公开(公告)号：CN111929438A

公开(公告)日：2020-11-13

申请号：CN202010806738.2

申请日：2020-08-12

Applicant: 南京农业大学 ,  江苏省农业科学院

Inventor： 刘斐 ,  冯志新 ,  李佳豪 ,  白昀 ,  陈蓉 ,  张越 ,  谢青云 ,  张磊 ,  李悦 ,  韦艳娜 ,  刘蓓蓓 ,  华利忠 ,  熊祺琰 ,  邵国青 ,  王丽 ,  单衍可 ,  陆雨楠

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/558 ,  G01N33/58 ,  G01N33/543 ,  G01N33/533

Abstract: 本发明提供一种检测非洲猪瘟病毒抗体的量子点微球免疫层析试纸条及其应用，属于兽医生物诊断制品的生产和技术领域。该试纸条包括底板，所述底板上依次设有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫；结合垫上包被有量子点微球标记的重组蛋白P30V和重组多肽串联蛋白R10；硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线，检测线处包被有羊抗猪IgG多抗，检测线靠近所述结合垫一侧设置；质控线处包被有非洲猪瘟病毒P30单抗，质控线靠近所述吸水垫一侧设置。配合所述试纸条使用的样本稀释液，是含有BSA和Tween20的PBS缓冲液。本发明检测方法，可用于非洲猪瘟病毒抗体的快速、高特异性、高灵敏度的定性或定量检测。

公开(公告)号：CN111912984A

公开(公告)日：2020-11-10

申请号：CN202010806185.0

申请日：2020-08-12

Applicant: 江苏省农业科学院 ,  南京农业大学

Inventor： 冯志新 ,  刘斐 ,  白昀 ,  李佳豪 ,  陈蓉 ,  张磊 ,  韦艳娜 ,  张越 ,  李悦 ,  刘蓓蓓 ,  华利忠 ,  谢青云 ,  熊祺琰 ,  邵国青 ,  单衍可 ,  陆雨楠 ,  王丽

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/558 ,  G01N33/58 ,  G01N33/543 ,  G01N33/52

Abstract: 本发明提供一种检测非洲猪瘟病毒CD2v与MGF360黏膜抗体的试纸条及其应用，属于兽医生物诊断制品的生产和技术领域。该试纸条包括设有检测线和质控线的硝酸纤维素膜，检测线处包被有鼠抗猪SC蛋白单克隆抗体；质控线处包被有非洲猪瘟阳性血清的纯化蛋白。样本稀释液含有量子点微球标记的重组蛋白MGF360和重组蛋白CD2v；重组蛋白MGF360的序列如SEQ ID NO:4；重组蛋白CD2v的序列如SEQ ID NO:2。采用本发明试纸条和样本稀释液检测非洲猪瘟病毒CD2v与MGF360黏膜抗体，可用于非洲猪瘟感染的早期检测，且特异性强，灵敏度高，稳定性好。

公开(公告)号：CN117344028A

公开(公告)日：2024-01-05

申请号：CN202311458642.1

申请日：2023-11-03

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 张国敏 ,  王一非 ,  李悦 ,  王锋 ,  薛刚 ,  陆宏辉 ,  朱广琴 ,  施建飞 ,  刘志鹏 ,  邵军辉

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种与海门山羊繁殖性状相关的SNP分子标记及其应用，属于生物技术与家畜育种领域。所述SNP分子标记包含ADCY3g.74110057C>A和ADCY3g.74116047C>A两处位点。本发明以海门山羊血液基因组DNA为模板，通过PCR‑RFLP或/和PCR产物直接测序的方法，判定基因型。其中AC基因型与海门山羊产羔数存在显著性关联，可以作为提高海门山羊繁殖性状的有效分子标记。本发明检测方法简单快速、准确性高且价格低廉，可提升海门山羊的育种效率，具有很高的应用价值。

公开(公告)号：CN111500769A

公开(公告)日：2020-08-07

申请号：CN202010224409.7

申请日：2020-03-26

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘斐 ,  李嘉豪 ,  单衍可 ,  李悦 ,  张越

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  G01N33/543 ,  G01N33/58 ,  G01N33/533

Abstract: 本发明公开了一种检测SARS-CoV-2核酸的荧光免疫层析方法，包括以下几个步骤：步骤一，结合重组酶介导等温核酸扩增技术，取适量待测样品进行核酸扩增；步骤二，结合CRISPR/Cas13a基因编辑工具，在扩增产物里加入LwaCas13a蛋白进行反应；步骤三，将反应产物与量子点微球标记抗FITC抗体溶液混合后加在核酸试纸条上，使用荧光分析仪读取结果或紫外激光灯进行结果观察。本发明采用RAA技术与核酸试纸条检测技术相结合的方法，相比于传统的RT-PCR检测手段，能够利用简单的实验仪器更快速高效的对SARS-CoV-2进行检测。

公开(公告)号：CN111206030A

公开(公告)日：2020-05-29

申请号：CN202010098589.9

申请日：2020-02-18

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘斐 ,  李嘉豪 ,  单衍可 ,  李悦

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种基于玻纤滤纸的病毒核酸提取方法，包括以下几个步骤：步骤一，在生物样本中加入蛋白酶K，快速混匀，得混合溶液；步骤二，加入结合缓冲液和Carrier RNA，上下颠倒充分混匀；步骤三，将混合液滴加在玻纤滤纸上，玻纤滤纸以双圈滤纸为支撑物固定，过滤的废液用吸水纸吸去；步骤四，用洗涤缓冲液清洗，再用吸水纸吸去废液；步骤五，在玻纤滤纸上滴加洗脱缓冲液，收集洗脱液即获得所需核酸。本方法将玻纤滤纸引入核酸抽提方法中，可以用于生物样本中核酸的富集和提取。该方法简化了核酸抽提的步骤和所需仪器设备，节省了操作时间，降低了提取成本，同时保证了高效的核酸回收率。