公开(公告)号：CN113234754A

公开(公告)日：2021-08-10

申请号：CN202110452535.2

申请日：2021-04-26

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 杨清 ,  付玉杰 ,  杜婷婷 ,  孟冬 ,  刘腾跃 ,  杨琬珑 ,  牛丽丽 ,  宋治华 ,  曹红燕 ,  陈婷

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/65 ,  A01H4/00 ,  A01H5/00 ,  A01H6/60

Abstract: 本发明提供了一种以金花葵种胚为外植体的高效遗传转化方法，涉及植物基因工程技术领域，本发明所述的方法首先构建带有目的基因的GV3101农杆菌，通过与金花葵种胚共培养进行转化，将转化完成的种胚进行脱菌处理后进行愈伤组织诱导、分化培养以及生根培养，最终高效获取含有目的基因的金花葵转基因幼苗。本发明侧重于构建金花葵稳定的遗传转化体系，效率高，时间短，操作技术简单，且转基因种子的获取为深入研究金花葵体内相关分子机制提供了重要的转基因素材。

公开(公告)号：CN113234750A

公开(公告)日：2021-08-10

申请号：CN202110452539.0

申请日：2021-04-26

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 孟冬 ,  付玉杰 ,  刘腾跃 ,  杨清 ,  杜婷婷 ,  杨琬珑 ,  宋治华 ,  曹红燕 ,  王梦莹

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/65 ,  A01H4/00 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明涉及一种快速获得以菘蓝转基因根为外植体的转基因植株的方法，包括：对菘蓝种子进行催芽后分配到土盆中；活化携带有目的基因的发根农杆菌；使用一次性注射器吸取发根农杆菌菌液创伤侵染幼茎；注射苗培养直至伤口周围萌蘖出不定根并开始分化出根毛；筛选阳性外植体；消毒后将阳性外植体接入诱导再生培养基，经历诱导愈伤、愈伤增殖、愈伤分化出芽和根；挑选分化状态良好的幼芽接入生根培养基生成完整再生植株；筛选阳性转基因苗；将阳性转基因苗经过炼苗移栽到土盆中。本发明对发根农杆菌诱导生根技术进行了优化，提高了发根效率。并通过转基因根通过组织培养获得稳定菘蓝转基因植株，相对传统方式缩短了实验周期。