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公开(公告)号：CN112899378B
公开(公告)日：2022-05-20
申请号：CN202011610680.0
申请日：2020-12-30
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) , 广东环凯生物科技有限公司
Inventor： 曾海燕 , 吴清平 , 张菊梅 , 丁郁 , 陈谋通 , 薛亮 , 王涓 , 叶青华 , 吴诗 , 陈惠元 , 雷涛 , 古其会 , 杨小鹃 , 张淑红 , 卢勉飞 , 蔡芷荷 , 徐环 , 李程思 , 陈鲁
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及4株具有我国自主知识产权的、符合国内传播规律的克罗诺杆菌标准菌株，其保藏号分别为GDMCC 60861、GDMCC 60862、GDMCC 60863、GDMCC 60864。4株标准菌株具有典型的生理生化特征，且样品来源、遗传背景、耐药性等信息清晰，可用作食品、药品、临床检验等不同领域的标准参考菌株。本发明还涉及一组用于检测、鉴别上述4株标准菌株的特异性靶标基因以及对应的PCR产物。最后，本发明还提供了一种存活率高、特异性强的克罗诺杆菌冻干保护剂，可用于长期储存本发明标准菌株。
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公开(公告)号：CN102532053B
公开(公告)日：2014-08-06
申请号：CN201110459845.3
申请日：2011-12-30
Applicant: 广东省微生物研究所 , 广东环凯微生物科技有限公司
IPC: C07D277/62 , C09K11/06
Abstract: 本发明公开了一种高纯度D-荧光素的制备和纯化方法。本发明的制备方法是在充氮气的条件下，2-氰基-6-羟基苯并噻唑与D-半胱氨酸在碱性条件下进行缩合反应，反应完毕后在充氮气的条件下用有一定极性的非水溶性有机溶剂进行萃取，萃取后的水相用盐酸进行酸化，分离沉淀物，沉淀物用溶水性有机溶剂进行洗涤，离心去上清，沉淀物真空干燥，即获得高纯度D-荧光素产品。利用本发明的高纯度D-荧光素的制备方法，可以获得高纯度的D-荧光素产品，并且其D-荧光素的发光比活力较高，得率也高，如果用原料脱甲基产物2-氰基-6-羟基苯并噻唑的纯度(M176≥85％)时，其制备的高纯度的D-荧光素产品的纯度可达90％(HPLC，％Wt)以上，发光比活力达到甚至高于Sigma L9504D-荧光素。
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公开(公告)号：CN1876829A
公开(公告)日：2006-12-13
申请号：CN200610034385.9
申请日：2006-03-17
Applicant: 广东省微生物研究所 , 广东环凯微生物科技有限公司
Abstract: 本发明涉及一种利用ATP生物发光法进行微生物数量快速检测的方法及检测试剂盒，快速检测试剂盒包括荧光素酶及其保护剂、D－荧光素、标准ATP、发光检测缓冲液、非细胞ATP去除剂、微生物细胞ATP抽提剂等试剂。应用该检测试剂盒进行微生物数量快速测定的标准方法是通过在选定的生物发光仪和选定的系统中做ATP标准曲线，取对数后得到线性回归方程，将经过非目的ATP去除和微生物ATP抽提的样品液，在同样的仪器和系统中用同一批酶进行ATP生物发光检测，同时做空白对照，得到样品和空白的CPM或RLU值，去除空白后的净相对发光值取对数后，通过建立的回归方程得到样品的ATP浓度，根据细菌、酵母、霉菌和单细胞微藻等微生物的ATP含量可换算成细菌、酵母、霉菌孢子或单细胞微藻的细胞数，或只计相当于细菌数量。
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公开(公告)号：CN102532053A
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201110459845.3
申请日：2011-12-30
Applicant: 广东省微生物研究所 , 广东环凯微生物科技有限公司
IPC: C07D277/62 , C09K11/06
Abstract: 本发明公开了一种高纯度D-荧光素的制备和纯化方法。本发明的制备方法是在充氮气的条件下，2-氰基-6-羟基苯并噻唑与D-半胱氨酸在碱性条件下进行缩合反应，反应完毕后在充氮气的条件下用有一定极性的非水溶性有机溶剂进行萃取，萃取后的水相用盐酸进行酸化，分离沉淀物，沉淀物用溶水性有机溶剂进行洗涤，离心去上清，沉淀物真空干燥，即获得高纯度D-荧光素产品。利用本发明的高纯度D-荧光素的制备方法，可以获得高纯度的D-荧光素产品，并且其D-荧光素的发光比活力较高，得率也高，如果用原料脱甲基产物2-氰基-6-羟基苯并噻唑的纯度(M176≥85％)时，其制备的高纯度的D-荧光素产品的纯度可达90％(HPLC，％Wt)以上，发光比活力达到甚至高于Sigma L9504D-荧光素。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN100463965C
公开(公告)日：2009-02-25
申请号：CN200610034384.4
申请日：2006-03-17
Applicant: 广东省微生物研究所 , 广东环凯微生物科技有限公司
IPC: C12N9/02
Abstract: 本发明涉及一种规模化提取和纯化天然萤火虫荧光素酶的方法，属生物技术领域。本发明在低温条件下取天然萤火虫虫尾，通过添加酶提取液研磨、离心和硫酸铵沉淀得到粗酶制剂；再通过复溶、透析、超滤、离心和阳离子交换法，可以去除99%的本底，提高荧光素酶的发光比活力50倍以上；进一步经一次分子排阻层析、亲和层析和二次分子排阻层析，即可得到高纯度的荧光素酶，其活力和本底之比可提高到5690倍。本发明解决了一般纯化方法很难达到在去除本底的同时又保持萤光素酶活力的缺陷，提供了一种从天然萤火虫中制备高活力低成本的荧光素酶的方法，适用于规模化生产高活力荧光素酶。
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公开(公告)号：CN100532568C
公开(公告)日：2009-08-26
申请号：CN200610034385.9
申请日：2006-03-17
Applicant: 广东省微生物研究所 , 广东环凯微生物科技有限公司
Abstract: 本发明涉及一种利用ATP生物发光法进行微生物数量快速检测的方法及检测试剂盒，快速检测试剂盒包括荧光素酶及其保护剂、D-荧光素、标准ATP、发光检测缓冲液、非细胞ATP去除剂、微生物细胞ATP抽提剂等试剂。应用该检测试剂盒进行微生物数量快速测定的标准方法是通过在选定的生物发光仪和选定的系统中做ATP标准曲线，取对数后得到线性回归方程，将经过非目的ATP去除和微生物ATP抽提的样品液，在同样的仪器和系统中用同一批酶进行ATP生物发光检测，同时做空白对照，得到样品和空白的CPM或RLU值，去除空白后的净相对发光值取对数后，通过建立的回归方程得到样品的ATP浓度，根据细菌、酵母、霉菌和单细胞微藻等微生物的ATP含量可换算成细菌、酵母、霉菌孢子或单细胞微藻的细胞数，或只计相当于细菌数量。
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公开(公告)号：CN1982442A
公开(公告)日：2007-06-20
申请号：CN200610034384.4
申请日：2006-03-17
Applicant: 广东省微生物研究所 , 广东环凯微生物科技有限公司
IPC: C12N9/02
Abstract: 本发明涉及一种规模化提取和纯化天然萤火虫荧光素酶的方法，属生物技术领域。本发明在低温条件下取天然萤火虫虫尾，通过添加酶提取液研磨、离心和硫酸铵沉淀得到粗酶制剂；再通过复溶、透析、超滤、离心和阳离子交换法，可以去除99％的本底，提高荧光素酶的发光比活力50倍以上；进一步经一次分子排阻层析、亲和层析和二次分子排阻层析，即可得到高纯度的荧光素酶，其活力和本底之比可提高到5690倍。本发明解决了一般纯化方法很难达到在去除本底的同时又保持萤光素酶活力的缺陷，提供了一种从天然萤火虫中制备高活力低成本的荧光素酶的方法，适用于规模化生产高活力荧光素酶。
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公开(公告)号：CN103757089A
公开(公告)日：2014-04-30
申请号：CN201410013473.5
申请日：2014-01-10
Applicant: 广东省微生物研究所 , 广东环凯微生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开一种检测饮用水中卫生质量和GMP工厂表面卫生的ATP生物发光试剂、方法及试剂盒。本发明所述的ATP生物发光试剂，包括荧光素酶、D-荧光素、去ATP无菌处理的发光稳定缓冲系统，所述的荧光素酶必须经过纯化，纯化的荧光素酶的活力本底比达到50～3000，其使得ATP生物发光试剂的发光比活力在0.4mL发光体系中，用1×10-7/L？ATP测量时的相对发光对数值达到6.5～7.5，将荧光素酶、D-荧光素、去ATP无菌处理的发光稳定缓冲系统混合后冷冻得到冻干粉。本发明采用高灵敏度稳定发光的ATP生物发光试剂对饮用水卫生质量及GMP工厂表面卫生进行快速检测，在半小时内可以完成取样与快速检测。
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公开(公告)号：CN201567331U
公开(公告)日：2010-09-01
申请号：CN200920265525.2
申请日：2009-12-24
Applicant: 广东省微生物研究所 , 广东环凯微生物科技有限公司
IPC: C12M1/34
Abstract: 本实用新型公开了一种生物发光微生物数量快速检测仪，包括有相互连接的人机模块和电源模块，被测样品与发光试剂发生反应的反应测量室，将反应测量室内混合物发出的冷光光源转换为电信号的光电倍增管，用于将光电倍增管产生的电信号放大的宽带前置放大器，用于将电信号进行筛选的信号甄别模块，该信号甄别模块电连接到用于将电信号转换为数字信号输出的中央处理模块，该中央处理模块连接到所述人机模块；在所述光电倍增管、宽带前置放大器、信号甄别模块、中央处理模块的外侧还套设有光电磁屏蔽筒。本实用新型可以在生产过程或销售途径中对生产用水、饮用水、饮料、食品等及环境卫生、消毒效果的现场检测，为生产企业和监督机构带来很大方便。
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