公开(公告)号：CN110358733B

公开(公告)日：2022-02-15

申请号：CN201910439753.5

申请日：2019-05-24

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 高玉龙 ,  王笑梅 ,  刘长军 ,  潘青 ,  祁小乐 ,  王永强 ,  张艳萍 ,  李凯 ,  高立 ,  崔红玉 ,  高宏雷

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  C07K14/15 ,  G01N33/569 ,  G01N33/68 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一株稳定表达A亚群禽白血病病毒(ALV‑A)gp85蛋白的细胞系及应用。所述的稳定表达A亚群禽白血病病毒gp85蛋白的细胞系，命名为293F‑Agp85，该细胞系保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其菌种保藏编号为CGMCC NO.17420。实验证明，该细胞系可以高效稳定表达A亚群禽白血病病毒gp85蛋白，其表达量高达25mg/L。此外，通过与细胞受体Tva互作和结合试验结果表明，由本发明细胞系表达获得的ALV‑A gp85蛋白具有正常的生物学活性，能够与细胞受体正常结合，并没有影响其生物学活性，且由于其表达量高，不需要转染，成本低，在体外研究ALV‑A感染细胞的机制和建立抗体检测方法等防控技术领域将具有良好的应用前景和意义。

公开(公告)号：CN110244039B

公开(公告)日：2021-12-24

申请号：CN201910367890.2

申请日：2019-05-05

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 高玉龙 ,  王笑梅 ,  潘青 ,  祁小乐 ,  王永强 ,  刘长军 ,  王牟平 ,  崔红玉 ,  张艳萍 ,  李凯 ,  高立 ,  高宏雷

IPC: G01N33/535 ,  G01N33/569 ,  G01N33/536

Abstract: 本发明公开了一种检测J亚群禽白血病病毒抗体的ELISA试剂盒及其应用。包括包被截短表达的ALV‑J gp85蛋白的酶标板，其中，所述的截短表达的ALV‑J gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明利用截短表达的J亚群禽白血病病毒(ALV‑J)gp85蛋白建立了ALV‑J抗体间接ELISA检测方法，试验表明，该方法特异性好，与AB亚群ALV抗体无交叉，且其敏感性和特异性优于同类进口试剂盒，本发明的提出为ALV‑J的检测和流行病学调查以及ALV‑J的早期诊断提供了有效技术手段。

公开(公告)号：CN113061166A

公开(公告)日：2021-07-02

申请号：CN202110381614.9

申请日：2021-04-09

Applicant: 哈尔滨维科生物技术有限公司

Inventor： 王青竹 ,  鞠妍 ,  高宏雷 ,  刘景利 ,  王晓龙 ,  张峣 ,  孙振峰 ,  朱庆虎 ,  王子敬 ,  牛卉颖

IPC: C07K14/08 ,  C07K1/14 ,  C07K1/34

Abstract: 一种病毒VP2蛋白分离纯化的规模化生产方法，属于生物制品技术领域。为解决利用大肠杆菌表达传染性法氏囊VP2蛋白生产鸡传染性法氏囊病疫苗会产生内毒素的问题，本发明提供了一种病毒VP2蛋白分离纯化的规模化生产方法，该方法为将大肠杆菌破碎后，加入一定比例的脱氧胆酸钠，然后加入有机磷酸盐缓冲液作为螯合剂，调节适当的pH，同时在溶液中加入一定浓度的NaCl，充分混匀后，利用中空纤维柱的切向流过滤功能，将内毒素单体去除。本发明所述生产方法既能生产出高浓度的法氏囊VP2蛋白，又能符合新版兽药GMP生产要求，具备低生产成本的特点。

公开(公告)号：CN112125950A

公开(公告)日：2020-12-25

申请号：CN202010909516.3

申请日：2020-09-02

Applicant: 哈尔滨维科生物技术有限公司

Inventor： 鞠妍 ,  王青竹 ,  涂亚斌 ,  高允乐 ,  高宏雷 ,  刘景利 ,  张峣 ,  王晓龙

IPC: C07K1/34 ,  C07K1/30 ,  C07K1/18 ,  C07K1/20 ,  C07K1/14 ,  C07K1/36

Abstract: 本发明公开了一种蛋白质分离纯化的规模化生产方法，属于蛋白质生物工程技术领域。本发明解决现有硫酸铵沉淀方法分离纯化蛋白质无法实现产业化的问题。本发明采用中空纤维柱式超滤装置循环替代硫酸铵沉淀后的离心和沉淀复溶的操作步骤，使硫酸铵沉淀在生产中更容易被放大且提高其纯化效率，去除更多杂质蛋白,在满足高纯度蛋白质制备的同时，达到大量蛋白质的分离纯化目的。解决了在大规模化分离纯化蛋白质时存在的除硫酸铵沉淀法外其他粗纯方法很难将含有多种蛋白质的样品进行有效分离，对后续离子交换层析造成负担，进而导致后续纯化效率低或难以进行的问题，以及现有硫酸铵沉淀在大规模化生产中存在的较大成本投入以及后续维护成本高的问题。

公开(公告)号：CN115125217A

公开(公告)日：2022-09-30

申请号：CN202210818329.3

申请日：2022-07-12

Applicant: 哈尔滨维科生物技术有限公司

Inventor： 高艳 ,  高宏雷 ,  张峣 ,  王晓龙 ,  刘景利

IPC: C12N7/00 ,  C12N5/09

Abstract: 本发明公开一种I群8型禽腺病毒全悬浮的培养方法，属于病毒扩增生物技术领域。为了提高禽腺病毒的培养后的活力。一种I群8型禽腺病毒全悬浮的培养方法是将I群8型禽腺病毒接种于LMH细胞无血清悬浮细胞系中，利用WAVETM波浪式生物反应器进行培养。该方法可以大量降低生产成本，而且生产周期短、病毒含量高，提高了培养过程中的传氧系数，减少生产耗时，提高了生产效率和疫苗的产量及质量。

公开(公告)号：CN113061166B

公开(公告)日：2022-04-12

申请号：CN202110381614.9

申请日：2021-04-09

Applicant: 哈尔滨维科生物技术有限公司

Inventor： 王青竹 ,  鞠妍 ,  高宏雷 ,  刘景利 ,  王晓龙 ,  张峣 ,  孙振峰 ,  朱庆虎 ,  王子敬 ,  牛卉颖

IPC: C07K14/08 ,  C07K1/14 ,  C07K1/34

Abstract: 一种病毒VP2蛋白分离纯化的规模化生产方法，属于生物制品技术领域。为解决利用大肠杆菌表达传染性法氏囊VP2蛋白生产鸡传染性法氏囊病疫苗会产生内毒素的问题，本发明提供了一种病毒VP2蛋白分离纯化的规模化生产方法，该方法为将大肠杆菌破碎后，加入一定比例的脱氧胆酸钠，然后加入有机磷酸盐缓冲液作为螯合剂，调节适当的pH，同时在溶液中加入一定浓度的NaCl，充分混匀后，利用中空纤维柱的切向流过滤功能，将内毒素单体去除。本发明所述生产方法既能生产出高浓度的法氏囊VP2蛋白，又能符合新版兽药GMP生产要求，具备低生产成本的特点。