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公开(公告)号：CN101892259B
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN201010121773.7
申请日：2010-03-05
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/82 , C12N15/66 , C12N15/113 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了一种siRNA植物基因表达载体及其构建方法和应用。本发明siRNA植物基因表达载体的序列如SEQ ID NO：1所示。本发明siRNA植物基因表达载体是将高粱花叶病毒复制酶基因、甘蔗花叶病毒外壳蛋白基因和甘蔗黄叶病毒外壳蛋白基因序列串联，再以水稻糯性α基因内含子为中间连接序列，将上述串联体连接为反向重复序列，插入植物表达载体pCAMBIA-1300的多克隆位点，得到一个由35S启动子驱动的表达上述三种病毒siRNA的植物基因表达载体。利用本发明siRNA植物基因表达载体转化植物受体材料，可以获得同时抗高粱花叶病毒、甘蔗花叶病毒和甘蔗黄叶病毒的转基因植株或材料，应用于农业生产中，可以提高植株的抗病毒能力和生存能力。
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公开(公告)号：CN114807138B
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202210499882.5
申请日：2022-05-09
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N15/66
Abstract: 本发明公开了一种植物环状RNA过表达载体及其构建方法和应用。本发明的植物环状RNA过表达载体，其含有的植物环状RNA成环框架包括上游框架序列、待表达目的基因序列和下游框架序列，所述的上游框架序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述的下游框架序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明构建的植物环状RNA过表达载体能够高效稳定的适用于各种目的基因序列的成环表达，且构建方法操作简单，成环位点准确，为深入研究环状RNA的功能提供了高效简洁的研究手段。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106755317B
公开(公告)日：2020-06-30
申请号：CN201611040208.1
申请日：2016-11-11
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供一种用于检测水稻橙叶病植原体的引物，所述用于检测水稻橙叶病植原体的引物包括上游引物及下游引物，所述上游引物具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，所述下游引物具有SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列。本发明所述引物为检测水稻橙叶病植原体的特异性引物，采用本发明所述特异性引物，只需要进行一次PCR扩增，通过电泳结果是否有特异性条带即可确定检测样品是否被水稻橙叶植原体感染，不需要通过测序进行确定，提高检测的特异性、灵敏性，节约时间和经济成本，方法操作简单，易于推广。
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公开(公告)号：CN109022615A
公开(公告)日：2018-12-18
申请号：CN201810819713.9
申请日：2018-07-24
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2600/16 , C12Q2537/143 , C12Q2521/107
Abstract: 本发明公开了一种同步检测RSMV和RGDV的双重RT‑PCR检测方法。本发明以RSMV的复制酶基因（L）和RGDV的外壳蛋白基因（S8）为靶标基因设计得到两组引物，包括引物组RSMV‑F/RSMV‑R和引物组RGDV‑F/RGDV‑R，引物序列依次如SEQ ID NO.1～4所示，并进一步建立了双重RT‑PCR检测体系，利用该体系同步检测RSMV和RGDV具有操作简单、灵敏度高、易于推广等优点，实现了对RSMV和RGDV的共同传毒媒介昆虫电光叶蝉带毒率的快速检测和水稻复合感染病株的快速诊断，在病害测报和农业生产中具有广泛应用前景。
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公开(公告)号：CN106939317A
公开(公告)日：2017-07-11
申请号：CN201710182462.3
申请日：2017-03-24
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12N15/8283
Abstract: 本发明公开了一种提高植物抵御RNA病毒的能力的方法，包括以下步骤：S1从待抵御的RNA病毒的基因组序列中选取若干靶序列，针对若干靶序列，分别设计合成与靶序列反向互补的DNA片段，DNA片段为双链DNA，靶序列的序列排列规则为5’‑NX‑C‑3’；S2将步骤S1中获得的若干个DNA片段分别构建到用于表达CRISPR/Cas9核酸酶的载体中，得到若干个重组载体；S3将若干个重组载体分别导入受体植物，从导入重组载体的受体植物中获得对RNA病毒抵御能力提高的植物。本发明首次受限了利用CRISPR/CAS9系统有效的抑制CMV在植物中的增殖，从而提高植物的抗病能力。
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公开(公告)号：CN104651537A
公开(公告)日：2015-05-27
申请号：CN201510105768.X
申请日：2015-03-11
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q2537/143
Abstract: 本发明公开了一种同时检测水稻四种病毒的多重PCR方法，通过对水稻瘤矮病毒（Rice gall dwarf virus，RGDV）、水稻齿叶矮缩病毒（Rice ragged stunt virus，RRSV）、南方水稻黑条矮缩病毒（Southern rice black-streaked dwarf virus，SRBSDV）和水稻黑条矮缩病毒（Rice black-streaked dwarf virus，RBSDV）的引物浓度、酶的用量和PCR扩增条件等的优化，建立了一种同时检测水稻四种病原的方法。本方法主要包括以四种病毒基因序列为模板设计特异扩增引物；样品总RNA的提取；四重PCR优化；PCR扩增产物的凝胶电泳检测及结果分析。本发明实现了对田间复合侵染的水稻样品的快速检测，检测结果可靠、准确、特异性强，并缩短了检测时间，有利于研究田间4种病害的发生程度，在农业生产上具有重要的指导意义，为制定科学的病虫害防控体系提供了理论依据。
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公开(公告)号：CN101892259A
公开(公告)日：2010-11-24
申请号：CN201010121773.7
申请日：2010-03-05
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/82 , C12N15/66 , C12N15/113 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了一种siRNA植物基因表达载体及其构建方法和应用。本发明siRNA植物基因表达载体的序列如SEQ ID NO：1所示。本发明siRNA植物基因表达载体是将高粱花叶病毒复制酶基因、甘蔗花叶病毒外壳蛋白基因和甘蔗黄叶病毒外壳蛋白基因序列串联，再以水稻糯性α基因内含子为中间连接序列，将上述串联体连接为反向重复序列，插入植物表达载体pCAMBIA-1300的多克隆位点，得到一个由35S启动子驱动的表达上述三种病毒siRNA的植物基因表达载体。利用本发明siRNA植物基因表达载体转化植物受体材料，可以获得同时抗高粱花叶病毒、甘蔗花叶病毒和甘蔗黄叶病毒的转基因植株或材料，应用于农业生产中，可以提高植株的抗病毒能力和生存能力。
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