公开(公告)号：CN102978207B

公开(公告)日：2014-07-16

申请号：CN201210528077.7

申请日：2012-12-11

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 柳李旺 ,  徐良 ,  蒋秋玮 ,  武剑 ,  龚义勤 ,  高相敏

IPC: C12N15/11 ,  C12Q1/68 ,  A01H1/04

Abstract: 本发明属于作物遗传育种领域，公开了萝卜霜霉病抗性基因紧密连锁的分子标记。本发明采用SRAP分子标记方法对高抗霜霉病萝卜亲本（NAU-dhp08）、高感霜霉病萝卜亲本（秋田半节青），以及抗、感亲本杂交配制的F2群体单株进行标记基因型分析，通过对F2单株抗性表型与标记基因型连锁分析，鉴定出370bp紧密连锁的抗性标记Em9/ga24370，抗性位点与标记间遗传距离为2.3cM。通过本发明提供的分子标记方法可用于萝卜霜霉病抗性育种中标记辅助选择，快速准确鉴定萝卜植株霜霉病抗性，克服了常规抗性鉴定方法工作量大、周期长、结果易受环境影响等局限，可以明显提高抗性基因型选择效率，加快萝卜高抗霜霉病新品种选育进程。

公开(公告)号：CN102505044B

公开(公告)日：2013-08-07

申请号：CN201110351885.6

申请日：2011-11-10

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 柳李旺 ,  刘君 ,  龚义勤 ,  徐良 ,  陈莹 ,  陆虎华

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及一种糯玉米杂交种遗传纯度的快速鉴定方法。其步骤是：提取糯玉米基因组DNA，利用筛选出的SRAP有效引物组合NAUSRem7/NAUSRpm1以及RAPD有效引物NAURP709、NAURP712进行PCR扩增，将扩增后的PCR产物分别进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳，拍摄DNA电泳图谱。通过比较和分析电泳图谱中的DNA片段序列差异形成的多态性扩增片段大小与位置差异，进行糯玉米F1杂交种‘苏玉糯2号’种子遗传纯度的鉴定。本发明的检测方法具有标记稳定，准确性高，不受被测样品生长阶段与环境影响，成本低，且在整个生长季节都可以进行等优点。

公开(公告)号：CN102978207A

公开(公告)日：2013-03-20

申请号：CN201210528077.7

申请日：2012-12-11

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 柳李旺 ,  徐良 ,  蒋秋玮 ,  武剑 ,  龚义勤 ,  高相敏

IPC: C12N15/11 ,  C12Q1/68 ,  A01H1/04

Abstract: 本发明属于作物遗传育种领域，公开了萝卜霜霉病抗性基因紧密连锁的分子标记。本发明采用SRAP分子标记方法对高抗霜霉病萝卜亲本（NAU-dhp08）、高感霜霉病萝卜亲本（秋田半节青），以及抗、感亲本杂交配制的F2群体单株进行标记基因型分析，通过对F2单株抗性表型与标记基因型连锁分析，鉴定出370bp紧密连锁的抗性标记Em9/ga24370，抗性位点与标记间遗传距离为2.3cM。通过本发明提供的分子标记方法可用于萝卜霜霉病抗性育种中标记辅助选择，快速准确鉴定萝卜植株霜霉病抗性，克服了常规抗性鉴定方法工作量大、周期长、结果易受环境影响等局限，可以明显提高抗性基因型选择效率，加快萝卜高抗霜霉病新品种选育进程。

公开(公告)号：CN101956007B

公开(公告)日：2012-09-05

申请号：CN201010266351.9

申请日：2010-08-30

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 柳李旺 ,  孙新菊 ,  马二磊 ,  龚义勤 ,  汪良驹 ,  刘杨

IPC: C12Q1/68 ,  A01H1/02

Abstract: 本发明涉及一种利用分子标记辅助选择进行萝卜CMS雄性不育系培育的方法，属于作物育种技术领域，用于萝卜杂种优势利用中优良雄性不育系的高效培育。本发明技术方案为：筛选出性状优良、育性稳定的自交系；选用特异引物NAUmsF4与NAUmsR4对筛选出的自交系进行PCR扩增，确定能够扩增出1069bp特异条带的自交系不可做为候选保持系；对于未能扩增出该特异条带的自交系，进行恢复基因功能标记分析，筛选出可做为候选保持系的自交系；将原始不育系与鉴定出的候选保持系杂交、4-5代回交，即可获得性状优良的新不育系和相应保持系。本发明利用分子标记快速筛选候选保持系，不受生育期和环境影响，可显著提高萝卜CMS不育系培育效率，加快优良F1杂种选育进程。

公开(公告)号：CN101017152B

公开(公告)日：2010-07-07

申请号：CN200710020045.5

申请日：2007-02-09

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 柳李旺 ,  刘广 ,  龚义勤 ,  归为民

IPC: G01N27/447 ,  G01N21/78 ,  G01N21/84 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种甘蓝种子遗传纯度的快速鉴定方法，属于生物技术领域。其步骤是：提取甘蓝基因组DNA，利用筛选出的特征引物NAUISR1034和NAUSSR1011进行PCR扩增，将扩增后的DNA片段分别进行琼脂糖凝胶和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，分别电泳0.8-1和2-2.2小时后，拍摄电泳图谱。通过比较和分析电泳图谱中DNA片段序列差异形成的多态性扩增片段大小与位置差异，进行甘蓝‘新夏50’杂种遗传纯度的鉴定。本发明的检测方法具有标记稳定，准确性高，不受被测样品生长阶段与环境影响，成本低，且可在整个生长季节都可进行等优点。