一种结核分枝杆菌RNA/DNA同步定量分析方法

    公开(公告)号:CN103602737B

    公开(公告)日:2017-01-04

    申请号:CN201310557556.6

    申请日:2013-11-11

    Abstract: 本发明属于生物工程检测技术领域,具体为一种结核分枝杆菌RNA/DNA同步定量分析方法。本发明包括如下步骤:结核分枝杆菌特异性定量PCR和RT-qPCR引物和探针设计;标准DNA的克隆和质粒改造;细菌RNA与DNA的同时抽提;在同一反应管中同时进行RT-qPCR和PCR;荧光定量PCR检测方法的建立和优化。利用本发明的方法可以实现对结核分支杆菌的快速定量检测,并确定细菌的生长活性状态。本发明方法简单、灵敏度高、特异性强,解决了现有检测方法中检测周期长、阳性率低、不能区分细菌的生长状态的问题,对基础研究、临床快速诊断,及药物开发和药物使用效果的临床评价具有重要的实际意义。

    一种结核分枝杆菌RNA/DNA同步定量分析方法

    公开(公告)号:CN103602737A

    公开(公告)日:2014-02-26

    申请号:CN201310557556.6

    申请日:2013-11-11

    Abstract: 本发明属于生物工程检测技术领域,具体为一种结核分枝杆菌RNA/DNA同步定量分析方法。本发明包括如下步骤:结核分枝杆菌特异性定量PCR和RT-qPCR引物和探针设计;标准DNA的克隆和质粒改造;细菌RNA与DNA的同时抽提;在同一反应管中同时进行RT-qPCR和PCR;荧光定量PCR检测方法的建立和优化。利用本发明的方法可以实现对结核分支杆菌的快速定量检测,并确定细菌的生长活性状态。本发明方法简单、灵敏度高、特异性强,解决了现有检测方法中检测周期长、阳性率低、不能区分细菌的生长状态的问题,对基础研究、临床快速诊断,及药物开发和药物使用效果的临床评价具有重要的实际意义。

    检测人前列腺癌中17β一羟基类固醇脱氢酶7表达量的试剂盒

    公开(公告)号:CN101760525B

    公开(公告)日:2012-05-23

    申请号:CN200810207544.X

    申请日:2008-12-26

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种检测人前列腺癌样本中17β一羟基类固醇脱氢酶7(17β-HSD7)mRNA表达量的实时荧光定量PCR试剂盒。本试剂盒含有2×逆转录反应液,20×逆转录酶,焦碳酸乙二酯处理的水,2×聚合酶链反应液,20×检测用引物、荧光探针,标准品。本发明建立了利用Taqman技术检测17β-HSD7表达的方法,并经检测实践表明,本发明试剂盒及检测方法切实可行。由于本方法采用了PCR扩增技术,使得17β-HSD7表达的检测敏感性大大提高,可以在极少的标本中获得足够的信息,由于荧光探针的应用使得特异性也大大提高,降低了常规PCR扩增的假阳性率。

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