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公开(公告)号:CN111690688B
公开(公告)日:2022-02-18
申请号:CN202010426220.6
申请日:2020-05-19
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/90 , C12N15/869 , C12N15/66 , C12N15/113 , C12N7/01 , A61K39/295 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种表达靶向REV的CRISPR/Cas9的重组马立克氏病病毒及其应用。本发明构建了靶向REV基因组序列的CRISPR/Cas9系统,通过对设计的靶向REV的sgRNAs进行筛选,获得了具有最佳敲除效果的sgRNA。研究发现,靶向REV的CRISPR/Cas9能够有效阻止REV对宿主细胞的感染。将上述CRISPR/Cas9表达框架插入MDV基因组,构建了表达靶向REV的CRISPR/Cas9的重组MDV;该重组病毒能够有效阻止REV对宿主细胞的感染,并对REV强毒的攻击具有明显的预防和病毒清除作用。本发明提出的一种表达靶向REV的CRISPR/Cas9的重组MDV有望作为一种新型疫苗用于禽网状内皮组织增生病的防控。
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公开(公告)号:CN111235117B
公开(公告)日:2021-08-27
申请号:CN202010090643.5
申请日:2020-02-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一株自然适应体外细胞培养的鸡传染性法氏囊病病毒经典株及其应用。所述的鸡传染性法氏囊病病毒经典株命名为IBD17JL01,保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其保藏编号为CGMCC No.19291。该病毒株为本发明首次分离鉴定的一株自然适应DF1和CEF体外细胞培养的鸡传染性法氏囊病病毒经典毒株,该株病毒能够直接在体外传代细胞系DF1细胞、CEF细胞或DT40细胞上增殖。将该毒株灭活后制备成灭活疫苗,可使免疫雏鸡对强毒攻击产生100%的保护效果。因此,该病毒株(IBD17JL01株)可以作为天然适应体外细胞培养的疫苗候选株,用于IBDV的免疫防控。
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公开(公告)号:CN113151193A
公开(公告)日:2021-07-23
申请号:CN202110308742.0
申请日:2021-03-23
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/00 , C12N15/63 , C12N15/66 , A61K39/235 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一株血清4型禽腺病毒反向遗传疫苗株rR188I及其构建方法和应用。本发明的疫苗株rR188I是在我国FAdV‑4新近分离株HLJFAd15基因组全长的感染性克隆粘粒Fos‑rFAdV4基础上将Hexon基因的第563位碱基由G突变为A,即编码的第188位氨基酸由R突变为I,获得感染性克隆粘粒Fos‑rR188I,然后利用Fos‑rR188I成功拯救出疫苗株rR188I。致病性实验显示rR188I对SPF鸡无致病性(突变之前具有100%的死亡率)。免疫保护实验证明,接种rR188I的SPF鸡可以完全抵抗FAdV‑4强毒株的攻毒感染,证明rR188I具有非常好的免疫原性,可以作为疫苗候选毒株,同时致弱毒株大大降低了强毒株生物安全的隐患。
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公开(公告)号:CN112538464A
公开(公告)日:2021-03-23
申请号:CN202011419903.5
申请日:2020-12-07
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , C12N15/66 , C12N15/64 , C12N15/34 , A61K39/235 , A61P31/20 , A61P1/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种血清4型禽腺病毒反向遗传疫苗株rHN20及其构建方法和应用。本发明构建了我国FAdV‑4新近分离株HLJFAd15基因组全长的感染性克隆粘粒Fos‑rFAdV4,在此基础上将Hexon基因替换为国外弱毒株ON1的Hexon基因获得感染性克隆粘粒Fos‑rHN20。利用Fos‑rHN20成功拯救出疫苗株rHN20。致病性实验显示rHN20对SPF鸡不再有致病性(突变之前具有100%的死亡率)。免疫保护实验证明,接种rHN20的SPF鸡可以完全抵抗FAdV‑4强毒株的攻毒感染,证明rHN20具有非常好的免疫原性,可以作为疫苗候选毒株,同时致弱毒株大大降低了强毒株生物安全的隐患。
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公开(公告)号:CN112500458A
公开(公告)日:2021-03-16
申请号:CN202011473614.3
申请日:2020-12-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒新型变异株亚单位疫苗、其制备方法及应用。针对IBDV新型变异株的流行,本发明对IBDV新型变异株代表毒株SHG19主要保护性蛋白VP2的基因表达盒进行了设计,引入了利于其正确构象形成的元件,构建了重组原核表达质粒,制备了重组大肠杆菌基因工程菌,经过表达条件和纯化条件的摸索,高效制备了IBDV新型变异株病毒样颗粒,将该病毒样颗粒与佐剂乳化制备成疫苗,试验结果显示,该疫苗不仅对同源的新型变异株产生了100%的免疫保护,而且对异源的vvIBDV的致死性攻击也产生了良好的免疫保护。本发明的提出为IBDV新型变异株以及超强毒株的防治提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN111690688A
公开(公告)日:2020-09-22
申请号:CN202010426220.6
申请日:2020-05-19
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/90 , C12N15/869 , C12N15/66 , C12N15/113 , C12N7/01 , A61K39/295 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种表达靶向REV的CRISPR/Cas9的重组马立克氏病病毒及其应用。本发明构建了靶向REV基因组序列的CRISPR/Cas9系统,通过对设计的靶向REV的sgRNAs进行筛选,获得了具有最佳敲除效果的sgRNA。研究发现,靶向REV的CRISPR/Cas9能够有效阻止REV对宿主细胞的感染。将上述CRISPR/Cas9表达框架插入MDV基因组,构建了表达靶向REV的CRISPR/Cas9的重组MDV;该重组病毒能够有效阻止REV对宿主细胞的感染,并对REV强毒的攻击具有明显的预防和病毒清除作用。本发明提出的一种表达靶向REV的CRISPR/Cas9的重组MDV有望作为一种新型疫苗用于禽网状内皮组织增生病的防控。
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公开(公告)号:CN110261599A
公开(公告)日:2019-09-20
申请号:CN201910406683.3
申请日:2019-05-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/535 , G01N33/569 , G01N33/537
Abstract: 本发明公开了一种检测A、B亚群禽白血病病毒抗体的ELISA试剂盒及其应用。包括包被截短表达的ALV-A gp85蛋白以及截短表达的ALV-B gp85蛋白的酶标板,其中,所述的截短表达的ALV-A gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述的截短表达的ALV-B gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明利用截短表达的A、B亚群禽白血病病毒的gp85蛋白建立了A、B亚群禽白血病病毒的抗体间接ELISA检测方法,试验表明,该试剂盒用于检测A、B亚群禽白血病病毒抗体时,其敏感性与同类进口试剂盒相当,但特异性优于同类进口试剂盒,与J亚群禽白血病病毒抗体无交叉反应。本发明的提出为A、B亚群禽白血病病毒的检测和流行病学调查以及早期诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号:CN110244039A
公开(公告)日:2019-09-17
申请号:CN201910367890.2
申请日:2019-05-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/535 , G01N33/569 , G01N33/536
Abstract: 本发明公开了一种检测J亚群禽白血病病毒抗体的ELISA试剂盒及其应用。包括包被截短表达的ALV-J gp85蛋白的酶标板,其中,所述的截短表达的ALV-J gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明利用截短表达的J亚群禽白血病病毒(ALV-J)gp85蛋白建立了ALV-J抗体间接ELISA检测方法,试验表明,该方法特异性好,与AB亚群ALV抗体无交叉,且其敏感性和特异性优于同类进口试剂盒,本发明的提出为ALV-J的检测和流行病学调查以及ALV-J的早期诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号:CN114592088B
公开(公告)日:2024-04-02
申请号:CN202210151323.5
申请日:2022-02-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种用于检测或区分禽呼肠孤病毒4种不同基因型的多重PCR试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有多重PCR引物组。所述的多重PCR引物组由1条通用上游引物,和分别用于扩增ARV‑Ⅰ、ARV‑Ⅰ‑sub、ARV‑Ⅱ以及ARV‑Ⅴ特异性基因区域的4条特异性下游引物组成,其中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,分别用于扩增ARV‑Ⅰ、ARV‑Ⅰ‑sub、ARV‑Ⅱ、ARV‑Ⅴ特异性基因区域的4条特异性下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2‑5所示。实验结果表明,该方法敏感性高,特异性良好,对人工感染动物试验样品检测结果表明,mPCR与常规PCR方法检测结果一致,符合率为100%,适用于禽病毒性关节炎临床诊断、流行病学调查以及临床监测工作。
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公开(公告)号:CN114196639B
公开(公告)日:2023-09-19
申请号:CN202111370551.3
申请日:2021-11-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N15/62 , C12N15/85 , A61K39/295 , A61K39/245 , A61K39/125 , A61P31/14 , A61P31/22
Abstract: 本发明公开了一种共同表达3型鸭甲型肝炎病毒P1和3C基因的重组鸭瘟病毒及其构建方法和用途,属于医学或兽医学技术领域。具体地,本发明利用重组克隆技术,将包含β‑actin启动子以及3型鸭甲型肝炎病毒P1和3C基因的基因片段β‑actin‑P13C插入到鸭瘟病毒US7和US8基因之间的间隔区中,构建获得在US7和US8基因之间插入β‑actin‑P13C表达框架的重组粘粒,由其拯救获得共同表达3型鸭甲型肝炎病毒P1和3C基因的重组鸭瘟病毒疫苗株rDEV‑US78‑P13C。结果显示,重组病毒疫苗株rDEV‑US78‑P13C免疫雏鸭后7天,就可以诱导对3型鸭甲型肝炎病毒强毒致死性攻击的完全保护,同时对鸭瘟病毒攻毒也显示了良好的免疫保护效果,是一株良好的预防鸭病毒性肝炎和鸭瘟的二联疫苗。
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