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公开(公告)号:CN101177697B
公开(公告)日:2011-06-22
申请号:CN200710036942.5
申请日:2007-01-30
Applicant: 同济大学
Abstract: 一种制备核酸分子量标的方法,通过一次聚合酶链反应(PCR)扩增出完整marker所需的所有条带。将合成的两条单链核苷酸退火,使其形成双链后再利用带有的同尾末端序列依次连接到载体上。经过转化等常规步骤得到大肠杆菌克隆。在引物、dNTP、DNA聚合酶及其缓冲液存在的情况下,根据一定的循环条件进行PCR扩增。循环数量和扩增体系均可根据不同的需要调节。将得到的产物加入适量的溴酚蓝后即可制备出成品。下一次生产时只需将保种的细菌裂解后作为模板(或者直接用质粒)再次PCR扩增就可以快速、高效、大量的制备出产品,节省了人力、物力、财力。