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公开(公告)号：CN107129535A
公开(公告)日：2017-09-05
申请号：CN201710505967.9
申请日：2017-06-20
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C07K16/20 , C07K16/065
Abstract: 经我们研究发现，刺激隐核虫的表面蛋白C1基因是潜在有效的保护性抗原基因，本发明构建了四膜虫rDNA表达载体，对刺激隐核虫表面蛋白C1基因进行了体外表达、并分离纯化了重组蛋白，最终制备了表面蛋白C1的多克隆抗体，并对其在免疫组化方面进行了初步应用。
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公开(公告)号：CN107349422B
公开(公告)日：2021-05-04
申请号：CN201710505968.3
申请日：2017-06-20
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/002 , A61K39/39 , A61P33/02 , A61P33/14 , C12N15/12 , C12N15/70 , C07K14/435
Abstract: 本申请涉及一种刺激隐核虫亚单位疫苗的制备方法及其应用。刺激隐核虫全虫疫苗的批文申请和产业化遇到巨大挑战，主要因为该寄生虫无法进行离体培养，必须在鱼体上才能进行繁殖，因而难以获得足够的虫体用以生产疫苗，更为重要的是难以制订规范的生产流程和质量标准，这迫使我们向更深层次进行研究，开发基因工程疫苗。本发明从刺激隐核虫转录组数据库中筛选出表面蛋白C1候选基因，并在四膜虫上表达出重组蛋白制备疫苗用以免疫海水鱼，通过检测疫苗的免疫原性和保护性，筛选到刺激隐核虫有效的保护性抗原基因。
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公开(公告)号：CN107418955B
公开(公告)日：2020-07-14
申请号：CN201710333645.0
申请日：2017-05-04
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/12 , C12N15/70 , C12N15/66 , C07K14/715
Abstract: 目前在鱼中发现了3种XCR1样趋化因子受体，即XCR1、XCR1L和CCR12，其中XCR1L和CCR12只在鱼类基因组中发现，但关于其功能研究甚少，截止目前，尚未有关于鱼类CCR12体外表达的任何报道。为进一步揭示石斑鱼CCR12阳性细胞在寄生虫感染组织中的迁移或增殖情况，本研究首次构建了斜带石斑鱼CCR12的N‑端区和3个胞外区的重组表达载体，通过原核系统表达了CCR12的重组蛋白，为今后石斑鱼CCR12的体外研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN108293925B
公开(公告)日：2019-09-20
申请号：CN201810346051.8
申请日：2018-04-09
Applicant: 华南农业大学
IPC: A01K61/10
Abstract: 本发明首次采用刺激隐核虫局部感染斜带石斑鱼单侧鳃的方式来进行免疫，采用最优化的感染浓度和感染时长，首次构建了刺激隐核虫局部感染斜带石斑鱼鳃组织的免疫模型，彻底消除了鱼类局部鳃组织黏膜免疫应答过程中“先天性差异”所带来的负面影响，为研究局部黏膜免疫应答规律提供了理想的免疫模型。本发明免疫模型的构建方法主要包括5个歩骤：(1)刺激隐核虫活幼虫的收集和浓度计算；(2)斜带石斑鱼的分组和驯养；(3)局部鳃组织免疫；(4)感染强度的测定；(5)局部感染后鱼体的处理。
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公开(公告)号：CN107312092A
公开(公告)日：2017-11-03
申请号：CN201710333721.8
申请日：2017-05-04
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K16/28 , C12N15/70 , C07K14/715
Abstract: 一种斜带石斑鱼CCR12的多克隆抗体制备方法及其应用。目前在鱼中发现了3种XCR1样趋化因子受体，即XCR1、XCR1L和CCR12，其中XCR1L和CCR12只在鱼类基因组中发现，但关于其功能研究甚少，截止目前，尚未有关于鱼类CCR12体外表达的任何报道，尚未有人制备过斜带石斑鱼的CCR12多克隆抗体，关于CCR12多克隆抗体的应用更无任何报道。为进一步揭示石斑鱼CCR12阳性细胞在寄生虫感染组织中的迁移或增殖情况，鉴定CCR12阳性细胞类型，本研究首次通过原核系统表达纯化了CCR12的N-端区和3个胞外区重组蛋白，并最终首次制备了兔抗CCR12重组蛋白多克隆抗体，该抗体能特异性识别石斑鱼CCR12蛋白，且标记血液中的细胞，为我们今后标记CCR12阳性细胞并开展其抗寄生虫感染研究奠定基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105941196A
公开(公告)日：2016-09-21
申请号：CN201610236729.8
申请日：2016-04-08
IPC: A01K61/00
Abstract: 本发明涉及一种抗刺激隐核虫大黄鱼苗种的生产方法，属于抗病性鱼苗生产领域，具体为抗刺激隐核虫鱼苗生产领域。首次采用变温感染和变温养殖的方式来生产抗病性的大黄鱼苗种，感染时的水温与感染后10天内的养殖水温保持一定温差，从而增强刺激隐核虫活幼虫的免疫效果，进而与轮换养殖结合，获得了有效免疫保护期较长的抗刺激隐核虫大黄鱼苗种，免疫后第8个月还具有62％的相对保护率，第9个月仍有30％的相对保护率。
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公开(公告)号：CN105941194A
公开(公告)日：2016-09-21
申请号：CN201610236726.4
申请日：2016-04-08
IPC: A01K61/00
Abstract: 本发明涉及一种抗刺激隐核虫巨石斑鱼苗种的生产方法，属于抗病性鱼苗生产领域，具体为抗刺激隐核虫鱼苗生产领域。首次采用变温感染和变温养殖的方式来生产抗病性的巨石斑鱼苗种，感染时的水温与感染后10天内的养殖水温保持一定温差，从而增强刺激隐核虫活幼虫的免疫效果，进而与轮换养殖结合，获得了有效免疫保护期较长的抗刺激隐核虫巨石斑鱼苗种，免疫后第8个月还具有66％的相对保护率，第9个月仍有30％的相对保护率。
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公开(公告)号：CN114569710A
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202210249011.8
申请日：2022-03-09
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明旨在解决激隐核虫疫苗制备成本较高且免疫保护效果不佳的技术问题，提供了一种基于嗜热四膜虫tubulin蛋白的刺激隐核虫疫苗的制备方法，首次鉴定出四膜虫中的交叉保护性抗原tubulin蛋白，并在大肠杆菌中对tubulin基因进行重组表达，以其作为抗原制备疫苗，大大提高了石斑鱼抗刺激隐核虫感染的能力。其免疫保护效果远高于利用四膜虫全虫蛋白或纤毛蛋白制备的异源疫苗。
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公开(公告)号：CN107312092B
公开(公告)日：2020-12-11
申请号：CN201710333721.8
申请日：2017-05-04
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K16/28 , C12N15/70 , C07K14/715
Abstract: 一种斜带石斑鱼CCR12的多克隆抗体制备方法及其应用。目前在鱼中发现了3种XCR1样趋化因子受体，即XCR1、XCR1L和CCR12，其中XCR1L和CCR12只在鱼类基因组中发现，但关于其功能研究甚少，截止目前，尚未有关于鱼类CCR12体外表达的任何报道，尚未有人制备过斜带石斑鱼的CCR12多克隆抗体，关于CCR12多克隆抗体的应用更无任何报道。为进一步揭示石斑鱼CCR12阳性细胞在寄生虫感染组织中的迁移或增殖情况，鉴定CCR12阳性细胞类型，本研究首次通过原核系统表达纯化了CCR12的N‑端区和3个胞外区重组蛋白，并最终首次制备了兔抗CCR12重组蛋白多克隆抗体，该抗体能特异性识别石斑鱼CCR12蛋白，且标记血液中的细胞，为我们今后标记CCR12阳性细胞并开展其抗寄生虫感染研究奠定基础。
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