一种猪繁殖与呼吸综合征病毒纯化方法

    公开(公告)号:CN108220254A

    公开(公告)日:2018-06-29

    申请号:CN201810088968.2

    申请日:2018-01-30

    Inventor: 周昕 袁嘉晟

    Abstract: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒纯化方法,该方法包括病毒离心初步纯化、PEG6000沉淀法二级纯化、和透析袋透析纯化等步骤。该方法对PEG6000的浓度,沉淀时间,离心力进行优化,最大限度地提高病毒的回收率,以该方法纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒可以满足基本的实验室研究以及疫苗制备需求,相较于现有技术,以本发明制备的产品具有病毒滴度高,完整性好,背景清晰的优点,加之工艺简便,成本较低,因此有很好的推广前景。

    M13噬菌体纳米探针及其制备方法

    公开(公告)号:CN113308484A

    公开(公告)日:2021-08-27

    申请号:CN202110502844.6

    申请日:2021-05-08

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了噬菌体纳米探针及其制备方法,噬菌体纳米探针为M13噬菌体衍生物,先将亲和病毒的多肽展示在辅助噬菌体M13KO7的P3蛋白N端、亲和纳米粒子的多肽展示在P8蛋白N端,然后用改造后的辅助噬菌体M13KO7感染含有复制起始点ori(+)和包装信号的噬菌粒菌液,使改造后的辅助噬菌体M13KO7包装噬菌粒,组装成50‑100nm长的、用于病毒检测的噬菌体纳米探针。本发明制备的产品具有特异性高,灵敏度好,生物安全性高,可实现病毒可视化检测应用领域广泛等特点,加之工艺简便,成本较低,既可通过肉眼观测结果,又能利用生物传感器产生电化学信号,因此有很好的推广前景。

    一种基于金纳米探针鉴定单个肺炎衣原体的方法

    公开(公告)号:CN108226495B

    公开(公告)日:2021-03-09

    申请号:CN201810054094.9

    申请日:2018-01-19

    Applicant: 扬州大学

    Inventor: 周昕 邸涛

    Abstract: 本发明公开了一种基于金纳米探针鉴定单个肺炎衣原体的方法,该方法是用商品化蛋白A包被的金纳米颗粒与商品化肺炎衣原体抗体结合构建金探针,并与检测样本中肺炎衣原体孵育,利用暗场显微镜肉眼直接观察。本发明构建了结合肺炎衣原体的金探针,建立了肺炎衣原体快速检测体系。基于金探针的暗场显微镜肉眼观察方法具有简便、快速,无需特殊设备等特点,可用于实地现场鉴定样品中是否含有肺炎衣原体。

    磁性介孔二氧化硅纳米粒子探针及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110196324B

    公开(公告)日:2020-09-29

    申请号:CN201910475019.4

    申请日:2019-05-31

    Applicant: 扬州大学

    Inventor: 周昕 李真真

    Abstract: 本发明公开了磁性介孔二氧化硅纳米粒子探针,所述磁性介孔二氧化硅纳米粒子探针为先将磁性介孔二氧化硅纳米颗粒装载过氧化物酶得到M‑MSN/POD,再将聚乙烯亚胺包裹M‑MSN/POD封装过氧化物酶得到M‑MSN/POD/PEI纳米粒子,再和抗体混合形成磁性介孔二氧化硅纳米粒子探针。本发明还公开了磁性介孔二氧化硅纳米粒子探针的制备方法。该探针可以用于细胞靶向性的特异性检测,病毒的可视化检测,制备超灵敏的检测试纸条,相较于现有技术,以本发明制备的产品具有特异性高,稳定性好,应用领域广泛等特点,加之工艺简便,成本较低,因此有很好的推广前景。

    磁性介孔二氧化硅纳米粒子探针及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110196324A

    公开(公告)日:2019-09-03

    申请号:CN201910475019.4

    申请日:2019-05-31

    Applicant: 扬州大学

    Inventor: 周昕 李真真

    Abstract: 本发明公开了磁性介孔二氧化硅纳米粒子探针,所述磁性介孔二氧化硅纳米粒子探针为先将磁性介孔二氧化硅纳米颗粒装载过氧化物酶得到M-MSN/POD,再将聚乙烯亚胺包裹M-MSN/POD封装过氧化物酶得到M-MSN/POD/PEI纳米粒子,再和抗体混合形成磁性介孔二氧化硅纳米粒子探针。本发明还公开了磁性介孔二氧化硅纳米粒子探针的制备方法。该探针可以用于细胞靶向性的特异性检测,病毒的可视化检测,制备超灵敏的检测试纸条,相较于现有技术,以本发明制备的产品具有特异性高,稳定性好,应用领域广泛等特点,加之工艺简便,成本较低,因此有很好的推广前景。

    一种核酸抗体修饰的免疫金探针及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN109975540A

    公开(公告)日:2019-07-05

    申请号:CN201910268840.9

    申请日:2019-04-04

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种核酸抗体修饰的免疫金探针及其制备方法和应用。该方法综合使用了点击化学技术和寡核苷酸标记纳米金颗粒技术等一系列工艺,对抗体与DNA的偶联条件,标记寡核苷酸的纳米金颗粒的制备条件进行优化,最大限度地提高标记在纳米金颗粒上的寡核苷酸的稳定性和密度以及结合在纳米金颗粒上的抗体数量,以该方法制备的新型金纳米探针可以用于具有细胞靶向性的特异性检测,病毒的可视化检测,制备超灵敏的检测试纸条,相较于现有技术,以本发明制备的产品具有特异性高,稳定性好,应用领域广泛等特点,加之工艺简便,成本较低,因此有很好的推广前景。

    一种M13噬菌体纳米疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN119386171A

    公开(公告)日:2025-02-07

    申请号:CN202411509198.6

    申请日:2024-10-28

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种M13噬菌体纳米疫苗及其制备方法,所述M13噬菌体纳米疫苗是先将树突状细胞靶向肽展示在M13噬菌体pⅢ蛋白N端,再对pⅧ蛋白上的缬氨酸进行半胱氨酸突变,并对其生物素化,从而使M13噬菌体的pⅧ蛋白可以展示病毒抗原分子簇。本发明的M13噬菌体纳米疫苗在M13噬菌体的pⅧ蛋白偶联多个抗原分子簇,成功突破了野生型M13噬菌体的pⅧ蛋白上无法展示具有构象的蛋白质的限制,解决了传统氨基修饰方法的不确定性,使病毒抗原分子能够有序成簇展示于M13噬菌体的周身;最终组装的M13噬菌体疫苗可同时展示3~5个DC靶向肽和约1200个抗原拷贝,并且能够适用于所有的病毒抗原的负载,具有通用型疫苗的应用潜力。

    M13噬菌体纳米探针及其制备方法

    公开(公告)号:CN113308484B

    公开(公告)日:2023-09-22

    申请号:CN202110502844.6

    申请日:2021-05-08

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了噬菌体纳米探针及其制备方法,噬菌体纳米探针为M13噬菌体衍生物,先将亲和病毒的多肽展示在辅助噬菌体M13KO7的P3蛋白N端、亲和纳米粒子的多肽展示在P8蛋白N端,然后用改造后的辅助噬菌体M13KO7感染含有复制起始点ori(+)和包装信号的噬菌粒菌液,使改造后的辅助噬菌体M13KO7包装噬菌粒,组装成50‑100nm长的、用于病毒检测的噬菌体纳米探针。本发明制备的产品具有特异性高,灵敏度好,生物安全性高,可实现病毒可视化检测应用领域广泛等特点,加之工艺简便,成本较低,既可通过肉眼观测结果,又能利用生物传感器产生电化学信号,因此有很好的推广前景。

    基于深度学习分析暗场显微镜中纳米探针捕获病毒的方法

    公开(公告)号:CN112597797B

    公开(公告)日:2021-08-31

    申请号:CN202011297415.1

    申请日:2020-11-18

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了基于深度学习分析暗场显微镜中纳米探针捕获病毒的方法,包括如下步骤:(1)基于Opencv的金纳米探针提取和去噪模型设计;(2)ResNet50为纳米探针夹心结构判定的模型设计;(3)使用训练好的基于ResNet50的夹心结构分辨模型和基于Opencv的金纳米颗粒提取去噪模型对暗场显微镜成像原图进行实时分析和判断。该方法基于OpenCV的金纳米探针提取模型有效地去除背景的干扰,基于ResNet50的夹心结构判定模型正确识别金、银双纳米探针与病毒结合形成的“银纳米探针@病毒@金纳米探针”夹心结构,从而保证纳米探针捕获病毒后在暗场中计数的效率和准确性,使以纳米颗粒为信号探针,以暗场显微镜为平台的靶标分子和微生物检测中具备真正的应用价值。

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