甘蓝型油菜低亚麻酸分子标记及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN101818196B

    公开(公告)日:2012-02-08

    申请号:CN200910273437.1

    申请日:2009-12-28

    Abstract: 本发明属于油菜分子育种技术领域,具体涉及一种与甘蓝型油菜亚麻酸含量紧密连锁的共显性SNP分子标记的制备,及其作为标记在辅助选择低亚麻酸甘蓝型油菜中的应用。用引物扩增低亚麻酸甘蓝型油菜品系甲A254和高亚麻酸甘蓝型油菜品系甲A177基因组DNA,分别得到两个DNA扩增片段,然后对所述4个DNA扩增片段进行克隆、测序、核苷酸序列比对;根据序列的差异,将正向引物和反向引物的3’端的第2个碱基同时进行错配处理,设计了引物对YQ-fad31-1、YQ-fad31-2、YQ-fad32-1和YQ-fad32-2。将引物对YQ-fad31-1、YQ-fad31-2、YQ-fad32-1和YQ-fad32-2进行PCR扩增,PCR扩增和群体检测效果分析,进而得到与甘蓝型油菜低亚麻酸基因连锁的共显性SNP分子标记,本发明为油菜分子育种提供了一种新标记。本发明还第一次将引物3’端错配策略应用于甘蓝型油菜SNP多态性标记的开发和检测,并第一次利用正向引物和反向引物同时错配手段在异源多倍体作物甘蓝型油菜中开发出基于PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳SNP标记。同时本发明公开了制备所述分子标记的方法及应用。

    甘蓝型油菜低亚麻酸分子标记及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN101818196A

    公开(公告)日:2010-09-01

    申请号:CN200910273437.1

    申请日:2009-12-28

    Abstract: 本发明属于油菜分子育种技术领域,具体涉及一种与甘蓝型油菜亚麻酸含量紧密连锁的共显性SNP分子标记的制备,及其作为标记在辅助选择低亚麻酸甘蓝型油菜中的应用。用引物扩增低亚麻酸甘蓝型油菜品系甲A254和高亚麻酸甘蓝型油菜品系甲A177基因组DNA,分别得到两个DNA扩增片段,然后对所述4个DNA扩增片段进行克隆、测序、核苷酸序列比对;根据序列的差异,将正向引物和反向引物的3’端的第2个碱基同时进行错配处理,设计了引物对YQ-fad31-1、YQ-fad31-2、YQ-fad32-1和YQ-fad32-2。将引物对YQ-fad31-1、YQ-fad31-2、YQ-fad32-1和YQ-fad32-2进行PCR扩增,PCR扩增和群体检测效果分析,进而得到与甘蓝型油菜低亚麻酸基因连锁的共显性SNP分子标记,本发明为油菜分子育种提供了一种新标记。本发明还第一次将引物3’端错配策略应用于甘蓝型油菜SNP多态性标记的开发和检测,并第一次利用正向引物和反向引物同时错配手段在异源多倍体作物甘蓝型油菜中开发出基于PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳SNP标记。同时本发明公开了制备所述分子标记的方法及应用。

    甘蓝型油菜高油酸QTL及与其紧密连锁的分子标记

    公开(公告)号:CN108239674B

    公开(公告)日:2021-04-13

    申请号:CN201711154014.9

    申请日:2017-11-19

    Abstract: 本发明属于油菜分子标记制备技术领域,具体涉及甘蓝型油菜高油酸QTL及与其紧密连锁的分子标记。本发明筛选得到新的油酸含量QTL紧密连锁的分子标记BnA129,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:3和/或4所示。构建得到检测分子标记OLEA9的引物BnA129,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1和2所述。本发明的数量性状位点OLEA9及分子标记可在甘蓝型油菜高油酸性状改良中的分子标记辅助选择以及在油酸性状位点精细定位和图位克隆中应用。

    BnaSVP基因在调控油菜花期中的应用、具有不同开花期的油菜突变体材料的制备方法

    公开(公告)号:CN112608930A

    公开(公告)日:2021-04-06

    申请号:CN202110049541.3

    申请日:2021-01-14

    Abstract: 本发明属于油菜分子育种技术领域,尤其涉及BnaSVP基因在调控油菜花期中的应用、具有不同开花期的油菜突变体材料的制备方法。本发明利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对BnaSVP基因靶向突变,通过多代自交分离,获得不同拷贝突变组合的纯合突变体。通过两个世代不同地区对获得的纯合突变体进行开花期调查发现,与野生型相比,四个拷贝纯合突变体的开花期提前最多,在两个地区分别提前了40.57%和50.71%。其他不同拷贝组合突变的纯合突变体的开花期产生不同程度的开花期提前的现象,结果证明BnaSVP基因调控开花期的提前存在突变拷贝数量的累加效应。本发明为油菜花期调控的遗传改良提供重要的功能基因和育种材料。

    一种甘蓝型油菜基因突变体PTG8的构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN110257421B

    公开(公告)日:2021-01-15

    申请号:CN201910536959.X

    申请日:2019-06-20

    Abstract: 本发明属于遗传作物基因工程技术领域,尤其涉及一种甘蓝型油菜基因突变体PTG8的构建方法及其应用。其技术要点包括根据甘蓝型油菜BnaC.FAD2.a和BnaA.FAD2.a基因核苷酸序列设计并筛选两个碱基位点的靶点序列,并针对靶点序列设计引物;构建双靶点基因编辑载体BnPTG8载体;BnPTG8载体与受体材料遗传转化,获得基因突变体。本发明通过对多个不同来源的甘蓝型冬油菜品系进行筛选,获得了高效稳定转化基因型受体材料ZP1,对该受体材料精确编辑获得BnaC.FAD2.a单突变体和BnaC.FAD2.a&BnaA.FAD2.a基因双突体,为建立高效的冬油菜遗传转化技术平台奠定了基础,为甘蓝型油菜脂肪酸改良提供了新的种质资源。

    一种利用基因编辑技术改变油菜种子脂肪酸组成的方法及其应用

    公开(公告)号:CN110982838A

    公开(公告)日:2020-04-10

    申请号:CN201911313177.6

    申请日:2019-12-18

    Abstract: 本发明涉及一种利用基因编辑技术改变油菜种子脂肪酸组成的方法及其应用,所述方法包括以下步骤:S1,根据甘蓝型油菜BnaSAD.C4、BnaSAD.A5、BnaSAD.A3、BnaSAD.C3基因核苷酸序列设计并筛选五个碱基位点的靶点序列,并针对靶点序列设计引物;S2,构建五靶点基因编辑载体pBnaSAD2载体;S3,pBnaSAD2载体用受体材料甘蓝型油菜下胚轴遗传转化,获得油菜种子脂肪酸组成发生改变的突变体,上述突变植株的种子脂肪酸组成发生了显著变化。本发明所提供的方法可以不同程度改变油菜种子脂肪酸组成,为改变甘蓝型油菜种子脂肪酸组成提供了新的途径、提供了新的种质资源,具有良好的应用前景。

    一种获得高硬脂酸油菜的方法

    公开(公告)号:CN110982816A

    公开(公告)日:2020-04-10

    申请号:CN201911313173.8

    申请日:2019-12-18

    Abstract: 本发明涉及植物基因工程技术领域,具体涉及一种利用基因编辑技术获得高硬脂酸油菜的方法。所述方法包括以下步骤:S1,根据甘蓝型油菜BnSAD1.A3和BnSAD1.C3基因的核苷酸序列设计并筛选五个碱基位点的靶点序列,并针对靶点序列设计引物;S2,构建五靶点基因编辑载体pBnSAD1载体;S3,pBnSAD1载体用受体材料甘蓝型油菜下胚轴遗传转化,获得高硬脂酸油菜。本发明所提供的方法可以不同程度的提高油菜硬脂酸的含量,为甘蓝型油菜高硬脂酸育种提供了新的途径,提供了新的种质资源,具有良好的应用前景。

    一种甘蓝型油菜基因突变体PTG8的构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN110257421A

    公开(公告)日:2019-09-20

    申请号:CN201910536959.X

    申请日:2019-06-20

    Abstract: 本发明属于遗传作物基因工程技术领域,尤其涉及一种甘蓝型油菜基因突变体PTG8的构建方法及其应用。其技术要点包括根据甘蓝型油菜BnaC.FAD2.a和BnaA.FAD2.a基因核苷酸序列设计并筛选两个碱基位点的靶点序列,并针对靶点序列设计引物;构建双靶点基因编辑载体BnPTG8载体;BnPTG8载体与受体材料遗传转化,获得基因突变体。本发明通过对多个不同来源的甘蓝型冬油菜品系进行筛选,获得了高效稳定转化基因型受体材料ZP1,对该受体材料精确编辑获得BnaC.FAD2.a单突变体和BnaC.FAD2.a&BnaA.FAD2.a基因双突体,为建立高效的冬油菜遗传转化技术平台奠定了基础,为甘蓝型油菜脂肪酸改良提供了新的种质资源。

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