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公开(公告)号：CN119688671A
公开(公告)日：2025-03-25
申请号：CN202411867043.X
申请日：2024-12-18
Applicant: 南京大学
Abstract: 本申请涉及一种芬顿促进的鲁米诺电化学发光成像方法，以实现单个组织切片内多种酶活性的空间映射。所述方法通过结合底物的酶转化和局部产生的过氧化氢的化学限制，定量可视化单个酶的活性。为了限制过氧化氢的扩散以进行高分辨率空间成像，本申请将氧化铁纳米粒子涂覆在组织表面以启动芬顿过程，在有限的扩散距离内将过氧化氢局部转化为短寿命的羟基自由基。
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公开(公告)号：CN113355387B
公开(公告)日：2024-04-30
申请号：CN202010903289.3
申请日：2020-09-01
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明涉及单细胞检测技术领域，特别涉及一种单细胞酶活性的检测系统及检测方法。所述检测系统包括毛细管，银丝，氧化铟锡电极，所述毛细管中装有酶活性测定溶液，所述银丝浸没在所述酶活性测定溶液中，银丝和氧化铟锡电极通过电化学工作站连接，使用电化学工作站在银丝和氧化铟锡电极上施加电压并检测电流，控制毛细管向下移动，使所述酶活性测定溶液微滴留在氧化铟锡电极表面，形成试剂盒，酶活性测定溶液与待测酶反应，通过检测荧光强度，计算酶活性。与现有的单细胞分析相比，组织中单个细胞的分析可以提供更接近真实生理状态的信息。这可以帮助阐明组织水平上的酶异质性。
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公开(公告)号：CN115184444A
公开(公告)日：2022-10-14
申请号：CN202210393517.6
申请日：2022-04-14
Applicant: 南京大学
IPC: G01N27/62
Abstract: 本申请提供一种检测酶活性的纳米试剂盒耦合电喷雾电离质谱的装置、检测方法及其应用，以测定单个活细胞中酶的活性。具体公开了，将装有与待测酶对应的底物的纳米毛细管插入活的细胞中，对细胞质进行电化学抽取，水解毛细管内的底物；在毛细管尖端对混合物进行电喷雾后，将产物与底物在分子量上进行区分，从而实现单细胞中酶活性的检测。建立的检测装置及方法，将为进一步研究单细胞中酶活性的情况提供具体的分析方法。
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公开(公告)号：CN103675060B
公开(公告)日：2015-08-05
申请号：CN201310654110.5
申请日：2013-12-05
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开一种微电极阵列，该微电极阵列包含具由细胞尺寸大小的微洞构成的微电极。通过将单细胞直接定位在含有细胞大小的微洞的微电极上，细胞膜中活化胆固醇与溶液中胆固醇氧化酶反应，在电极表面产生过氧化氢，引发可测量的鲁米诺电致发光，该发光强度与细胞膜中的活化胆固醇量相关。通过连接多通道转换器和电压发生器，在阵列中的微电极会被依次施加一个脉冲三角波电压，当在微电极表面加电压的时候，这个细胞或者微电极才能发光，利用光电倍增管PMT检测鲁米诺的化学发光强度，获取细胞膜中活化胆固醇的含量。在本微电极阵列中，单细胞被电压选择进行检测，有利于测量的自动化和分析通量。本发明可实现快速检测细胞膜中活化胆固醇的含量。
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公开(公告)号：CN113588950B
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202110686537.8
申请日：2021-06-21
Applicant: 南京大学
IPC: G01N33/574 , G01N33/58 , G01N33/573 , G01N27/327 , G01N27/49
Abstract: 电化学显微镜在过去的几十年中逐渐发展起来，用于单细胞生物分子的成像；然而，在单个细胞内实现胞内蛋白的电化学可视化是很困难的。本申请首次使用无线双极电化学发光技术(BPE‑ECL)观察了MCF 7细胞细胞核内的一个模型蛋白(KDM1/LSD1抗原)。亚微米尺寸的单壁碳纳米管与抗体相连接，用于识别相应的KDM1/LSD1抗原。在1000V/cm的低电场下，L012(鲁米诺类似物)在纳米管的阳极端被电化学氧化，发射出ECL信号，以实现其位置的无线可视化。在使用足够低的外加电压的情况下，可以观察到单个细胞内细胞核上的双极ECL发射，支持单个细胞内KDM1/LSD1抗原的电化学成像。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113533788B
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202110687017.9
申请日：2021-06-21
Applicant: 南京大学
IPC: G01Q60/60 , C08F220/56 , C08F220/20 , C08F222/20 , C08F2/48
Abstract: 本申请提供一种全固态的纳米探针，制备方法及其应用。全固态纳米探针包括玻璃管和固态聚合物，所述固态聚合物填充在玻璃管本体内；所述固态聚合物由单体和光引发剂经自由基聚合得到，所述单体包括丙烯酰胺、丙烯酸羟乙酯和聚乙二醇二丙烯酸酯。这种全新的全固态的纳米探针可以解决高电化学分辨率和高空间分辨率难以兼得的矛盾。与液态的液滴相比，针尖悬挂的固态小球具有更加稳固的外形尺寸，也具备与液滴相近的电化学性能。同时，本申请也成功得提升了扫描电化学池显微镜分辨率。
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公开(公告)号：CN107807161B
公开(公告)日：2020-04-21
申请号：CN201710842947.0
申请日：2017-09-18
Applicant: 南京大学
IPC: G01N27/327 , G01N27/30
Abstract: 本发明公开了纳米针电极在超高密度电化学传感分析中的应用，在应用中，以纳米针电极阵列作为工作电极，Ag/AgCl电极作为参比电极，Pt丝作为辅助电极，采用电压转换模式使ECL体系在纳米针尖端实现局部ECL信号，利用纳米针针尖的发光强度定量超高密度电化学实验目标分子，其中，所述纳米针电极阵列的电极密度为1.6×103～4×103，纳米针针尖的直径为700～750nm，针尖底部的直径为1～4μm，纳米针的高度为2～8μm。本发明首次提出了具有局部ECL的纳米针电极作为超高密度阵列电化学传感用于H2O2、葡萄糖、乳酸和胆碱的检测，且重现性好，通过在纳米阵列电极上修饰多个氧化酶和受体，可以实现单个阵列用于复杂生物体系中数百个分子的超高密度分析。
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公开(公告)号：CN105928927B
公开(公告)日：2019-03-12
申请号：CN201610237426.8
申请日：2016-04-15
Applicant: 南京大学
IPC: G01N21/76
Abstract: 本发明提供了一种电致化学发光成像方法快速分析单细胞内成分的方法利用，鲁米诺电致化学发光被首次应用于单细胞内生物分子(如葡萄糖)的检测。在检测过程中，单个细胞被直接定位在单个细胞大小的微洞电极；加入含有鲁米诺、曲通100和葡萄糖氧化酶的混合溶液后，曲通100可以破坏细胞膜，释放细胞内的葡萄糖到微洞中，和洞内的葡萄糖氧化酶反应生成过氧化氢；过氧化氢与鲁米诺反应在正电位下产生光信号。这种新发明的电化学发光测定方法将有可能被应用于对单细胞中更多的细胞内分子进行快速分析，以阐明细胞间的异质性。
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公开(公告)号：CN107870188A
公开(公告)日：2018-04-03
申请号：CN201610847435.9
申请日：2016-09-23
Applicant: 南京大学
IPC: G01N27/416 , G01N27/327
CPC classification number: G01N27/327 , G01N27/416
Abstract: 本发明涉及检测试剂盒及其制备方法、包含检测试剂盒的分析系统、及它们的用途。具体而言，本发明所述的检测试剂盒包含：含有非导电性毛细管、Pt层和绝缘层的复合毛细管，第二电极以及检测试剂。本发明所述的分析系统包含通过导电线相互连接的检测试剂盒、电量计和电源。本发明所述的分析系统构造更加简单，同时实现了对单个细胞内的分析物(包括小分子和蛋白质)的精确测量。
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公开(公告)号：CN107807161A
公开(公告)日：2018-03-16
申请号：CN201710842947.0
申请日：2017-09-18
Applicant: 南京大学
IPC: G01N27/327 , G01N27/30
Abstract: 本发明公开了纳米针电极在超高密度电化学传感分析中的应用，在应用中，以纳米针电极阵列作为工作电极，Ag/AgCl电极作为参比电极，Pt丝作为辅助电极，采用电压转换模式使ECL体系在纳米针尖端实现局部ECL信号，利用纳米针针尖的发光强度定量超高密度电化学实验目标分子，其中，所述纳米针电极阵列的电极密度为1.6×103～4×103，纳米针针尖的直径为700～750nm，针尖底部的直径为1～4μm，纳米针的高度为2～8μm。本发明首次提出了具有局部ECL的纳米针电极作为超高密度阵列电化学传感用于H2O2、葡萄糖、乳酸和胆碱的检测，且重现性好，通过在纳米阵列电极上修饰多个氧化酶和受体，可以实现单个阵列用于复杂生物体系中数百个分子的超高密度分析。
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