公开(公告)号：CN104419763A

公开(公告)日：2015-03-18

申请号：CN201310409784.9

申请日：2013-09-11

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 娄群峰 ,  张云霞 ,  陈劲枫 ,  何玉华 ,  贾利 ,  程春燕 ,  李季

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6841 ,  C12Q2543/10 ,  C12Q2531/113

Abstract: 本发明公开了黄瓜单拷贝基因在染色体上物理定位的方法，它是通过PCR扩增获得黄瓜单拷贝基因，然后对产物进行凝胶电泳回收纯化，以纯化产物为模板进行第二次PCR扩增，然后将第二次PCR产物标备探针。分别取黄瓜根尖和盛花期植株上的花蕾进行酶解，涂片法制片，挑选分散度高的片子，并进一步进行胃蛋白酶处理后，备用。最后将标好的探针杂交到处理好的载玻片上，在荧光显微镜下观察信号。本发明采用PCR扩增后切胶回收，之后再进行二次PCR扩增的方法，不仅可以去除基因组DNA的干扰，而且解决了切胶回收率低的问题；另外涂片法结合胃蛋白酶处理制作背景清晰且分散度高的片子可以提高信号的分辨率；通过此方法，可在染色体上直接检测到的最短长度为2kb的单拷贝基因，为黄瓜的细胞遗传学研究提供了可靠的保证。

公开(公告)号：CN101743903B

公开(公告)日：2012-05-23

申请号：CN200910262845.7

申请日：2009-12-11

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 陈劲枫 ,  娄群峰 ,  张淑霞 ,  曹玉杰 ,  王红英 ,  王东 ,  贾利

IPC: A01H1/02 ,  A01H1/04

Abstract: 本发明涉及全雌华北型黄瓜“南雌1号”的培育方法及其应用，专用于培育黄瓜全雌型新品种。将雌雄同株型华北型黄瓜“P01”与全雌型欧洲温室型黄瓜“EC1”杂交，所得F1与“P01”回交，在回交后代中选择全雌单株与雌雄同株型黄瓜亲本“P01”连续回交7代，选择BC7F1的全雌单株自交，在BC7F2中选择全雌单株继续自交，最后选择BC7F3均为全雌型植株的株系，把该株系黄瓜混合授粉，获得生长势强、优质高产的全雌华北型黄瓜新品种“南雌1号”。将“南雌1号”与普通栽培黄瓜杂交可获得种子纯度高且具有较强杂种优势的全雌型黄瓜品种。

公开(公告)号：CN101773065B

公开(公告)日：2011-10-19

申请号：CN201010017673.X

申请日：2010-01-12

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 陈劲枫 ,  张淑霞 ,  娄群峰 ,  贾利 ,  钱春桃

IPC: A01H1/02 ,  A01H5/00 ,  A01G7/06

Abstract: 本发明涉及全雌华北型黄瓜华北全雌3号的培育及其应用，属于生物技术育种领域。将雌雄同株型华北型黄瓜CC3与全雌型欧洲温室型黄瓜EC1杂交，所得F1与CC3回交，在回交后代中选择全雌单株与雌雄同株型黄瓜亲本CC3连续回交7代，选择BC7F1的全雌单株自交，在BC7F2中选择全雌单株继续自交，最后选择BC7F3均为全雌型植株的株系，把该株系黄瓜混合授粉，获得生长势强、优质高产的全雌华北型黄瓜新品种华北全雌3号。将华北全雌3号与普通栽培黄瓜杂交可获得种子纯度高且具有较强杂种优势的全雌型黄瓜品种。