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公开(公告)号：CN116041549B
公开(公告)日：2023-11-07
申请号：CN202310051113.3
申请日：2023-02-02
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C07K19/00 , G01N33/569 , G01N33/68 , A61K39/102 , A61P31/04
Abstract: 本发明属于疫苗制备技术领域，具体涉及一种副猪嗜血杆菌HAPS0901和WAZ融合蛋白及其应用。该融合蛋白包含如SEQ ID NO.4所示序列。将该融合蛋白作为副猪嗜血杆菌的亚单位疫苗进行免疫，抗体效价可以达到1:800‑1:1600，且存活保护率高于副猪嗜血杆菌灭活疫苗。并且该融合蛋白可以作为ELISA检测方法的包被抗原对副猪嗜血杆菌抗体进行检测，其特异性强、灵敏度高、重复性均比较良好以及准确度高。
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公开(公告)号：CN114457078B
公开(公告)日：2022-11-18
申请号：CN202210159915.1
申请日：2022-02-22
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N7/00
Abstract: 本发明公开了一种可促进伪狂犬病毒增殖的猪源MLKL基因缺失细胞株及其应用，属于生物技术领域。本发明公开了用于敲除猪源MLKL基因的sgRNA，其特征在于，所述sgRNA包括sgRNA1和sgRNA2，所述sgRNA1的引物序列如SEQ ID NO：1‑2所示；所述sgRNA2的引物序列如SEQ ID NO：3‑4所示。利用上述的sgRNA引物以及CRISPR/Cas9载体构建敲除猪源MLKL基因，再采用有限稀释法对所得的敲除猪源MLKL基因的猪肾上皮细胞进行传代、筛选，得到猪源MLKL基因缺失细胞株，将其接种伪狂犬病毒后，该细胞株与正常猪肾上皮细胞相比能持续促进病毒增殖。
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公开(公告)号：CN114540417A
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202210159919.X
申请日：2022-02-22
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种可促进伪狂犬病毒增殖的猪源RIPK3基因缺失细胞株的构建方法及其产品和应用，涉及生物技术领域。构建该细胞株的载体的构建方法包括：gRNA1‑F和gRNA1‑R退火形成双链1，双链1再与经BbsⅠ酶切的CRISPR/Cas9载体连接，得到pX459‑gRNA1；gRNA2‑F和gRNA2‑R退火形成双链2，双链2再与经BbsⅠ酶切的辅助载体连接，得到EZ‑gRNA2；以HindIII和XhoI对获得的pX459‑gRNA1和EZ‑gRNA2分别进行双酶切，回收线性化酶切产物后连接，得到所述载体。利用本发明的载体构建的猪源RIPK3基因缺失细胞株能够促进伪狂犬病毒的增殖。
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公开(公告)号：CN111763718A
公开(公告)日：2020-10-13
申请号：CN202010658057.6
申请日：2020-07-09
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种检测猪链球菌感染的纳米PCR方法。通过对纳米PCR反应体系的引物、退火温度和引物浓度进行优化，获得高效的检测猪链球菌的纳米PCR扩增体系。本发明纳米PCR敏感度比普通PCR高出100倍，本发明扩增方法最低检出限为1×101CFU/ml；特异性强。本发明通过减少增菌和DNA提取步骤，适用于SS低含量临床样品的检测，可直接用于SS临床病料的检测，可应用于SS感染的诊断，为猪链球菌感染的鉴定和防控奠定基础，具有重大的临床应用意义和价值。
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公开(公告)号：CN110710493A
公开(公告)日：2020-01-21
申请号：CN201910922399.1
申请日：2019-09-27
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: A01K67/02
Abstract: 本发明公开了一种猪链球菌9型感染豚鼠动物模型的构建及其应用，具体涉及疫苗和药物开发及评估研究领域，其中构建的步骤：接种动物准备、菌液制备、动物接种、临床观察和解剖鉴定。本发明豚鼠模型饲养方便，易于操作，能够较强的表现出SS9感染的典型临床症状及病理变化，与仔猪自然感染情况相似，重复性好；构建了猪链球菌9型感染豚鼠动物模型，可用于开展SS9致病性、感染机制及疫苗和药物开发及评估研究工作。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107400733A
公开(公告)日：2017-11-28
申请号：CN201710892167.7
申请日：2017-09-27
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q2565/625 , C12Q2563/101
Abstract: 本发明公开了一种检测猪链球菌的交叉等温扩增引物组、试剂盒及应用。该引物组包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1～5所示的引物组；试剂盒包括上述的引物组和核酸试纸条；该试剂盒的使用方法如下：首先配制交叉等温扩增反应体系；反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读：阳性结果为出现两条条带，一条位于检测区内，另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测，易于大范围推广应用。
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公开(公告)号：CN106834432A
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201610913751.1
申请日：2016-10-20
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种检测副猪嗜血杆菌的交叉引物扩增引物组、试剂盒及应用。该引物组包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1～6所示的引物组；试剂盒包括上述的引物组和核酸试纸条；该试剂盒的使用方法如下：首先配制交叉引物扩增反应体系；恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读：阳性结果为出现两条条带，一条位于检测区内，另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测，易于大范围推广应用。
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公开(公告)号：CN103484397B
公开(公告)日：2016-07-06
申请号：CN201310365372.X
申请日：2013-08-20
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12N1/20 , C12N15/74 , A61K39/102 , A61P31/04 , C12R1/21
Abstract: 本发明公开了一种hhdA基因缺失的无抗性标记的副猪嗜血杆菌菌株及其构建方法。利用重叠PCR技术将HPS野生型菌株hhdA基因上下游序列进行连接，构建到自杀性质粒载体（PEMOC2ΔhhdA）并转入到E.β2155菌株中，通过结合转移的方法将PEMOC2ΔhhdA转入到HPS野生型菌株中筛选出发生单交换的阳性结合子菌株，经有限稀释连续培养，筛选hhdA基因缺失的无抗性标记的HPS菌株HPSΔhhdA。本发明构建的HPSΔhhdA菌株生长特性和免疫保护原性与亲本菌株相似，并且免疫HPSΔhhdA菌株后动物不产生抗hhdA蛋白抗体，可用其作为疫苗用菌株在副猪嗜血杆菌病防控和检测中区别野生型菌株。
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公开(公告)号：CN103484397A
公开(公告)日：2014-01-01
申请号：CN201310365372.X
申请日：2013-08-20
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12N1/20 , C12N15/74 , A61K39/102 , A61P31/04 , C12R1/21
Abstract: 本发明公开了一种hhdA基因缺失的无抗性标记的副猪嗜血杆菌菌株及其构建方法。利用重叠PCR技术将HPS野生型菌株hhdA基因上下游序列进行连接，构建到自杀性质粒载体（PEMOC2ΔhhdA）并转入到E.β2155菌株中，通过结合转移的方法将PEMOC2ΔhhdA转入到HPS野生型菌株中筛选出发生单交换的阳性结合子菌株，经有限稀释连续培养，筛选hhdA基因缺失的无抗性标记的HPS菌株HPSΔhhdA。本发明构建的HPSΔhhdA菌株生长特性和免疫保护原性与亲本菌株相似，并且免疫HPSΔhhdA菌株后动物不产生抗hhdA蛋白抗体，可用其作为疫苗用菌株在副猪嗜血杆菌病防控和检测中区别野生型菌株。
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公开(公告)号：CN119101752B
公开(公告)日：2025-05-09
申请号：CN202411418481.8
申请日：2024-10-11
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明属于生物领域，公开了一种检测胞内劳森菌的RPA‑CRISPR/Cas12a引物组、gRNA和探针，包括RPA引物组和探针；所述RPA引物组包括如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的上游引物和下游引物；gRNA的序列如SEQ ID NO.3所示，所述探针的序列如SEQ ID NO.4所示，所述探针的5端和3端分别为荧光基团和淬灭基团。其具有检出限低、检测准确性高的优点。同时，本发明还公开了一种试剂盒以及胞内劳森菌的检测体系。
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