一种免疫受体RSPL1基因及其编码蛋白在植物抗病中的应用

    公开(公告)号:CN119082128A

    公开(公告)日:2024-12-06

    申请号:CN202411277480.6

    申请日:2024-09-12

    Abstract: 本发明属于植物分子生物学技术领域,具体公开了一种免疫受体RSPL1基因及其编码蛋白,以及在植物抗病中的应用。所述免疫受体RSPL1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,免疫受体RSPL1基因编码的多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的。本发明对烟草中细胞膜受体的分析发现,免疫受体RSPL1参与识别疫霉菌分泌的果胶裂解酶,对疫霉菌分泌的果胶裂解酶在植物中诱导的免疫反应起决定性作用。在烟草中沉默或敲除RSPL1基因,会明显减弱植物对疫霉菌的抗病性,本发明可以运用在作物育种抗病性改良方面,有望提高植物对疫病的抗病性,从而达到增产减药的目的。

    大豆锈病菌的检测靶标、LAMP引物、试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN116179751B

    公开(公告)日:2024-03-26

    申请号:CN202310141054.9

    申请日:2023-02-21

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测大豆锈病菌的LAMP引物组合物、试剂盒及其检测方法。提取待检微生物的DNA,取DNA溶液作为反应模板,加入试剂盒中的检测溶液进行LAMP反应,LAMP反应程序为:62℃反应扩增70min,然后在扩增产物中加入SYBRGreenI,观察颜色变化,如果颜色由橙色变为黄绿色,或在紫外灯下有荧光,表示待检物中存在大豆锈病菌,如果颜色没有变化仍是橙色,或在紫外灯下无荧光,则表示待检物中不存在大豆锈病菌。本发明具备更高的准确性、灵敏度和实效性,而且操作方便、实用性好,为大豆锈病菌的检测提供了新的技术平台,可用于大豆锈病菌的高灵敏度快速检测。

    一种萝卜基于VRN1基因的抽薹性状功能标记及其应用

    公开(公告)号:CN117106944A

    公开(公告)日:2023-11-24

    申请号:CN202211679969.7

    申请日:2022-12-26

    Abstract: 本发明属于蔬菜作物遗传育种与生物技术领域,提供了一种萝卜基于VRN1基因的抽薹性状功能标记及其应用。在抽薹性极显著差异萝卜种质6号染色体上RsVRN1基因启动子中鉴定到InDel序列差异,进而开发出InDel标记引物对:Nau‑VF:5’‑GTCAAACATATATGATCTATCTAGACCTTGC‑3’;Nau‑VR:5’‑GTTGAGAGAGAAACAGTGATGAAGGA‑3’。本发明所开发的基于VRN1基因的功能标记能实现对萝卜植株抽薹性进行快速准确鉴定。该标记在萝卜基因组DNA中扩增所得的核苷酸片段于琼脂糖凝胶电泳后呈现特异性带型,能够快速准确鉴定萝卜种质抽薹性,有利于高效进行萝卜晚抽薹性状鉴定与标记辅助选择,加快萝卜晚抽薹优良新品种培育进程。

    一种基于CRISPR/Cas9系统的萝卜基因编辑技术及其应用

    公开(公告)号:CN116926106A

    公开(公告)日:2023-10-24

    申请号:CN202211523455.2

    申请日:2022-11-30

    Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9系统的萝卜基因编辑技术及其应用,首次在萝卜‘NAU‑067’中通过根癌农杆菌介导的遗传转化实现萝卜RsPDS基因编辑。将培养4~5d无菌苗切取带柄子叶后置于MS固体培养基上预培养3d,根癌农杆菌侵染萝卜带柄子叶后在MS固体培养基上共培养3d,之后置于MS+0.75mg/L TDZ+0.35mg/L NAA+300mg/L Carb的固体培养基上诱导不定芽。以RsPDS基因为例,出芽后采用GUS染色初步分析是否为转基因阳性愈伤组织,采用改良CTAB法提取白化苗DNA,PCR扩增发现1株新叶全白化苗在靶位点2存在3个碱基缺失和单个碱基替换,1株白化嵌合株在靶位点1存在3个碱基插入和单个碱基替换。本发明建立起一种基于CRISPR/Cas9系统的萝卜功能基因编辑技术体系,为创制突变体、高效验证基因的生物学功能以及创制萝卜优异种质提供了重要技术支撑。

    一种快速获得萝卜转基因材料的方法

    公开(公告)号:CN114958904B

    公开(公告)日:2023-10-24

    申请号:CN202210536365.0

    申请日:2022-05-20

    Abstract: 本发明涉及一种快速获得萝卜转基因材料的方法,包括:对萝卜种子进行消毒种植无菌苗;活化携带目的基因的发根农杆菌;制备侵染液;获取无根苗外植体并浸入菌液进行侵染;经过共培养和脱菌培养30d后,通过表型筛选、PCR检测和qRT‑PCR分析鉴定阳性毛状根;切取阳性毛状根放置于愈伤组织培养基上诱导愈伤组织,获得转基因愈伤组织。本发明提高了发根农杆菌诱导萝卜毛状根的效率,缩短了发根时间,成功诱导了转基因愈伤组织,能够进行萝卜部分本体基因功能验证。

    一种基于非组培、快速验证萝卜盐胁迫响应基因功能的方法

    公开(公告)号:CN116790782A

    公开(公告)日:2023-09-22

    申请号:CN202211442705.X

    申请日:2022-11-17

    Abstract: 本发明涉及一种基于非组培、快速验证萝卜盐胁迫响应基因功能的方法,包括:对萝卜种子进行催芽播种;活化携带目的基因的发根农杆菌;制备侵染液;在非组培条件下切除实生根,获得无根苗并浸入侵染液进行侵染;侵染后的无根苗移栽至营养土并诱导毛状根;通过表型筛选和PCR检测鉴定阳性复合植株;对复合植株进行盐处理,通过表型和超氧阴离子自由基含量(O2‑)测定来评价阳性复合植株的耐盐性。本发明不仅提高了发根农杆菌诱导萝卜毛状根的效率,缩短发根时间,而且避免了无菌操作。成功验证了萝卜盐胁迫响应基因的功能,为萝卜本体基因功能验证提供技术参考。

    一种快速获得萝卜转基因材料的方法

    公开(公告)号:CN114958904A

    公开(公告)日:2022-08-30

    申请号:CN202210536365.0

    申请日:2022-05-20

    Abstract: 本发明涉及一种快速获得萝卜转基因材料的方法,包括:对萝卜种子进行消毒种植无菌苗;活化携带目的基因的发根农杆菌;制备侵染液;获取无根苗外植体并浸入菌液进行侵染;经过共培养和脱菌培养30d后,通过表型筛选、PCR检测和qRT‑PCR分析鉴定阳性毛状根;切取阳性毛状根放置于愈伤组织培养基上诱导愈伤组织,获得转基因愈伤组织。本发明提高了发根农杆菌诱导萝卜毛状根的效率,缩短了发根时间,成功诱导了转基因愈伤组织,能够进行萝卜部分本体基因功能验证。

    一种提高植物抗病性的基因GmLecRK-R及其应用

    公开(公告)号:CN108588087B

    公开(公告)日:2022-06-03

    申请号:CN201810465038.4

    申请日:2018-05-16

    Abstract: 本发明提供一种提高植物抗病性的基因及其应用,属于植物分子生物学与植物遗传工程领域,本发明涉及一种植物源抗病基因GmLecRK‑R及其重组表达载体和应用。该基因来源于大豆,具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,其编码的产物氨基酸序列为SEQ ID NO.2。本发明还提供一种基因沉默和重组表达载体,包括本发明所述的基因GmLecRK‑R。该基因对植物抗病性特别是疫霉菌抗性具有关键作用。过表达该基因显著性促进大豆和烟草对不同疫霉菌的抗病性,是一种理想的增强植物抗病性的基因。通过遗传转化的方法使该基因在烟草中表达使其获得对多种病原菌的抗性能力,还可以运用在作物育种抗病性改良方面。

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