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公开(公告)号：CN102787073A
公开(公告)日：2012-11-21
申请号：CN201210242668.8
申请日：2012-07-13
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种构建转基因家蚕微孢子虫的方法，在家蚕微孢子感染的家蚕体腔注射脂质体包裹的转基因载体，2～4天后取蚕血淋巴加入家蚕BmN培养细胞中培养；当微孢子虫呈绿色荧光时，用昆虫培养基极度稀释，加入到细胞培养板中，选择仅有一个培养细胞呈现绿色荧光的培养孔，添加正常培养细胞培养2～4天，获得感染培养细胞；重复至少3次，取获得的感染培养细胞，匀浆破碎细胞，差速离心，纯化微孢子，感染家蚕，家蚕发病后，从感染组织纯化获得转基因家蚕微孢子。运用本发明的技术方案可以将外源基因整合进家蚕微孢子虫基因组，实现了用基因工程技术改造家蚕微孢子虫，实现调节微孢子虫基因的表达水平，为微孢子虫基因功能研究提供了方法。
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公开(公告)号：CN102615051A
公开(公告)日：2012-08-01
申请号：CN201210103405.9
申请日：2012-04-11
Applicant: 苏州大学
IPC: B07C5/28
Abstract: 本发明公开了一种称量分级鉴蛹机，包括支撑架，支撑架上设有运件滚筒，支撑架于运件滚筒的前、后侧分别设有前低后高的检测架和排件架，检测架和排件架上分别设有若干检测槽和排件槽，运件滚筒上布有若干与检测槽、排件槽对应的运件凹槽，检测架于各检测槽的底部销接有前后多块检测板，检测板下方设有称量调节机构，检测架的下方设有贮物盘，贮物盘具有终极贮物腔及与各行检测板对应的多个分级贮物腔；本发明工作时，待测件经过排件架的排件槽、运件滚筒的运件凹槽陆续进入检测槽，并经检测槽底部多级检测板的筛选进入相应重量级别的分级贮物腔或终极贮物腔内，从而实现自动称量分级，这样不仅提高了工作效率，而且节省了人工。
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公开(公告)号：CN102260690A
公开(公告)日：2011-11-30
申请号：CN201110150865.2
申请日：2011-06-07
Applicant: 溧阳市民生农业科技园有限公司 , 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种能感染茶尺蠖的重组核型多角体病毒的制备方法，包括以下步骤：(1)制备重组载体pFastBacDual-polh-helicase；(2)将重组载体pFastBacDual-polh-helicase转化进E.coliDH10BmBacmid感受态细胞内，在培养板上培养，然后通过蓝白斑筛选获得阳性菌斑，从阳性菌斑中提取重组BmBacmid-polh-helicaseDNA；(3)将上述重组BmBacmid-polh-helicaseDNA转染到家蚕培养细胞，收集培养细胞上清，获得重组病毒BmEoNPV；(4)每将重组病毒注射，纯化得到重组病毒多角体。将上述重组核型多角体病毒喷洒在茶叶树叶面上，可防止茶尺蠖对茶叶树的危害，而且该方法成本低、生产易控。
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公开(公告)号：CN1687767A
公开(公告)日：2005-10-26
申请号：CN200510040059.4
申请日：2005-05-11
IPC: G01N27/447 , C12Q1/04
Abstract: 本发明公开了一种家蚕成品卵中微粒子病病卵的检测方法，其特征在于：首先提取待检家蚕成品卵内的总DNA；根据家蚕微孢子虫基因的特异性序列，设计并合成一对特异性引物，二引物之间的间隔为0.5－2.0kb，以提取的待检家蚕成品卵内的总DNA为模板，进行PCR扩增，对扩增产物进行电泳检测，当检出家蚕微孢子虫的特异性基因片段时，判定该被检家蚕成品卵为微粒子病病卵。对家蚕成品卵进行集团检测，可以确定微粒子病的病卵率。本发明可以对家蚕成品卵直接进行检测，蚕卵无需催青至孵化，检测周期短，检测灵敏度高，能够满足用种单位的需求。
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公开(公告)号：CN102787073B
公开(公告)日：2014-05-14
申请号：CN201210242668.8
申请日：2012-07-13
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种构建转基因家蚕微孢子虫的方法，在家蚕微孢子感染的家蚕体腔注射脂质体包裹的转基因载体，2～4天后取蚕血淋巴加入家蚕BmN培养细胞中培养；当微孢子虫呈绿色荧光时，用昆虫培养基极度稀释，加入到细胞培养板中，选择仅有一个培养细胞呈现绿色荧光的培养孔，添加正常培养细胞培养2～4天，获得感染培养细胞；重复至少3次，取获得的感染培养细胞，匀浆破碎细胞，差速离心，纯化微孢子，感染家蚕，家蚕发病后，从感染组织纯化获得转基因家蚕微孢子。运用本发明的技术方案可以将外源基因整合进家蚕微孢子虫基因组，实现了用基因工程技术改造家蚕微孢子虫，实现调节微孢子虫基因的表达水平，为微孢子虫基因功能研究提供了方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102260690B
公开(公告)日：2013-12-18
申请号：CN201110150865.2
申请日：2011-06-07
Applicant: 溧阳市民生农业科技园有限公司 , 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种能感染茶尺蠖的重组核型多角体病毒的制备方法，包括以下步骤：(1)制备重组载体pFastBacDual-polh-helicase；(2)将重组载体pFastBacDual-polh-helicase转化进E.coliDH10BmBacmid感受态细胞内，在培养板上培养，然后通过蓝白斑筛选获得阳性菌斑，从阳性菌斑中提取重组BmBacmid-polh-helicaseDNA；(3)将上述重组BmBacmid-polh-helicaseDNA转染到家蚕培养细胞，收集培养细胞上清，获得重组病毒BmEoNPV；(4)每将重组病毒注射，纯化得到重组病毒多角体。将上述重组核型多角体病毒喷洒在茶叶树叶面上，可防止茶尺蠖对茶叶树的危害，而且该方法成本低、生产易控。
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公开(公告)号：CN102615051B
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201210103405.9
申请日：2012-04-11
Applicant: 苏州大学
IPC: B07C5/28
Abstract: 本发明公开了一种称量分级鉴蛹机，包括支撑架，支撑架上设有运件滚筒，支撑架于运件滚筒的前、后侧分别设有前低后高的检测架和排件架，检测架和排件架上分别设有若干检测槽和排件槽，运件滚筒上布有若干与检测槽、排件槽对应的运件凹槽，检测架于各检测槽的底部销接有前后多块检测板，检测板下方设有称量调节机构，检测架的下方设有贮物盘，贮物盘具有终极贮物腔及与各行检测板对应的多个分级贮物腔；本发明工作时，待测件经过排件架的排件槽、运件滚筒的运件凹槽陆续进入检测槽，并经检测槽底部多级检测板的筛选进入相应重量级别的分级贮物腔或终极贮物腔内，从而实现自动称量分级，这样不仅提高了工作效率，而且节省了人工。
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公开(公告)号：CN103243121A
公开(公告)日：2013-08-14
申请号：CN201310184009.8
申请日：2013-05-17
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及一种提高家蚕原种产卵量的方法：以含有荧光蛋白报告基因的piggyBAC转座子载体为基础载体，通过基因工程操作构建vasa-like基因启动子或nanos-like基因启动子控制GAL4基因表达的转基因家蚕vlg-GAL4系统或nanos-GAL4系统；通过基因工程操作构建UAS启动子控制家蚕ovo-1基因表达的转基因家蚕UAS-ovo-1系统；转基因家蚕vlg-GAL4系统或nanos-GAL4系统与UAS-ovo-1系统杂交，获得杂交一代家蚕，所得家蚕自交、产卵，即完成对家蚕原种产卵量的提高。本发明方法通过GAL4/UAS双元系统实现了在生殖腺过表达家蚕ovo-1基因，提高单蛾产卵水平，产卵量增加10%以上，同时降低张种生产成本，具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN102250935A
公开(公告)日：2011-11-23
申请号：CN201110142537.8
申请日：2011-05-30
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种载有人胰岛素样生长因子-Ⅰ基因的重组转基因载体，所述重组转基因载体包括：外源基因人胰岛素样生长因子-Ⅰ、启动子、增强子元件；构建所述重组转基因载体的转座子为piggyBAC转座子；所述启动子为丝素重链蛋白启动子；所述重组转基因载体还包括：丝素重链蛋白启动子下游信号肽相应的DNA序列、家蚕丝素轻链fib-LpolyA信号位点的序列。应用该重组转基因载体制备得到生产IGF-Ⅰ的转基因家蚕，可以提高IGF-Ⅰ的表达水平，并且避免外源基因和杆状病毒的不安全性。
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公开(公告)号：CN103243121B
公开(公告)日：2014-07-02
申请号：CN201310184009.8
申请日：2013-05-17
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及一种提高家蚕原种产卵量的方法：以含有荧光蛋白报告基因的piggyBAC转座子载体为基础载体，通过基因工程操作构建vasa-like基因启动子或nanos-like基因启动子控制GAL4基因表达的转基因家蚕vlg-GAL4系统或nanos-GAL4系统；通过基因工程操作构建UAS启动子控制家蚕ovo-1基因表达的转基因家蚕UAS-ovo-1系统；转基因家蚕vlg-GAL4系统或nanos-GAL4系统与UAS-ovo-1系统杂交，获得杂交一代家蚕，所得家蚕自交、产卵，即完成对家蚕原种产卵量的提高。本发明方法通过GAL4/UAS双元系统实现了在生殖腺过表达家蚕ovo-1基因，提高单蛾产卵水平，产卵量增加10%以上，同时降低张种生产成本，具有重要的应用价值。
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