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公开(公告)号:CN118185994A
公开(公告)日:2024-06-14
申请号:CN202410530670.8
申请日:2024-04-29
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明提供一种梅花无菌体系的毛状根诱导方法,并构建了基于RUBY报告基因作为筛选标记的梅花毛状根遗传转化体系。本发明对影响梅花毛状根诱导效率的外植体类型、生长环境、侵染方法、侵染浓度等条件进行筛选,成功诱导梅花毛状根生长并获得RUBY报告基因启动的红色毛状根,为利用RUBY作为筛选标记为后续外源基因的导入及利用基因工程技术探究基因在梅花本体中的功能提供技术支撑。
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公开(公告)号:CN110819732B
公开(公告)日:2022-09-02
申请号:CN201911038349.3
申请日:2019-10-29
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11 , C12N15/29
Abstract: 本发明涉及分子生物学及植物分子育种技术领域,具体涉及梅花垂枝性状紧密连锁的纯合SNP分子标记及其检测方法与应用。本发明提供两个梅花垂枝性状紧密连锁的纯合SNP分子标记,分别位于梅花第7号染色体第10245464bp处和第10284630bp处,多态性分别为G/A和G/T。这两个分子标记在垂枝/直枝性状的个体中均表现为纯合基因型,在梅花杂交后代分离群体的垂枝/直枝性状鉴定中重复性好、准确性高,可实现垂枝/直枝性状的幼苗期分子辅助选择,有助于缩短育种周期和提高育种效率。基于该SNP分子标记,本发明还提供梅花垂枝性状调控基因Pm024074,为梅花垂枝性状的调控和遗传育种提供了基础。
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公开(公告)号:CN108715902B
公开(公告)日:2020-09-25
申请号:CN201810415993.7
申请日:2018-05-03
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了梅花垂枝性状SNP分子标记及其应用,具体包括分子标记Marker301243和/或Marker311414,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本发明利用SLAF‑seq技术开发获得2个梅花垂枝性状SNP分子标记Marker301243和Marker311414,并提供了其序列扩增引物和等位特异性PCR引物。所述分子标记Marker301243和/或Marker311414及其引物在鉴定梅花品种时,具有较高的准确性、稳定性且重复性好。将其用于分子辅助选择育种,可实现苗期提早选择,快速鉴定梅花垂枝性状,减少工作量,大大缩短梅花育种时间。
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公开(公告)号:CN107278891B
公开(公告)日:2019-06-28
申请号:CN201710482433.9
申请日:2017-06-22
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明涉及一种杏梅组织培养快速繁殖方法,包括:以当年生杏梅种子为外植体,经消毒、冷藏、启动培养后,将无菌苗子叶和/或嫩茎接种在分化培养基上,培养3‑4周;获得不定芽后,将不定芽转移至抽茎培养基上,继续培养2‑3周;待丛生苗长至3‑4cm长时,将丛生苗转接入生根培养基上,培养2‑3周;然后将生根苗移栽、罩炼苗后,正常培养。本发明不定芽诱导数量达10.6,丛生苗茎高达3.56cm,丛生苗增值系数达5.5,生根率达95%。本发明实现了杏梅组培快繁,为梅花遗传转化及分子育种提供了技术支持。
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公开(公告)号:CN108715902A
公开(公告)日:2018-10-30
申请号:CN201810415993.7
申请日:2018-05-03
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了梅花垂枝性状SNP分子标记及其应用,具体包括分子标记Marker301243和/或Marker311414,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本发明利用SLAF-seq技术开发获得2个梅花垂枝性状SNP分子标记Marker301243和Marker311414,并提供了其序列扩增引物和等位特异性PCR引物。所述分子标记Marker301243和/或Marker311414及其引物在鉴定梅花品种时,具有较高的准确性、稳定性且重复性好。将其用于分子辅助选择育种,可实现苗期提早选择,快速鉴定梅花垂枝性状,减少工作量,大大缩短梅花育种时间。
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公开(公告)号:CN104830896A
公开(公告)日:2015-08-12
申请号:CN201510172958.3
申请日:2015-04-13
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12N15/82
Abstract: 本发明涉及一种用植物花瓣细胞原生质体表达蛋白的方法,该方法包括以下步骤:(1)以植物花瓣作为材料,酶解获得花瓣细胞原生质体;(2)将所述花瓣细胞原生质体在2-8℃静置20-40min;(3)用PEG和Ca2+介导法将质粒转化入原生质体,表达目的蛋白。与现有技术相比,本发明的有益效果是可以在短时间内表达目的蛋白,此原生质体蛋白表达系统可用于目的蛋白的亚细胞定位、蛋白分子的相互作用的研究。原生质体活性正常,经目的蛋白表达检测,可用于研究活体细胞内基因转录水平、蛋白表达水平、物质代谢水平的变化,是一种方便而快捷的研究目的基因功能的方法。
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公开(公告)号:CN102703586B
公开(公告)日:2015-01-07
申请号:CN201210156912.9
申请日:2012-05-18
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明提供了梅花SSR遗传图谱的构建方法,其是基于梅花全基因组序列信息开发出SSR引物组的引物序列和扩增方法,所述引物组包含670对SSR引物,并从中筛选出144对核心引物组,用于构建梅花遗传图谱。本发明建立了梅花的SSR分子标记技术体系,获得的SSR核心引物组能够反映出其稳定性、共显性,在基因组中普遍存在,便于统计等优点。利用该套标记可以进行梅花遗传图谱的构建、遗传多样性分析、品种鉴定和分子标记辅助育种等研究,推动梅花遗传学和基因组学的发展。
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公开(公告)号:CN102559880B
公开(公告)日:2013-10-09
申请号:CN201110439976.5
申请日:2011-12-23
Applicant: 北京林业大学 , 深圳华大基因科技有限公司
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明提供了一种基于生物信息学的方法构建蔷薇科原始染色体的方法及其应用。本发明方法是通过对比苹果、草莓和梅花三个蔷薇科已知基因数据,鉴定同源基因,确定参考物种染色体间关系,确定已测序物种与参考物种染色体间关系,从而构建蔷薇科原始染色体和确定测序物种从祖先染色体的进化历史。
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公开(公告)号:CN103184277A
公开(公告)日:2013-07-03
申请号:CN201110454348.4
申请日:2011-12-30
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明提供一种梅花遗传图谱构建方法,其包括如下步骤:1)构建梅花F1代拟测交群体;2)提取父母本及其子代基因组DNA;3)利用限制性内切位点相关的DNA测序方法对父母本及其子代基因组进行重测序,获得符合孟德尔遗传规律的单核苷酸多态性标记;4)根据所获得的单核苷酸多态性标记,应用拟测交策略构建梅花遗传图谱。本发明在克服梅花品种杂交结实率低、育种周期长,构建F1群体困难的基础上,利用RAD的方法和拟测交策略相结合的方法快速构建梅花的遗传图谱程。
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公开(公告)号:CN118389569A
公开(公告)日:2024-07-26
申请号:CN202410470262.8
申请日:2024-04-18
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,尤其涉及一种梅花毛状根遗传转化体系的构建方法及应用。本发明提供的梅花毛状根遗传转化体系的构建方法以梅花种子的萌发幼苗作为侵染外植体;以OD600为0.8‑0.9的发根农杆菌的菌液作为侵染液;侵染部位为子叶结节上下1.5‑2.0cm处的茎段。本发明提供的方法以梅花幼苗为实验材料,材料获得便捷,且不采用组培无菌条件,直接利用基质培养即可完成,实验操作技术简单易上手。转化方法周期短,可重复性和有效性高,能够快速实现梅花分子研究中对基因功能验证的需求。
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