公开(公告)号：CN110819609B

公开(公告)日：2022-05-10

申请号：CN201911283284.9

申请日：2019-12-13

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 管武太 ,  邓子潇 ,  李力浪 ,  吴炜坤

IPC: C12N9/20 ,  C12N15/55 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的突变脂肪酶及其制备方法与应用。该突变脂肪酶，是在耶氏解脂酵母脂肪酶2中通过迭代组合的方法引入4对二硫键突变获得的突变脂肪酶；所述的引入的4对二硫键为二硫键S2‑210、S8‑214、S60‑69、S122‑196，获得的突变脂肪酶热稳定性强，pH反应区间增大，适合在工业上进行应用。本发明中还构建了一种用于提高该突变脂肪酶产量的表达菌株，与分子伴侣共表达，进一步提高该突变脂肪酶的表达水平，即本发明可以在大幅度提高中温脂肪酶的热稳定性的同时保证高表达量，为工业化生产提供了有力的理论依据。

公开(公告)号：CN105950585A

公开(公告)日：2016-09-21

申请号：CN201610279266.3

申请日：2016-04-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 管武太 ,  吴炜坤 ,  李力浪

IPC: C12N9/20 ,  C12N15/55 ,  C12N15/81

Abstract: 本发明公开了一种热稳定的脂肪酶及制备方法与应用。该脂肪酶为氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的S2‑210脂肪酶、氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的S8‑214脂肪酶、氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的S14‑216脂肪酶或氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示的S191‑241脂肪酶。本发明通过长时间的高温分子动力学模拟模拟耶氏解脂酵母脂肪酶2的解折叠过程，分析了蛋白解折叠的主要区域和湿熔球态形成的关键步骤，有效的筛选出动力学稳定性改造的关键位点。该热稳定的脂肪酶耐热，半衰期长，特别适合在工业上进行应用。