公开(公告)号：CN1699596A

公开(公告)日：2005-11-23

申请号：CN200410045432.0

申请日：2004-05-19

Applicant: 厦门大学

Inventor： 彭宣宪 ,  纪念念 ,  彭博 ,  王三英

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 细菌微量快速同步检测方法，涉及一种微量快速同步检测细菌的方法。步骤为制备模板；PCR扩增：扩增引物为细菌核糖体核糖核酸基因通用引物；变性梯度凝胶电泳：取扩增产物进行变性梯度凝胶电泳，确定种类。采用UPPCR技术扩增细菌的16S rRNA基因片段，获得培养基中所有细菌相应基因片段序列的信息，再采用DGGE鉴定混合细菌的扩增产物，以确定检测的细菌。建立采用UPPCR和DGGE相结合的微量快速同步鉴定混合细菌的检测方法。达到微量、快速、同步检测混合细菌尤其是病原菌的目的。

公开(公告)号：CN1176218C

公开(公告)日：2004-11-17

申请号：CN02101983.5

申请日：2002-01-22

Applicant: 厦门大学

Inventor： 彭宣宪 ,  王三英 ,  张建营

IPC: C12Q1/68 ,  G01N33/569

Abstract: 涉及一种检测细菌的免疫捕捉法通用引物PCR方法，采用针对各种细菌的特异性抗体进行包被，经封闭后加入细菌溶液于36～38℃下免疫捕捉，然后热变性释放模板，吸取裂解液作为PCR反应模板，最后利用细菌16S rRNA基因通用引物进行PCR，本发明将抗原抗体反应的特异性与PCR强大的扩增效率相结合，建立了检测病原菌的iUPPCR，其特异性是通过抗体对抗原的特异识别来达到，只有能被抗体识别的细菌才能被捕捉到，而被捕捉到的细菌均可经通用引物按同一程序扩增，故可以达到快速检出的目的，重复性好，特异性强、敏感性高，其原理可用于几乎所有病原菌的检测，具有较好的应用推广价值。

公开(公告)号：CN1699573A

公开(公告)日：2005-11-23

申请号：CN200510053225.4

申请日：2005-02-17

Applicant: 厦门大学

Inventor： 彭宣宪 ,  吴丽娜 ,  徐常新 ,  王三英

IPC: C12N15/31 ,  C07K14/28 ,  C12N15/63 ,  C12P21/02 ,  C12N15/70

Abstract: 溶藻酸弧菌外膜蛋白W基因与制备方法及其应用，涉及一种基因，尤其是涉及一种在溶藻酸弧菌外膜上表达的外膜蛋白W基因与制备方法及其用途。提供一种新的溶藻酸弧菌OmpW基因，它是编码具有溶藻酸弧菌OmpW蛋白质活性的多肽的核苷酸序列和溶藻酸弧菌OmpW蛋白的氨基酸序列及其利用重组技术制备溶藻酸弧菌OmpW基因的方法。提供溶藻酸弧菌和副溶血弧菌OmpW蛋白和编码序列的应用。其步骤为将编码具有溶藻酸弧菌OmpW蛋白活性多肽的纯化的核苷酸序列可操作地连于表达调控序列，形成溶藻酸OmpW蛋白表达载体，将表达载体转入宿主细胞，形成溶藻酸弧菌OmpW蛋白的重组细胞；培养重组细胞；分离。

公开(公告)号：CN1563982A

公开(公告)日：2005-01-12

申请号：CN200410033282.1

申请日：2004-04-14

Applicant: 厦门大学

Inventor： 彭宣宪 ,  徐常新 ,  彭博 ,  王三英

IPC: G01N30/88 ,  G01N33/547 ,  G01N21/76 ,  G01N33/561 ,  G01N33/569

Abstract: 微生物交叉抗原的筛选与鉴定方法，涉及一种高通量筛选和鉴定微生物交叉抗原的方法。用双向电泳法分离微生物蛋白质，再免疫转印，多种抗血清作为第一抗体，酶标抗体为第二抗体，显色后检查其阳性；分析免疫原的交叉程度和范围；免疫原的定性，确定抗原的蛋白质种类。建立了一种采用多种抗血清作为第一抗体的免疫蛋白质组学技术，用于高通量筛选具有交叉免疫原性的蛋白质以作为多价疫苗的候选靶位。根据免疫原的交叉程度和范围，可以确定其作为交叉免疫原的可能性及其作用范围。可迅速确定某种微生物的具有交叉免疫原性的全部蛋白质，高效、快速、经济、实用。其方法具有普遍性，不仅可用于细菌，而且还可用于真菌和病毒等微生物交叉抗原的鉴定。