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公开(公告)号:CN108018305A
公开(公告)日:2018-05-11
申请号:CN201711255197.3
申请日:2017-12-01
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用香蕉穿孔线虫伴生细菌介导的香蕉穿孔线虫防治方法。首先提供了一种构建伴生细菌介导的香蕉穿孔线虫生防工程菌的方法,是将具有杀线虫活性的生物酶的编码基因转化入香蕉穿孔线虫伴生细菌构建得到工程菌。然后利用该工程菌防治香蕉穿孔线虫,实现了通过伴生细菌介导表达杀线虫蛋白酶来防治香蕉穿孔线虫的目的。本发明获得的经遗传改造的荧光假单胞菌工程菌遗传稳定性好、对香蕉穿孔线虫的防控效果显著,商业化生产难度低;把活体菌和菌体次生代谢产物这两类生防因子有效地结合起来,充分发挥活体菌不断自我扩繁和自动扩散的特性以及代谢产物高效杀虫的活性,是一种安全、高效、稳定和可持续防治植物寄生线虫新方法和新途径。
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公开(公告)号:CN103014157B
公开(公告)日:2015-05-20
申请号:CN201210518233.1
申请日:2012-12-05
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种用单条线虫虫体或单个线虫虫卵鉴定植物寄生线虫的方法,属于分子生物学检测鉴定技术领域。在分子生物学实验中由于线虫个体小,在提取单条线虫DNA模板的过程中存在容易混入其它试剂污染或者将单条线虫切断处理过程中易发生材料损失严重。本发明包含了一步直接在PCR管中简单刺破线虫虫体或虫卵的操作,不需要进行把线虫裂解液从其它载体转移到PCR管中,这样保证了线虫及其裂解物的存在,即DNA模板的存在,模板制备效率高。本发明对目前在植物寄生线虫鉴定研究等多个方面的分子诊断标记进行了PCR验证和部分进一步的酶切实验验证,效果显著。本发明还首次公布了用单个线虫虫卵作为模板进行植物寄生线虫的鉴定。
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公开(公告)号:CN103014157A
公开(公告)日:2013-04-03
申请号:CN201210518233.1
申请日:2012-12-05
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种用单条线虫虫体或单个线虫虫卵鉴定植物寄生线虫的方法,属于分子生物学检测鉴定技术领域。在分子生物学实验中由于线虫个体小,在提取单条线虫DNA模板的过程中存在容易混入其它试剂污染或者将单条线虫切断处理过程中易发生材料损失严重。本发明包含了一步直接在PCR管中简单刺破线虫虫体或虫卵的操作,不需要进行把线虫裂解液从其它载体转移到PCR管中,这样保证了线虫及其裂解物的存在,即DNA模板的存在,模板制备效率高。本发明对目前在植物寄生线虫鉴定研究等多个方面的分子诊断标记进行了PCR验证和部分进一步的酶切实验验证,效果显著。本发明还首次公布了用单个线虫虫卵作为模板进行植物寄生线虫的鉴定。
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公开(公告)号:CN102972355A
公开(公告)日:2013-03-20
申请号:CN201210518077.9
申请日:2012-12-05
Applicant: 华南农业大学
IPC: A01K67/033 , A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种利用甘薯愈伤组织繁殖培养和保存植物寄生线虫的方法。本发明通过以下步骤实现:新鲜甘薯经洗净、表面消毒、削皮和切片放入培养皿后在培养箱中培养获得甘薯愈伤组织;取经消毒处理的植物寄生线虫接种到甘薯愈伤组织上;分别放在各自适宜温度的培养箱中黑暗培养繁殖;培养一段时间后,将植物寄生线虫连同甘薯愈伤组织于4~20℃保存。本发明方法可实现即简单、大量人工培养繁殖植物寄生线虫,又能长期保存植物寄生线虫资源的目的。
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公开(公告)号:CN116286908A
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202310333064.2
申请日:2023-03-31
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种香蕉穿孔线虫分支酸变位酶及其应用。本发明提供了香蕉穿孔线虫分支酸变位酶基因RsCM在防治香蕉穿孔线虫中的应用,所述的香蕉穿孔线虫分支酸变位酶基因RsCM,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。通过烟草瞬时表达表明,RsCM能显著抑制flg22诱导的防卫基因表达和胼胝质沉积,能显著抑制BAX诱导的细胞坏死,说明RsCM能抑制植物的防卫反应;通过in planta RNAi技术构建转基因番茄,接种线虫后发现香蕉穿孔线虫致病力下降。本发明为农业生产中的线虫防治提供一条新的策略,为抗线虫品种植物的培育提供了新靶标,为香蕉穿孔线虫的防治提供了新途径。
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公开(公告)号:CN111670716B
公开(公告)日:2022-04-19
申请号:CN202010735913.3
申请日:2020-07-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: A01G7/06 , A01G31/00 , A01G24/12 , A01K67/033
Abstract: 本发明提供了一种模拟相似穿孔线虫与烟草互作模式的方法,涉及生物学技术领域;通过在光照培养箱内,对沙培的本氏烟草(Nicotiana benthamiana)进行相似穿孔线虫的接种,利用染色观察法观察相似穿孔线虫在根系内侵染的位置,通过侵染根系产生的症状计算严重度,然后统计总线虫数与初始接种量的差异计算繁殖倍率和完成生活史情况。本发明选用本氏烟草作为寄主研究相似穿孔线虫对其的寄生性和致病性,并探究最优的线虫致病条件,为利用本氏烟草研究相似穿孔线虫与寄主互作机制提供研究基础。
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公开(公告)号:CN106135143B
公开(公告)日:2020-02-04
申请号:CN201610684090.X
申请日:2016-08-18
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用胡萝卜纯愈伤组织培养繁殖无菌香蕉穿孔线虫的方法。该方法是在无菌条件下,将香蕉穿孔线虫依次用过氧化氢溶液消毒和氧氟沙星溶液浸泡处理后,接种于无菌胡萝卜纯愈伤组织上,封口黑暗培养;所述无菌胡萝卜纯愈伤组织是在无菌条件下,将培育的胡萝卜纯愈伤组织切成小颗粒块,浸泡于含有氯霉素和万古霉素的溶液中消毒,再点种于植物组织培养基上,黑暗培养所得。本方法可稳定、高效、快速地培养繁殖大量无菌香蕉穿孔线虫,能够提供符合要求的充足无菌虫源,而且处理条件温和可控,对线虫生物活性和繁殖力影响小,使用操作更加安全,该方法具有很好的推广应用前景。
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公开(公告)号:CN107630016A
公开(公告)日:2018-01-26
申请号:CN201710787426.X
申请日:2017-09-04
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/80 , C12N1/15 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种基于喂食灰葡萄孢菌的可食真菌线虫基因RNAi方法。首先通过根癌农杆菌介导将靶基因(如水稻干尖线虫Ab-far-1基因)dsRNA转入灰葡萄孢菌,构建表达该基因dsRNA的灰葡萄孢菌工程菌(即转基因灰葡萄孢菌),将食真菌线虫(如水稻干尖线虫雌虫)接种在灰葡萄孢菌工程菌上进行培养,即可实现靶基因的有效沉默。本发明为食真菌线虫(包括可取食真菌植物线虫和其他食真菌线虫)的RNAi提供了一种真菌介导的新方法,该方法操作简便、转化率高、重复性好、周期短,可做为食真菌线虫基因功能研究的有效工具。
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公开(公告)号:CN107502662A
公开(公告)日:2017-12-22
申请号:CN201710786901.1
申请日:2017-09-04
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12Q1/6848 , C12Q1/6888 , C12Q2531/119 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种快速检测鉴定水稻潜根线虫的LAMP引物和方法。所述引物包括外引物对Ho-F3和Ho-B3,以及内引物对Ho-FIP和Ho-BIP,序列分别如SEQ ID NO.1~4所示,并以该引物建立了LAMP检测方法。本发明为水稻潜根线虫的快速检测鉴定和早期诊断提供了一个新的检测方法,特异性强、准确性高、灵敏度高,且操作简便、快速高效、简便易行、成本低、判定直观,实用性强、应用性广,结果稳定性强、可信度高,而且还可以直接检测混有不同种类的线虫样品中和植物组织样品中的水稻潜根线虫,无需样品分离,对进出境口岸和调运检疫以及田间病害早期诊断和监测工作中的水稻潜根线虫快速检测鉴定具有重要的意义。
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公开(公告)号:CN105483119A
公开(公告)日:2016-04-13
申请号:CN201511006217.4
申请日:2015-12-25
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12Q1/6806 , C12Q1/6888
Abstract: 本发明属于分子生物学检测鉴定技术领域,具体涉及一种固定线虫单条虫DNA粗提液及其制备方法与应用。本发明通过线虫样品的洗涤、固定线虫样品的裂解以及DNA粗提液的制备等步骤,制备得到固定线虫单条虫DNA粗提液,该提取液进一步进行PCR扩增并检测,条带清晰,结果可靠,准确性、灵敏度和特异性高,操作简单,成本低,可用于线虫的分子鉴定。对于其他已固定植物寄生线虫的分子鉴定具有重要的理论依据和指导意义。
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