ干扰素单克隆抗体,特异性刺激剂为布鲁菌素Br‑PPD,其中,所述支持介质与试剂接触面上有微孔滤膜;该捕获抗体包被在支持介质上或该捕获抗体与支持介质分别放置;以及该捕获抗体与该检测抗体能与牛γ干扰素共同发生抗原抗体结合作用。本发明试剂盒中所采用的由杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体具有效价高、特异性好、与天然抗原亲和力强的优势;与布鲁菌抗体ELISA检测试剂盒相比,能够实现牛布鲁菌感染的早期检测,排除了交叉反应带来的假阳性的干扰,显示了良好的特异性。

    一种用于牛结核病诊断的真核表达CFP10-ESAT-6融合蛋白

    公开(公告)号:CN103204945A

    公开(公告)日:2013-07-17

    申请号:CN201310161803.0

    申请日:2013-05-03

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种用于牛结核病诊断的真核表达CFP10-ESAT-6融合蛋白,并将其应用于牛结核病的临床诊断。通过PCR扩增获得cfp10-esat6融合基因,构建重组质粒pPICZαA-(cfp10-esat6),转入毕赤酵母菌GS115,经甲醇诱导和亲和层析获得高纯度的CFP10-ESAT-6融合蛋白。将其作为刺激原用于牛结核病诊断的皮内变态反应和抗原特异的牛IFN-γ试验,前者与比较变态反应结果相比具有47.4%敏感性和83.3%特异性,后者与牛IFN-γ试剂盒的阳性和阴性符合率分别为82.8%和87.4%,显示其较好的牛结核病诊断价值。

    一种用于检测牛结核病的ELISpot检测试剂盒

    公开(公告)号:CN109061166B

    公开(公告)日:2021-02-12

    申请号:CN201810614743.6

    申请日:2018-06-14

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种用于检测牛结核病的ELISpot检测试剂盒及其在牛结核病诊断领域的应用。所述检测试剂盒中包括支持介质、捕获抗体、检测抗体,所述捕获抗体可由保藏号为CCTCC NO:C2017283的杂交瘤细胞株或其传代细胞株分泌产生,所述检测抗体为与所述捕获抗体不同的γ干扰素单克隆抗体。本发明试剂盒与牛结核病BOVIGAM®ELISA检测试剂盒、牛结核病抗体检测试剂相比,能够实现牛分枝杆菌感染的更灵敏、高特异性检测,排除了交叉反应带来的假阳性干扰,显示了良好的应用前景。

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